秦慧
- 作品数：17 被引量：144H指数：6
- 供职机构：四川大学华西医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划四川省卫生厅科研基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 重型再生障碍性贫血免疫抑制治疗疗效预测指标的研究被引量：7
- 2009年
- 目的探索可能用于重型再生障碍性贫血(再障)免疫抑制治疗(IST)疗效预测的指标。方法收集37例重型再障患者的静脉血标本,20例健康献血员作为正常对照。采用酶联免疫吸附实验检测血浆内白介素-2(IL-2)及干扰素-γ(IFN-γ)水平,采用序列特异引物聚合酶链反应检测HLA-DRB1*15及HLA-DRB1*1501,结合年龄、性别及粒细胞和红细胞膜表面CD55、CD59表达情况等,对各项指标与疗效的关系进行统计分析。结果治疗前IL-2水平升高者有效率高于水平降低者(66.7%vs28.6%,P<0.05);治疗前IFN-γ水平升高者有效率高于水平降低者(73.7%vs25.0%,P<0.05);HLA-DRB1*15阳性者有效率与阴性者差异无统计学意义(62.5%vs44.4%,P>0.05);HLA-DRB1*1501阳性者与阴性者有效率均为50%;CD55、CD59表达降低者有效率与表达未降低者差异无统计学意义(80.0%vs40.0%,P>0.05);年龄≤40岁者有效率高于年龄>40岁者(60.0%vs14.3%,P<0.05);女性患者有效率高于男性患者(62.5%vs42.9%,P<0.05)。结论重型再障患者治疗前血浆IL-2、IFN-γ水平、性别及年龄可作为IST疗效预测指标,而HLA-DRB1*15、HLA-DRB1*1501及CD55、CD59在本研究中不具有预测作用。
- 牟晓艳常红刘霆龚玉萍牛挺秦慧马洪兵孟文彤
- 关键词：白介素-2干扰素-Γ再生障碍性贫血免疫抑制治疗
- 蛋白质组学方法筛选维甲酸耐药相关蛋白被引量：8
- 2007年
- 目的比较维甲酸耐药细胞与敏感细胞的差异蛋白表达谱,分析、筛选维甲酸耐药相关蛋白。方法双向凝胶电泳分离维甲酸耐药细胞株 MR2及维甲酸敏感细胞株 NB4的全蛋白,经PDQuest v7.1分析软件筛选出差异表达的蛋白质点,质谱分析获得差异蛋白质的肽质量指纹图谱,以此通过 Mascot 软件查询 SWISS-PROT 蛋白数据库,进行差异蛋白质的鉴定,获得候选维甲酸耐药相关蛋白。采用蛋白质印迹试验及半定量 RT-PCR 在蛋白水平和 mRNA 水平对差异蛋白质进行验证。结果获得了分辨率高、重复性好的 APL 细胞的双向电泳图谱,维甲酸耐药细胞株 MR2及维甲酸敏感细胞株 NB4的 pH 4-7双向凝胶电泳图谱显示平均蛋白点分别为890±45和912±56。在二者间分析到57个差异蛋白点,23个蛋白点在 RA 耐药细胞株 MR2中上调,34个蛋白点下调。25个差异蛋白点经质谱鉴定,17个获得成功鉴定,对应于13个不同分子,其中一个是未知功能的新蛋白FLJ00279,其余分属于癌蛋白(DJ-1),转录相关蛋白(MYC 启动子结合蛋白1),分子伴侣[热应激蛋白(HSP)HSP70、HSP60及蛋白质二硫键异构酶],代谢类蛋白(抑制素、磷酸丙糖异构酶1及钙网蛋白)和信号转导(Rho GDP dissociation inhibitor beta)以及细胞骨架蛋白(ACTG1蛋白、β-5-微管蛋白抑制素及角蛋白10)。癌蛋白 DJ-1、calreticulin、HSP60及 ACTG1在 RA 耐药细胞株 MR2中为高表达,其余为低表达。蛋白印迹试验结果与双向电泳结果一致且展现了 DJ-1和 calreticulin 在多个异构体上有差异表达。但半定量 RT-PCR 显示 HSP70和 HSP60的蛋白质表达差异与其 mRNA 水平变化无相关一致性。两种实验结果提示翻译后蛋白的修饰或剪切介导了蛋白的表达差异。结论应用双向凝胶电泳连接质谱的蛋白质组学方法筛选到新蛋白 F1300279以及功能已知的 DJ-1、calreticulin、HSP70、HSP60、抑制素及 MYC 启动子结合蛋白1等维甲�
- 秦慧刘霆杨金亮黄欣柳斌宋鑫赵霞魏于全
- 关键词：维甲酸蛋白质组电泳抗药性髓样
- 维甲酸耐药细胞与敏感细胞的差异表达蛋白分析被引量：2
- 2006年
- 背景与目的:维甲酸耐药机制有待进一步的深入研究。蛋白质组学以所有蛋白质为研究对象,从细胞水平及整体水平研究蛋白质的组成及其变化规律。本实验应用蛋白组学技术整体比较维甲酸耐药细胞与敏感细胞蛋白表达谱,筛选差异表达蛋白,以期获得维甲酸耐药相关蛋白。方法:提取维甲酸耐药细胞株MR2及维甲酸敏感细胞株NB4的总蛋白,通过双向凝胶电泳分离,获得二者高质量的蛋白表达谱,经PDQuestv7.1软件比较分析,筛选出二者间差异表达的蛋白质点,通过质谱仪鉴定表达差异的蛋白。结果:获得了分辨率高、重复性好的APL细胞的双向电泳图谱。PDQuestv7.1软件分析结果表明,MR2细胞及NB4细胞的pH4～7双向凝胶电泳所展示的蛋白点分别有(890±45)个和(912±56)个。二者间有57个差异显著的蛋白点,其中23个在MR2细胞中上调,34个下调。经质谱鉴定了10个蛋白,鉴定成功率达70%,鉴定的蛋白涉及癌蛋白、细胞周期调控和信号转导相关蛋白质。结论:应用双向凝胶电泳技术整体展示了维甲酸耐药细胞株MR2及敏感细胞株NB4的蛋白表达谱,并分析、鉴定、筛选出与维甲酸耐药相关的差异表达蛋白,为进一步从多因素角度研究认识维甲酸耐药机制提供了新的线索。
- 秦慧刘霆杨金亮黄欣柳斌宋鑫赵霞魏于全
- 关键词：差异表达蛋白维甲酸耐药NB4细胞株
- HyperCVAD化疗方案治疗血液恶性肿瘤的临床应用
- ＜正＞目的：HyperCVAD 强力化疗方案治疗血液系统恶性肿瘤近年来在国外报道日渐增多,文献显示疗效显著而且耐受性良好,但是在中国缺乏大宗病例报道,故本研究欲探讨该方案治疗我国急性淋巴细胞白血病、恶性淋巴瘤等血液系统肿...
- 牛挺刘霆向兵常红黄杰李建军何川秦慧龚玉萍贾永前朱焕玲廖小梅羊裔明吴谨绪邓承祺
- 文献传递
- 血红蛋白E/β地中海贫血1例及家系分析
- 2008年
- 探讨HbE/β地中海贫血的临床特点以及遗传特征。方法:对患者家系4人(父母及胞妹)进行体格检查、常规血液学检查、血红蛋白电泳、RDB基因分析,并进行家系分析和遗传指导。结果:先证者为HbE/β地中海贫血,父亲轻度β地中海贫血,母亲及胞妹为HbE特征。HbE/β地中海贫血临床表现与重型或中间型β地中海贫血相似,但症状较轻些。结论:HbE/β地中海贫血遗传率高,高危地区人群筛查,遗传指导及产前诊断等有效地阻止了HbE/β地中海贫血患者的出生。这对优生优育具有重要意义。
- 曾彦秦慧顾玲贾永前文钦倪勋罗建平
- 关键词：反向斑点杂交家系分析
- 应用蛋白印迹-免疫沉淀-质谱法筛选卵巢癌肿瘤抗原被引量：2
- 2005年
- 背景与目的肿瘤抗原的筛选对卵巢癌的早期诊断有重要意义。目前,噬菌体抗体库技术(phageantibodylibrary)、核糖体展示技术(ribosomedisplay)和血清学筛选重组cDNA表达文库(serologicalanalysisofrecombinantcDNAexpressionlibraries,SEREX)技术等作为常用的肿瘤抗原筛选方法已得到广泛应用。本研究采用蛋白印迹鄄免疫沉淀鄄质谱方法筛选和鉴定卵巢癌肿瘤抗原,以期建立一种新的筛选肿瘤抗原的方法及技术路线。方法应用蛋白印迹(Westernblot)法筛选出差异明显的卵巢癌患者血清,用该血清与SKOV3细胞裂解物反应,免疫沉淀富集抗原,与正常血清的免疫沉淀样品比较,获得差异蛋白条带,然后进行质谱鉴定、生物信息学分析。结果采用蛋白印迹筛选到标记为7号的卵巢癌患者血清,与其他血清比较有明显的差异,经免疫沉淀、聚丙烯酰胺凝胶电泳与正常血清免疫沉淀样品比较,发现在接近66.2ku的位置处有一差异蛋白条带,经质谱鉴定、生物信息学分析为热休克蛋白(heatshockprotein,HSP)70及细胞角蛋白(cytokeratin)9。结论采用蛋白印迹鄄免疫沉淀鄄质谱法进行卵巢癌肿瘤抗原的筛选和鉴定是一种行之有效的方法。
- 柳斌杨金亮宋鑫黄欣阚兵秦慧文艳君赵霞魏于全
- 关键词：卵巢肿瘤免疫沉淀质谱
- 应用血清蛋白组学技术筛选鼻咽癌肿瘤抗原被引量：13
- 2005年
- 目的:应用血清蛋白组学技术优化肿瘤抗原筛选方法,筛选鼻咽癌肿瘤抗原。方法:以免疫印迹技术筛选出含有特异性抗体的鼻咽癌患者血清,运用免疫沉淀技术对血清与鼻咽癌细胞株(CNE1)的裂解物进行处理以富集肿瘤抗原,正常人血清做对照,经凝胶电泳找出差异条带,通过质谱分析、数据库搜索和信息学分析鉴定差异蛋白。结果:应用此方法找出存在于鼻咽癌样本中的明显差异条带1条,重复性较好,经鉴定该条带为膜结合IgM。结论:采用上述方法筛选肿瘤抗原行之有效,可能成为肿瘤抗原筛选的一种简单、便捷、灵敏的有效方法,得到鼻咽癌候选抗原膜结合IgM。
- 宋鑫杨金亮唐小海柳斌秦慧黄欣田聆魏于全
- 关键词：血清蛋白质组学免疫沉淀鼻咽癌肿瘤抗原
- 丹参酮ⅡA诱导原代培养人急性早幼粒细胞白血病细胞分化被引量：52
- 2000年
- 为探讨丹参酮ⅡA（tanshinoneⅡA，TanⅡA）对原代培养的人急性早幼粒细胞白血病（APL）细胞的诱导分化作用，将5例APL患者白血病细胞分别与0．5μg／mlTanⅡA在体外共同培养7天，而后观察细胞形态变化，并测定药物作用前后细胞的四唑氮蓝（NBT）还原能力，用流式细胞术测定细胞DNA周期、CD33及CD11b的表达。结果显示：0．5μg／mlTanⅡA可诱导82．5％±4．8％的APL细胞向终末细胞分化，并使细胞生长明显受抑，NBT还原能力显著增强；CD33表达下降，CD11b表达升高，与全反式维甲酸的作用无显著性差异（P＞0．05）。流式细胞术分析显示，TanⅡA将APL细胞阻滞于G0／G1期，S期细胞数明显减少。本研究结果表明，TanⅡA在体外能诱导APL细胞向终末分化，其作用与全反式维甲酸相当，进一步开发它将具有一定的临床价值。
- 梁勇羊裔明袁淑兰刘霆贾永前徐才刚牛挺秦慧秦萍
- 关键词：急性早幼粒细胞性白血病细胞分化
- 干扰素、高三尖杉酯碱、阿糖胞苷对慢性粒细胞性白血病Ph^(+)细胞生长影响的实验研究被引量：2
- 2000年
- 为观察干扰素 (IFN)、高三尖杉酯碱 (HHT)及阿糖胞苷 (Ara- c)体外对慢性粒细胞性白血病(CML) Ph+ 细胞的生长影响 ,探讨其临床治疗 CML 的有效组合方案。以药物作用 2 4小时液体培养及常规染色体分析法研究 IFN、HHT及 Ara- c对 10例 CML 慢性期患者的骨髓中 Ph+ 细胞的生长影响。结果显示 :IFN、HHT及Ara- c对 CML Ph+ 细胞均有选择性杀伤作用 ,以 IFN作用最强。IFN与 HHT及 Ara- c联合对 Ph+ 细胞的杀伤作用明显强于 HHT及 Ara- c单药运用 (P<0 .0 5 ) ,而 HHT及 Ara- c有促 IFN清除 Ph+ 细胞趋势 (P>0 .0 5 )。以上结果提示 ,IFN、HHT及 Ara- c皆可作为治疗 CML 慢性期患者的有效药物 ;两药或三药的联合应用有望获得比单药更好的效应。
- 秦慧羊裔明曾立明
- 关键词：慢性白血病干扰素高三尖杉酯碱阿糖胞苷
- 丹参酮Ⅱ_A诱导白血病NB4细胞分化分子机制研究被引量：22
- 2008年
- 目的:探讨丹参酮ⅡA诱导白血病NB4细胞分化的分子机制。方法:0.5 mg.L-1丹参酮ⅡA体外处理NB4细胞72 h后,分别采用显微镜观察细胞形态分化;MTT检测细胞增殖抑制作用;收集细胞并提取总RNA,反转录获得cDNA,再转录并标记成cRNA(Cy3荧光标记),与Express ChipTMH04芯片杂交,最后对芯片进行扫描和数据分析,检测丹参酮ⅡA诱导NB4细胞分化前后相关基因谱表达的变化。结果:0.5 mg.L-1丹参酮ⅡA可诱导92.8%NB4细胞向终末细胞分化。其中,中、晚幼粒细胞占27.0%;杆状及分叶核粒细胞占68.2%;细胞生长被明显抑制。基因芯片检测发现:3 360条基因中有183条基因差异表达,其中包括23条(5条上调和18条上调)分化相关基因和与细胞凋亡、周期调控、DNA转录、DNA损伤/修复、蛋白转运、信号传导、核受体、细胞因子和生长因子、癌基因和抑癌基因等相关基因。结论:丹参酮ⅡA可能通过调控多种相关基因、特别是分化相关基因的表达诱导白血病细胞分化,本研究有助于阐明丹参酮ⅡA诱导分化抗肿瘤的分子机制。
- 杜睿郑鸿王艳萍孟文彤秦慧袁淑兰
- 关键词：NB4细胞分化基因芯片
