王默霏
- 作品数：49 被引量：93H指数：6
- 供职机构：郑州师范学院更多>>
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- 相关领域：农业科学生物学轻工技术与工程更多>>
- 蝴蝶兰C类花器官发育基因PhAG1a的克隆及表达分析被引量：3
- 2017年
- 为研究MADS-box基因在花器官发育中的功能,进一步理解兰科植物花器官发育的分子调控机理。利用RT-PCR和RACE技术从蝴蝶兰中克隆了一个MADS-box基因PhAG1a(GenBank登录号为KY399811),并利用实时荧光定量方法分析其表达特性。序列分析表明,该基因的cDNA全长为1 107 bp,含完整的开放阅读框,可编码248个氨基酸,属于C功能AGAMOUSE家族基因,与蝴蝶兰属的PhalAG1和PeMADS1基因关系最近;表达模式分析表明,PhAG1a基因在营养器官中不表达,只在蕊柱和子房中表达。在5类突变体花器官中,PhAG1a基因在退化雄蕊变异为侧瓣、侧瓣退化与蕊柱合生和侧萼片变异为唇瓣等3类突变体花器官中,PhAG1a基因的表达没有变化,在侧瓣变异为唇瓣和侧瓣顶端长出花药的突变体花器官中,PhAG1a基因在蕊柱中的表达水平显著降低。推测该基因在决定蝴蝶兰合蕊柱的发育中起重要的调控作用。
- 袁秀云许申平雷志华王默霏崔波
- 关键词：MADS-BOX
- 铁皮石斛RCA2基因克隆与生物信息学分析被引量：4
- 2017年
- 核酮糖1,5-二磷酸羧化酶/加氧酶是光合碳同化作用的关键酶,它对调节铁皮石斛Rubisco活性和光合速率具有直接的作用,对其进行基因等方面的研究,会对改变植物光合速率打下良好基础。该研究以一年生铁皮石斛叶片为材料,采用RT-PCR和RACE技术成功克隆了Rubisco活化酶(RCA)基因,并对其进行生物信息学分析。结果表明:RCA基因全长1 730 bp,命名为RCA2(Gen Bank登录号KT205842),其中5'-UTR 81 bp、3'-UTR 326 bp,开放阅读框1 323 bp,编码440个氨基酸,分子质量为48.53 k Da,等电点为6.19,包含P-loop NTPase超家族基因结构。氨基酸多重序列比对发现RCA2核苷酸序列与蝴蝶兰的相似性高达87%。RCA2编码蛋白为亲水性蛋白;亚细胞定位于叶绿体基质;蛋白质二级结构分析,α螺旋占30.68%,延伸链占25.45%,不规则折叠占43.86%。RCA2编码蛋白质的功能预测发现,RCA2在中间代谢起到了一个非常重要的角色。该研究发现对铁皮石斛光合作用关键酶Rubisco的分析可为其光合作用特性的发掘提供理论基础,并为提高温室大棚栽培效率提供理论依据。
- 蒋素华张燕王默霏王洁琼崔波
- 关键词：铁皮石斛克隆生物信息学分析
- 萼脊兰FPPS基因的克隆及表达分析被引量：3
- 2018年
- 为了深入研究兰科植物花香的调控机制,该研究以萼脊兰为材料,利用RACE技术克隆萼脊兰花香物质的关键酶基因FPPS的全长序列并对其进行生物信息学分析和时空表达分析。结果显示:FPPS基因全长为1317bp,开放阅读框(ORF)长度为1047bp,编码348个氨基酸(GenBank登录号为MG018616)。FPPS编码的蛋白质为亲水性蛋白,等电点(pI)为5.11。萼脊兰FPPS氨基酸序列与春兰的相似性为92%,与霍山石斛的相似性为90%。FPPS蛋白分布于线粒体、叶绿体和分泌途径中,且可信度为3。预测FPPS蛋白质结构功能,可能有意义的功能包括翻译、氨基酸的生物合成、脂肪酸代谢和辅酶因子的生物合成等,他们的几率分别是4.666、4.108、3.689、3.040;对其蛋白质二级结构进行预测,α螺旋占39.37%,无规则卷曲占43.10%,延伸链占17.53%;以4kk2.1.A为模板进行蛋白质的三维结构预测,与FPPS蛋白一致性为72.14%。荧光实时定量PCR结果显示,FPPS基因在盛花期的花瓣中表达量最高,时空特异性明显,为研究萼脊兰花香成分和花香分子生物学打下了良好基础。
- 蒋素华王默霏郝平安袁秀云马杰崔波
- 关键词：克隆
- 蝴蝶兰PhTSJT1基因的克隆及在低温胁迫下的表达分析被引量：4
- 2019年
- 本研究从蝴蝶兰叶片中克隆了茎部特异基因Ph TSJT1的全长序列(GenBank登录号为MF797883),并分析了其在不同组织及低温胁迫下的表达特性。结果表明,Ph TSJT1基因全长994 bp,编码239个氨基酸,属于Class-Ⅱ谷氨酰胺酰胺基转移酶超家族成员;同源性分析表明,该蛋白与多种植物的茎部特异蛋白和铝诱导蛋白有较高的同源性,进化上与小兰屿蝴蝶兰的茎部特异蛋白亲缘关系最近;该基因在营养器官中表达水平较高,在花器官中表达水平较低;13℃/8℃(昼/夜)的低温胁迫抑制PhTSJT1基因的转录表达,并随着低温胁迫时间的延长,Ph TSJT1基因的表达水平逐渐降低,在温度恢复正常时其表达水平升高;4℃冷胁迫低温条件下,PhTSJT1基因在处理1 h时,表达水平升高,处理8 h时表达水平最高,16 h后表达水平逐渐降低。由此推测,PhTSJT1参与4℃冷胁迫的分子调控。本研究不但有助于理解热带亚热带植物的耐冷机制,也为蝴蝶兰新品种的遗传改良提供帮助。
- 袁秀云许申平王默霏雷志华崔波
- 关键词：低温胁迫基因表达
- 八个海棠品种叶片营养成分与抗氧化活性分析被引量：1
- 2022年
- 海棠叶片中含有丰富的生物活性和营养成分,但是大部分被浪费和丢弃。为合理开发和充分利用海棠叶片,该研究以8种海棠为试验材料,对其叶片主要营养成分、矿物元素和抗氧化活性进行分析。研究发现,海棠叶片不但含有丰富的可溶性糖、可溶性蛋白、氨基酸和矿质元素,而且具有较强的抗氧化活性,但品种间具有显著性差异。在叶片营养成分方面,可溶性糖含量最高的组“世标1号”、“冬红”和西府海棠比含量最低组垂丝海棠、“绚丽”和“红丽”的含量高57.50%;叶片可溶性蛋白含量最高的“世标1号”比含量最低的“绚丽”高84.34%;氨基酸的含量为57.13~88.78 mg/g。在矿质元素含量方面,海棠叶片常量元素中Ca含量最高,微量元素中Fe含量最高。在抗氧化活性方面,8种海棠叶片类黄酮和总酚的含量分别为37.46~58.27 mg/g和70.66~133.49 mg/g,其中“冬红”的含量最高;8种海棠叶片去除DPPH自由基和ABTS阳离子自由基的效果均较好,“冬红”和垂丝海棠叶片清除DPPH自由基和ABTS阳离子自由基能力较强,分别为92.79%和91.75%。对8个海棠品种叶片的12个指标进行主成分分析,得出8种海棠叶片营养成分和抗氧化活性的综合得分排序为:垂丝海棠<西府海棠<“沂蒙甜茶”<“绚丽”<“世标1号”<“红丽”<“凯尔斯”<“冬红”。以上结果表明,海棠叶片具有较好的开发利用价值和广阔的开发前景。
- 许申平袁秀云吉长献王默霏张燕蒋素华牛苏燕崔波
- 关键词：海棠叶片营养成分类黄酮总酚
- 萼脊兰MADS-box基因的克隆及表达载体构建被引量：6
- 2017年
- 为了研究"ABC"模型的B类PI基因,探究决定花瓣和雄蕊形成的基因特征。采用CTAB法提取萼脊兰花瓣总RNA,并通过RT-PCR法克隆萼脊兰PI基因的编码序列,该序列长度为633 bp,编码210个氨基酸,与小兰屿蝴蝶兰的氨基酸相似性最高。对PI所表达蛋白质的结构、亲水性和二级结构进行了分析,结果显示,该基因包含MADS-box和K-box保守结构域,属于MADS-box基因家族;该蛋白分子属于亲水性蛋白,包含56.19%α螺旋、13.81%的延伸链以及30%的不规则折叠,实时荧光定量PCR结果显示,PI基因主要在花器官中表达,且表达量高,说明PI基因的表达具有组织特异性。构建植物表达载体的结果显示,目的基因和带启动子的片段已插入到表达载体p CAMBIA1301中,表明成功构建植物表达载体1301-PI,为最终获得新奇花型的萼脊兰奠定基础。
- 蒋素华黄萍王默霏梁芳许申平崔波
- 关键词：克隆
- 蝴蝶兰一个C3型PEPC基因的克隆及其低温胁迫下的表达分析被引量：2
- 2020年
- 为研究蝴蝶兰对低温胁迫响应的分子调控机理,本研究采用RT-PCR及RACE的方法从蝴蝶兰叶片中克隆了一个C3型PEPC基因PhPEPC (登录号为:MK482383),该基因cDNA全长序列为3 448 bp,开放阅读框长度为2 898 bp,编码965个氨基酸;该蛋白包含一个PEPC酶结构域,具有2个PEPCase活性位点,86个磷酸化位点和7种motifs,为一酸性亲水性蛋白。系统进化分析显示,蝴蝶兰PhPEPC蛋白与兰科植物小兰屿蝴蝶兰、铁皮石斛、深圳拟兰等的PEPC蛋白亲缘关系最近。分析表明,PhPEPC基因在蝴蝶兰根中表达水平最高,在花器官中的表达水平次之,在叶和花梗中的表达水平最低;在13℃/8℃的昼/夜温度条件下,PhPEPC基因的表达水平先升高后降低,当恢复培养3 d时,该基因的表达水平又趋于升高。结果表明,蝴蝶兰PhPEPC基因参与了对低温胁迫的调控。本研究结果将有助于理解蝴蝶兰对低温胁迫的适应机制,并为蝴蝶兰新品种的遗传改良提供依据。
- 袁秀云许申平张燕梁芳王默霏蒋素华崔波
- 关键词：低温胁迫PEPC基因表达
- 一种提高黄瓜产量的植物生长调节剂组合物
- 本发明属于植物生长调节剂技术领域，具体涉及一种可以提高黄瓜产量的植物生长调节剂组合物。该组合物包括A剂、B剂和C剂，A剂为水剂，含有8.0~30.0mg/mL的2，4‑D和6.0~40.0mg/mL的4‑CPA；B剂为有...
- 蒋素华王彭邓祖丽颖许申平穆玉洁张晓菲李文玲翟爱勇李艳辉梁芳张燕马杰袁秀云王默霏崔波
- 文献传递
- 牵牛子离体胚轴植株再生的方法
- 牵牛子离体胚轴植株再生的方法由“建立无菌苗培养体系—胚轴诱导产生不定芽—继代增殖培养得到分化芽—培养生根苗—练苗移栽获得再生植株”5个环节组成，选用圆叶牵牛子外植体接种到特制的培养基上，在无菌的条件下进行培养，形成再生植...
- 马杰邓祖丽颖田云芳蒋素华王默霏崔波
- 蝴蝶兰S-腺苷甲硫氨酸合成酶基因的克隆及低温下的表达分析被引量：7
- 2015年
- 利用RT-PCR和RACE技术从蝴蝶兰品种‘满天红’中克隆获得SAMS基因的c DNA序列,Gen Bank登录号为KP966096。用生物信息学方法预测分析其序列,c DNA全长1 550 bp,含有1个1 194 bp的完整开放阅读框(ORF),编码397个氨基酸,其氨基酸序列与多种植物的SAMS蛋白有很高的相似性。系统进化树分析显示,蝴蝶兰SAMS与油棕的SAMS蛋白亲缘关系较近。采用GAPDH、ACTIN和EF1α这3个不同的内参基因作为标准对蝴蝶兰SAMS基因进行实时荧光定量分析,结果表明,在13℃/8℃的昼夜温度条件下,蝴蝶兰SAMS基因的转录表达在3、6、9和15 d时明显升高,恢复正常温度条件后,该基因的表达下降;在4℃低温条件下,SAMS基因的表达在处理0.5、1、2和4 h内明显升高,处理8 h时其表达开始下降,在处理12、24和48 h时,其表达水平没有明显的升高和下降。结果表明该基因参与了蝴蝶兰低温胁迫的分子调控。
- 袁秀云雷志华梁芳蒋素华许申平王默霏崔波
- 关键词：S-腺苷甲硫氨酸合成酶低温胁迫基因克隆实时荧光定量PCR
