王苗
- 作品数：8 被引量：18H指数：2
- 供职机构：西北农林科技大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家科技重大专项转基因生物新品种培育专项更多>>
- 相关领域：农业科学生物学经济管理更多>>
- 山羊INSIG1基因超表达对乳腺上皮细胞中脂质合成的影响被引量：8
- 2016年
- 本研究旨在通过构建西农萨能奶山羊胰岛素诱导基因1(INSIG1)的重组腺病毒(Adenovirus,Ad)超表达载体,研究该基因超表达后对乳腺上皮细胞中脂质合成的影响,从而为该基因在山羊乳腺脂质合成调控中的功能研究奠定基础。根据GenBank(登录号:JQ665439)中山羊INSIG1基因序列设计引物,PCR扩增得到其CDS区序列。将目的基因连接到穿梭载体pAdTrack-CMV后获得pAdTrack-CMV-INSIG1质粒,将该质粒PmeⅠ线性化后转入大肠杆菌BJ5183感受态细胞进行同源重组,获得pAdEasy-INSIG1重组腺病毒超表达载体。该重组质粒经PacⅠ线性化后转染293A细胞进行病毒的包装及扩繁,利用LaSRT法测定其滴度。将获得的重组腺病毒AdINSIG1感染山羊原代乳腺上皮细胞,利用实时荧光定量PCR检测INSIG1及脂质合成相关基因的mRNA表达情况,利用GPO-Trinder酶学反应检测细胞中甘油三酯的含量。结果表明,成功构建了奶山羊INSIG1基因重组腺病毒超表达载体,获得了具有较高滴度(2×108 U·mL-1)的超表达腺病毒Ad-INSIG1;Ad-INSIG1感染山羊原代乳腺上皮细胞48h后,与Ad-GFP组相比,INSIG1基因的mRNA表达量上调约500倍,固醇调节元件结合蛋白1(SREBP1)和SREBP裂解活化蛋白(SCAP)的mRNA表达量无明显变化,参与脂肪酸从头合成(ACCα、FASN)及去饱和(SCD1)基因的mRNA表达量均显著下降(P<0.05);参与甘油三酯合成的3个关键基因中,GPAM及DGAT2的mRNA表达量显著下降(P<0.05),AGPAT6的表达无显著变化;同时,催化甘油三酯分解(ATGL)的基因mRNA表达量也显著下降(P<0.05);细胞内甘油三酯含量无显著变化。综上所述,在山羊原代乳腺上皮细胞中,INSIG1能够抑制脂质合成相关基因的表达,对山羊乳腺脂质合成具有调控作用。
- 王苗罗军许会芬朱江江赫秋亚姚大为史怀平
- 关键词：山羊乳腺上皮细胞超表达
- 脱落酸对遮荫胁迫下高羊茅生理反应的调控机制被引量：1
- 2012年
- 以光敏感度不同的两个高羊茅品种(Arid3和Houndog5)为实验材料,研究外源脱落酸(ABA)在遮荫胁迫下对其生理生化的影响。研究结果表明:在遮荫条件下(LL),Arid3和Houndog5的膜透性与对照相比较,差异达到显著水平(P<0.05);而在遮荫与脱落酸处理(LL+ABA)后的Arid3和Houndog5膜透性与对照相比较,差异也达到显著水平(P<0.05),但Arid3增幅大于Houndog5。在LL+ABA处理条件下的Arid3的叶绿素a的含量比对照减少了40.94%,叶绿素b含量比对照减少了35.6%,而Houndog5的叶绿素a的含量比对照减少了38.21%。然而,在LL+ABA处理条件下的Arid3和Houndog5的叶绿素含量均有所减少,且与对照差异没有达到显著水平(P>0.05)。同时,Arid3和Houndog5在LL+ABA处理下,脯氨酸和可溶性蛋白含量均显著增加(P<0.05),其中脯氨酸含量变化为:LL+ABA>LL>CK,Arid3的可溶性蛋白含量变化为:LL>LL+ABA>CK;Houndog5则表现为:LL+ABA>LL>CK。因此,Arid3和Houndog5都具有较好的耐荫性,且Houndog5耐荫性优于Arid3。同时,脱落酸可以提高高羊茅对弱光逆境的抗逆性。
- 刘铁芫贾磊司培王苗付娟娟许岳飞
- 关键词：高羊茅遮荫脱落酸生理反应
- 奶山羊INSIG基因对乳腺上皮细胞中脂代谢的影响研究
- 胰岛素诱导基因(Insulin-induced genes,INSIGs)是调控脂代谢的重要因子,为内质网膜蛋白,包括INSIG1和INSIG2两个亚型。其两个亚型在不同组织中的生物学功能及表达调控机理存在一定的差异,尚...
- 王苗
- 关键词：山羊乳腺上皮细胞超表达脂代谢
- 文献传递
- 宁夏农民财产性收入增长研究
- 创造条件让农民有机会获得更多的财产性收入，是十八届三中全会对增加农民收入提出的新目标，目前，宁夏农民财产性收入占总收入的比重很小，主要是由于宁夏的农村土地制度改革、农村产权制度改革推进较晚，加之农村资源禀赋的制约和农民自...
- 王苗
- 关键词：农民群体财产性收入农村土地制度农业经营
- 接种根瘤菌对紫花苜蓿抗寒性的影响
- 为了探究接种根瘤菌对紫花苜蓿植株抗寒性的影响,本研究以紫花苜蓿(Medicago sativa CV.Ladak+)为试验材料,分别进行接种根瘤菌(NA)、不接种根瘤菌(NN)和低温处理,并测定如下生理指标:叶片相对含水...
- 王苗
- 关键词：紫花苜蓿接种根瘤菌抗寒生理指标
- 文献传递
- 山羊INSIG1基因超表达对乳腺上皮细胞中脂质合成的影响
- (目的)本研究旨在通过构建西农萨能奶山羊胰岛素诱导基因1(INSIG1)的重组腺病毒(Adenovirus,Ad)超表达载体,研究该基因超表达后对乳腺上皮细胞中脂质合成的影响,为该基因在山羊乳腺脂质合成调控中的功能研究奠...
- 王苗许会芬罗军
- 关键词：山羊乳腺上皮细胞超表达
- 文献传递
