王月
- 作品数：8 被引量：11H指数：2
- 供职机构：武汉生物制品研究所有限责任公司更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学更多>>
- 现代狂犬病疫苗生产用细胞和毒种：现状和前景被引量：5
- 2012年
- 对全球狂犬病预防控制的一个主要挑战是不能充分供应廉价优质的狂犬病疫苗。基于神经组织生产狂犬病疫苗的技术早已过时，现代细胞培养技术提供了适当的病毒培养基质，可以获得高滴度病毒和大规模生产高质量的现代狂犬病疫苗。目前人用疫苗仅使用灭活疫苗，用高度适应细胞的稳定的减毒狂犬病病毒生产的疫苗将是未来的理想疫苗。
- 王月黄思佳严家新
- 关键词：狂犬病狂犬病疫苗VERO细胞
- 我国近期分离的6株狂犬病病毒的糖蛋白基因序列分析
- 2013年
- 目的分析我国近期分离的6株代表性狂犬病病毒（rabiesvirus，RV）的糖（G）蛋白基因序列，了解RV街毒株与疫苗株在核苷酸和氨基酸序列水平的差异。方法对6个RV街毒株G基因进行逆转录和PCR扩增，经纯化、克隆、测序后获得6条G基因全长序列，采用生物信息学软件对G基因序列进行分析。结果6个街毒株的G蛋白在核苷酸水平的同源性为97．7％－100％，在氨基酸水平的同源性为97．9％－100％；与CTN－181疫苗株的核苷酸序列同源性最高，为86．7％－87．2％，氨基酸序列同源性为92．7％～93．1％。结论6个RV街毒株的G蛋白在核苷酸及氨基酸水平上均有变异，但与CTN．181疫苗株关系最近，表明CTN－181疫苗株可能为我国境内流行的狂犬病提供良好的预防作用。
- 黄思佳解庭波吴杰王月季雅琦严家新徐葛林
- 关键词：狂犬病病毒糖蛋白类基因型DNA
- 一例人狂犬病病例的病毒分离和系统鉴定
- 狂犬病是由狂犬病病毒(rabies virus,RABV)引起的人兽共患性传染病,病死率几乎为100％。我国属狂犬病高发国家,家犬是RABV的主要宿主和传染源[1]。目前国内分离的人源狂犬病病毒街毒株数量较少[2-3],...
- 王月
- 狂犬病病毒CTN株反向遗传系统的改造及拯救被引量：6
- 2015年
- 目的对狂犬病病毒CTN株反向遗传系统进行改造,并拯救改造后的狂犬病病毒。方法应用基因定点突变技术分别对狂犬病病毒CTN株G蛋白的第194位和333位氨基酸进行定点突变,将突变后的G蛋白基因替换原有反向遗传系统中的G蛋白基因,同时对突变后的G蛋白基因进行拷贝,分明构建含有1、2和3个改造后G蛋白基因全长序列的感染性克隆,并将其分别与辅助质粒共转染BSR细胞,采用直接免疫荧光实验(DFA)和RT-PCR法鉴定重组病毒。结果 G蛋白的第194位天冬酰胺突变为丝氨酸,第333位谷氨酰胺突变为谷氨酸,获得含有1、2和3个突变后G蛋白基因的狂犬病病毒CTN株反向遗传系统,并拯救出重组狂犬病病毒。结论成功对狂犬病病毒CTN株反向遗传系统进行了改造,并拯救出了重组病毒,为研制安全、稳定、高效的新型狂犬病病毒疫苗奠定了基础。
- 解庭波明平刚唐芳黄思佳沈智俊王月徐葛林严家新
- 关键词：狂犬病病毒反向遗传学定点突变G基因
- 一例人狂犬病病例的病毒分离和系统鉴定
- 狂犬病是由狂犬病病毒(rabies virus, RABV)引起的人兽共患性传染病,病死率几乎为100%。我国属狂犬病高发国家,家犬是RABV的主要宿主和传染源[1]。目前国内分离的人源狂犬病病毒街毒株数量较少[2-3]...
- 王月
- 文献传递
- 一例人狂犬病病例的病毒分离及鉴定
- 2014年
- 目的对2013年武汉市新发生的一例疑似狂犬病死亡病例的脑组织进行病毒分离及鉴定。方法采用直接荧光抗体法(DFA)和ELISA法检测狂犬病病毒(rabies virus,RABV)抗原;提取病毒RNA,设计12对引物,分段扩增全基因组,克隆后测序,应用DNAStar软件包中的MegAlign模块对基因所编码的氨基酸进行对位分析;Clustal X 1.83软件和GENEDOC软件用于序列比对;MEGA 4.1软件以Kimura two-parameter模型邻位相连法(Neighbor-Joining,NJ)构建系统进化树(Bootstrap-l000),并与国内外疫苗株及近期湖北省及周边地区分离的代表性街毒株进行同源性分析。结果分离的街毒株13WH10的RABV抗原呈阳性;13WH10街毒株基因组全长11 924 bp,属基因Ⅰ型狂犬病病毒;13WH10与湖北省及周边街毒株处于同一亚群,与CTN-1疫苗株及东南亚地区的街毒株同源性较高,高于欧美国家疫苗株。结论成功对武汉市2013年新发生的一例疑似狂犬病死亡病例的脑组织进行了病毒分离及鉴定;CTN-1与RABV国内分离株同源性较高,系统进化关系较近,提示采用CTN-1疫苗株生产的狂犬病疫苗可有效预防中国狂犬病的流行。
- 王月任亮吴杰周亦武郑新雄解庭波黄思佳刘良王荣帅屈国强明平刚翟珑山王泽鋆霍玉奇季雅琦徐葛林严家新
- 关键词：狂犬病病毒同源性分析
- 安徽省2011年新分离的19株狂犬病病毒的N基因序列分析
- 2013年
- 目的对安徽省2011年新分离的19株狂犬病病毒(Rabies virus,RABV)的N基因进行序列分析,并比较其与代表性RABV街毒株及疫苗株之间的差异。方法采集安徽省淮北地区狗肉市场的犬脑组织121份,伤人犬脑组织10份,采用直接免疫荧光法和双抗体夹心ELISA法检测RABV抗原,并通过颅内接种昆明乳鼠进一步鉴定毒株;RT-PCR扩增分离病毒的N基因,与pMD18-T载体连接测序后,与代表性RABV街毒株及疫苗株的N基因序列进行比对,并进行遗传学分析。结果在送检的131份犬脑组织样品中检出RABV阳性19株,其中伤人犬脑组织阳性率为90%,狗肉市场犬脑组织阳性率为8.26%。19株RABV N基因核苷酸序列同源性为97.5%～99.7%,推导的氨基酸序列同源性为98.7%～100%;与代表性人用和兽用RABV疫苗株相比,N基因核苷酸序列同源性为85.4%～89.9%,推导的氨基酸序列同源性为94.9%～99.1%,核苷酸序列的变异主要为同义突变。分离的19株RABV在系统进化树上高度聚集,与以往国内分离的代表性街毒株系统进化关系较近,在同一个分支(HN10除外)与我国疫苗株CTN-181株亲缘关系最近,处于同一个亚群。结论从安徽省伤人犬和狗肉市场的犬脑组织中成功分离并鉴定了19株RABV,这些病毒株均属于基因I型RABV,且具有地域性特征。本研究对特定区域RABV的流行及监测具有一定的意义。
- 吴杰解庭波黄思佳沈智俊王月朱理业曹明华刘红徐葛林严家新
- 关键词：狂犬病病毒N基因
- 一株人源狂犬病毒的分离鉴定及N、G基因序列分析
- 目的：对武汉市东西湖区一株人感染狂犬病毒(RABV)的N、G基因进行遗传学分析,比较其与近年来湖北省及周边地区分离的代表性街毒株、亚洲国家(或由其输出)人源街毒株,及人用和兽用狂犬病疫苗病毒株之间的差异.方法：以直接...
- 王月严家新任亮吴杰郑新雄解庭波黄思佳翟珑山王泽鋆季雅琦
- 关键词：狂犬病毒遗传学分析
- 文献传递
