聂常富
- 作品数：12 被引量：34H指数：3
- 供职机构：河南省肿瘤医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划河南省基础与前沿技术研究计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 肝细胞靶向性半乳糖-聚乙二醇-聚乙烯亚胺纳米基因载体的合成及其理化特性被引量：3
- 2008年
- 背景:对聚乙二醇-聚乙烯亚胺进行半乳糖化修饰,可使其成为具有肝细胞靶向性的纳米基因载体半乳糖化聚乙二醇-聚乙烯亚胺[Galactosylated poly(ethylene glycol)-graft-polyethylenimine,Gal-PEG-PEI]。目的:合成Gal-PEG-PEI,考察其基本理化特征,为下一步的转染研究提供参考。设计、时间及地点:对比观察基因工程实验,于2007-10/2008-06在中山大学生物医学工程中心完成。材料:两步法合成Gal-PEG-PEI。方法:应用纳米粒径-zeta电位仪、透射电镜、凝胶阻滞实验和EB结合实验测定Gal-PEG-PEI与psiRNA复合物的理化性质,CCK-8法检测其细胞毒性,纳米复合物转染HepG2细胞并观察其转染效率。主要观察指标:Gal-PEG-PEI/psiRNA的粒径、zeta电位及形态;包覆效率;细胞毒性实验结果;肝脏靶向性转染结果。结果:Gal-PEG-PEI/psiRNA复合物的粒径随N/P的增大而减小,最小粒径为81.1nm,而zeta电位随Gal-PEG-PEI中氨基与psiRNA磷酸基比例的增大呈上升趋势;Gal-PEG-PEI对siRNA质粒有较好的包覆效率。Gal-PEG-PEI载体的细胞毒性小于聚乙烯亚胺而其转染效率高于聚乙烯亚胺。结论:成功合成Gal-PEG-PEI纳米基因载体,表现出良好的肝细胞靶向性,且细胞毒性较小。
- 聂常富刘春桃李华张彤杨扬蔡常洁陆敏强帅心涛陈规划
- 关键词：半乳糖非病毒基因载体
- 靶向性半乳糖化聚乙二醇-聚乙烯亚胺纳米载体介导siRNA质粒对肝癌细胞BEL-7402的转染效率检测
- 2010年
- 目的检测靶向性半乳糖化聚乙二醇-聚乙烯亚胺(Gal-PEG-PEI)纳米载体介导siRNA质粒(psiRNA)对肝癌细胞BEL-7402的转染效率。方法纳米粒径仪测定Gal-PEG-PEI/psiRNA纳米粒的粒径和zeta电位;以Gal-PEG-PEI/psiRNA为研究组,以聚乙二醇-聚乙烯亚胺(PEG-PEI)/psiRNA、Lipofectamine2000和裸psiRNA转染为对照组,转染BEL-7402细胞,48h后用流式细胞仪测定各组的转染效率。转染前加入1mg半乳糖观察各组的半乳糖竞争拮抗结果。结果 Gal-PEG-PEI/psiRNA复合物的粒径随氨基与磷酸基比例(N/P)的增大而减小,最小粒径为81.1nm;Gal-PEG-PEI载体的转染效率为(24.34±2.55)%,与Lipofectamine2000组的转染效率(22.88±1.22)%比较差别无统计学意义(P>0.05),但明显高于PEG-PEI的转染效率(12.91±0.36)%及裸psiRNA的转染效率(0.73±0.08)%,差别有统计学意义(P<0.01);加入竞争拮抗剂半乳糖后Gal-PEG-PEI介导的转染效率由(24.34±2.55)%下降至(5.85±1.83)%,差别有统计学意义(P<0.01)。结论 Gal-PEG-PEI/psiRNA纳米粒对肝癌细胞BEL-7402有较高的转染效率,具有良好的肝细胞靶向性。
- 聂常富韩风张玲庞春王云检陈规划
- 关键词：转染肝癌
- HLA-E基因慢病毒载体构建及其在肝癌HepG2细胞中的表达被引量：1
- 2008年
- 目的构建表达人类白细胞抗原-E(HLA-E)基因慢病毒载体,探讨慢病毒介导HLA-E基因在肿瘤免疫中的意义。方法2006年10月至2007年11月在中山大学附属第三医院肝移植中心应用pGC-E1-GFP-HLA-E慢病毒载体转导肝癌HepG2细胞,检测慢病毒载体的转导效率、细胞内HLA-E信使核糖核酸(mRNA)及蛋白质水平的表达。结果pGC-E1-GFP-HLA-E慢病毒载体转导肝癌HepG2细胞72h的转导效率为(95.0±1.3)%;通过RT-PCR检测24h后细胞内HLA-E mRNA水平是肝癌HepG2细胞的(8.73±1.05)倍,72h后为(293.48±42.01)倍,差异具有统计学意义(P<0.01)。细胞免疫组化显示转导HLA-E后细胞内的蛋白水平明显增强。结论慢病毒载体系统能够使转导的基因在靶细胞中得到稳定表达,是基因治疗中的理想载体。
- 张彤方天翎李华聂常富蔡常洁许赤汪根树李玺易慧敏姜楠陈规划
- 关键词：慢病毒人类白细胞抗原-E基因表达
- AFP-L3和AFP mRNA联合检测在肝癌治疗疗效观察和预后中的作用被引量：6
- 2014年
- 目的探讨甲胎蛋白(AFP)异质体(AFP-L3)和AFP mRNA联合检测在肝癌(HCC)治疗疗效观察和预后中的作用。方法联合检测AFP-L3、AFPmRNA在HCC患者中表达情况。结果 HCC患者的AFP mRNA(368.65±5.28)和AFP-L3(195.84±3.31)蛋白表达量均明显高于肝硬化组和肝良性病变组(t=23.32、30.15、30.21、25.46,均P<0.01)。另外,HCC患者的AFP阳性率(69.35%)和AFP-L3阳性率(79.03%)明显高于肝硬化组和肝良性病变组(χ2=5.78、10.98、14.52、26.23,均P<0.05)。62例HCC患者中,术后AFP转阴48例,其中AFP-L3仍为阳性18例,其1、2、3年生存率分别为72.22%(13/18)、44.44%(8/18)、22.22%(4/18);另外30例患者AFP和AFP-L3均为阴性,其1、2、3年生存率分别为80.00%(24/30)、53.33%(16/30)、50.00%(15/30);AFP和AFP-L3均转阴者的3年生存率明显高于AFP转阴而AFP-L3未阴者(χ2=3.98,P<0.05)。结论测定患者AFP mRNA和AFP-L3蛋白水平可以鉴定良、恶性肝病,对于HCC的早期诊断及预后判断有重要的临床意义。
- 邱大鹏韩风聂常富周进学周进学
- 关键词：AFP-L3AFP肝癌
- Gal-PEG-PEI/psiRNA肝靶向性纳米基因载体对人胎肝细胞系L-02细胞的转染效率检测被引量：1
- 2011年
- 目的:检测半乳糖-聚乙二醇-聚乙烯亚胺/小干扰RNA质粒(Gal-PEG-PEI/psiRNA)肝靶向性纳米基因载体对人胎肝细胞系L-02细胞的转染效率。方法:合成Gal-PEG-PEI/psiRNA纳米复合物,采用纳米粒径仪测定复合物的粒径和zeta电位,用不同Gal-PEG-PEI氨基与psiRNA磷酸基比例(N/P)的Gal-PEG-PEI/psiRNA纳米复合物转染L-02细胞,以Lipofectamine2000、非靶向性载体PEG-PEI/psiRNA和裸psiRNA转染为对照组,48 h后用流式细胞仪测定转染效率。转染前加入1 mg半乳糖观察其半乳糖竞争拮抗结果。结果:Gal-PEG-PEI/psiRNA纳米复合物的粒径随N/P增大而减小,N/P≥1/15时达最小粒径,约为80 nm。Gal-PEG-PEI/psiRNA纳米基因载体的转染率为(20.4±0.9)%,明显高于非肝靶向性载体PEG-PEI/psiRNA(P<0.01)及裸psiRNA(P<0.01),但低于Lipofectamine 2000(P<0.05);加入竞争性拮抗剂半乳糖后Gal-PEG-PEI/psiRNA纳米基因载体的转染率下降至(4.8±2.1)%,PEG-PEI/psiRNA介导的转染率则不受影响。结论:Gal-PEG-PEI/psiRNA纳米基因载体可明显提高人胎肝细胞系L-02细胞的转染效率,且具有良好的肝细胞靶向性。
- 聂常富张彤陈规划韩风邱大鹏王云检庞春
- 关键词：靶向性转染
- 负压封闭引流术在预防直肠癌患者手术切口感染的临床分析被引量：13
- 2016年
- 目的观察负压封闭引流术对预防直肠癌患者手术切口感染的临床效果,为直肠癌手术患者临床治疗提供依据。方法选取2012年1月-2015年1月南阳市中心医院诊治的直肠癌手术患者98例,随机分为试验组与对照组,每组各49例,对照组使用常规换药模式,试验组在对照组基础上使用负压封闭引流术,观察两组患者术后切口感染率、并发症发生率及切口愈合情况,数据采用SPSS16.0统计软件进行分析。结果患者术后切口感染率试验组为4.1%、对照组为18.4%,两组患者术后切口感染率比较,差异有统计学意义(P<0.05);两组患者的切口愈合时间分别为(8.1±1.9)d和(11.5±2.8)d,换药次数分别为(2.5±1.8)次和(4.9±3.1)次,两组患者在愈合时间以及换药次数比较,差异有统计学意义(P<0.05);两组患者均未发生切口裂开以及肿瘤种植等并发症,两组患者的并发症发生率比较,差异无统计学意义。结论负压封闭引流术能有效减少直肠癌手术患者切口感染,缩短患者的切口愈合时间,改善患者预后,提高患者生活质量,值得在临床直肠癌手术患者中推广使用。
- 贾会文宋展王文胜刘驰张磊聂常富
- 关键词：负压封闭引流术直肠癌手术切口感染临床疗效
- RNA干扰白细胞抗原-G增强自然杀伤细胞对肝癌的免疫监视被引量：6
- 2009年
- 目的构建表达人类白细胞抗原-G（HLA—G）基凶shRNA载体，探讨其对自然杀伤细胞（NK）细胞杀伤效应的影响。方法构建4个HLA—G—shRNA真核表达质粒，转染至Huh7细胞。检测HLA—GmRNA及蛋白质水平的表达。将NK-92MI细胞与靶细胞共同培养，以LDH释放法观察不同效靶比时NK-92MI细胞对靶细胞的杀伤效应。结果经酶切及测序鉴定证实，插入序列与设计的序列相符。RealTime—PCR和Western-blot结果均表明重组载体抑制了Huh7细胞HLA-G基因的表达。NK-92MI细胞对转染HLA—G的shRNA的Huh7细胞杀伤作用明显升高（P〈0．01）。封闭NK-92MI细胞ILT2受体后，杀伤作用降低（P〈0．01）。结论HLA—GshRNA可以增强NK细胞对肝癌细胞的杀伤效应。
- 曾宪成张彤李华方天翎聂常富蔡常洁杨扬陆敏强陈规划
- 关键词：人类白细胞抗原GRNA干扰
- 肝靶向性纳米载体介导psiRNA对HepG2细胞HLA-E干扰效率的检测
- 2011年
- 目的:检测肝细胞靶向性Gal-PEG-PEI纳米基因载体介导psiRNA干扰HepG2细胞HLA-E表达的效率。方法:分别用Gal-PEG-PEI/psiRNA、裸psiRNA、PEG-PEI/psiRNA、Gal-PEG-PEI/NC-psiRNA、Lipofectamine 2000/psiRNA转染HepG2细胞,同时以未转染的HepG2细胞为空白对照组,以Gal-PEG/NC-psiRNA(无义siRNA质粒)转染为阴性对照组。48 h后,Real-time RT-PCR检测HLA-EmRNA表达水平,Western blot法检测HLA-E蛋白表达水平。结果:Gal-PEG-PEI组对HLA-E的干扰效率为55%(mRNA水平)和62%(蛋白水平),显著高于Lipofectamine 2000组、PEG-PEI组、裸psiRNA组和阴性对照组(P<0.01)。结论:Gal-PEG-PEI/psiRNA纳米粒具有良好的肝细胞靶向性,对HepG2细胞HLA-E有较高的干扰效率。
- 聂常富韩风邱大鹏庞春王云检陈规划
- 关键词：基因干扰纳米基因载体人类白细胞抗原-E
- 皮下通道型胆囊肝胆管成型术治疗肝胆管结石合并感染的临床效果分析被引量：3
- 2016年
- 目的分析皮下通道型胆囊肝胆管成形术治疗肝胆管结石合并感染的临床效果,为临床治疗肝胆管结石合并感染提供参考依据。方法选取2011年1月-2013年12月108例在医院治疗的肝胆管结石合并感染患者,分为观察组与对照组,各54例;对照组使用传统手术治疗,观察组使用皮下通道型胆囊肝胆管成形术治疗,观察两组治疗有效率,数据采用SPSS 16.0软件进行统计分析。结果观察组患者治疗有效率为92.59%,对照组为77.78%;观察组患者并发症发生率为12.96%,低于对照组的53.70%;于1年后对患者进行随访发现,观察组复发率为9.26%;对照组复发率为22.22%,两组比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论皮下通道型胆囊肝胆管成形术具有较高的临床应用效果,可有效的减少患者在术后出现并发症的发生率,同时其复发率较低,值得在临床中推广使用。
- 贾会文宋展崔建虎刘驰刘向业聂常富
- 关键词：肝胆管结石
- 肝靶向性Gal-PEG—PEI纳米载体介导psiRNA转染HepG2细胞效率的检测被引量：1
- 2009年
- 目的检测肝细胞靶向性Gal—PEG—PEI纳米基因载体介导psiRNA转染HepG2细胞的效率。方法纳米粒径仪和透射电镜测定Gal—PEG—PEI／psiRNA复合物的粒径和形态，转染HepG2细胞，48h后用流式细胞仪测定转染效率。转染前加入1mg半乳糖观察其半乳糖竞争拮抗结果。结果Gal—PEG—PEI／psiRNA复合物的粒径随N／P的增大而减小，最小粒径为81．1nm；GaI—PEG—PEI载体的转染效率为（37．34±2．50）％，明显高于PEG—PEI、Lipofectamine^TM2000及裸psiRNA；加入竞争拮抗剂半乳糖后Gal－PEG—PEI的转染效率下降至3．60％。结论Gal—PEG—PEI纳米基因载体对HepG2细胞有较高的转染效率，具有良好的肝细胞靶向性。
- 聂常富陈规划李华杨扬陆敏强帅心涛
- 关键词：转染
