王思谦
- 作品数：7 被引量：26H指数：3
- 供职机构：河南大学医学院神经生物学研究所更多>>
- 发文基金：省部共建河南大学科研项目环境保护公益性行业科研专项国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 慢性酒精摄入所致的肝细胞上皮-间充质转化参与小鼠肝纤维化形成被引量：2
- 2014年
- 目的:探讨慢性酒精摄入对肝组织病理学改变的影响及上皮-间充质转化对肝纤维化形成的作用。方法:将30只雄性C57BL/6小鼠随机分为3组:对照组灌胃给予与酒精组等体积的蒸馏水,低剂量和高剂量酒精组分别灌胃给予2.0 g·kg-1·d-1和4.0 g·kg-1·d-1酒精5个月。肝组织病理学改变和纤维化分别用HE和Masson三染色观察;荧光标记的TUNEL法检测肝组织细胞凋亡;自动生化分析仪检测血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)和天冬氨酸氨基转移酶(AST)的活性;肝组织成纤维细胞特异性蛋白1(FSP-1)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和E-钙黏素表达采用免疫荧光观察;E-钙黏素、α-SMA、FSP-1、转化生长因子β1(TGF-β1)和缺氧诱导因子1α(HIF-1α)蛋白表达水平用Western blotting检测。结果:与对照组相比,小鼠酒精灌胃5个月后,血清ALT和AST活性升高;肝组织细胞凋亡增加;低剂量酒精组呈现肝脂肪变性和轻度的肝纤维化,高剂量酒精组呈现出严重的肝纤维化;肝组织丙二醛(MDA)含量升高,超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)下降;肝细胞E-钙黏素表达下降,α-SMA表达增加;低剂量酒精组肝细胞内白蛋白和FSP-1共定位,而高剂量酒精组肝细胞内只表达FSP-1;Western blotting检测结果显示,E-钙黏素表达下降,而α-SMA、FSP-1、TGF-β1和HIF-1α蛋白表达水平升高,但是HIF-1α蛋白表达水平在高、低酒精组之间无差别。结论:慢性酒精摄入可诱导肝纤维化,部分成纤维细胞来源于肝细胞上皮-间充质转化,其机制可能与肝细胞氧化状态、TGF-β1及HIF-1α升高有关。
- 孙玉生林波王思谦刘悦张优敬郑乃芮皇甫超申
- 关键词：酒精性肝纤维化转化生长因子Β1缺氧诱导因子1Α
- 亚硝酸钠对小鼠慢性酒精性肝损伤的细胞保护作用被引量：7
- 2012年
- 过去人们普遍认为亚硝酸盐是一种致癌剂,但这种观点一直未得到实验证实[1]。亚硝酸盐对人体的另一种危害是导致高铁血红蛋白血症,但这需要一次摄入大量亚硝酸盐。最近人们对亚硝酸盐的生物学作用又有了新的认识,发现亚硝酸盐是一种一氧化氮供体,可特异性的在缺氧酸性环境被还原为一氧化氮[2]。
- 王思谦路晓霞张挚徐红瑞刘彬皇甫超申
- 关键词：小鼠酒精性肝损伤肝脂肪变性细胞保护
- 亚硝酸盐对慢性酒精性肝纤维化的干预作用
- 酒精对肝脏的损害主要表现为诱导肝脏产生大量活性氧,导致过氧化应激,致使肝细胞持续损伤,以至于不能够利用肝细胞再生来完全修复,与此同时,肝内Kupffer细胞和星形细胞大量增生并活化,胶原纤维大量增生,分割正常肝小叶,最终...
- 王思谦
- 关键词：亚硝酸盐干预作用动物实验
- 文献传递
- 亚硝酸钠对H22荷瘤小鼠移植瘤上皮-间质转化的促进作用被引量：6
- 2012年
- 研究亚硝酸钠诱导活性氧对H22荷瘤小鼠肝癌细胞上皮间质转化和缺氧诱导因子1α(HIF-1α)的影响,并探讨HIF-1α在这一过程中的作用。制备H22肝癌细胞荷瘤小鼠模型,亚硝酸钠处理组每天分别灌胃给予10、20和30 mg.kg 1亚硝酸钠,对照组给予等体积生理盐水,连续给药21天。与对照组相比,亚硝酸钠处理组的移植瘤体积和重量没有明显变化,但是肿瘤组织内超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)活性下降,亚硝酸盐和丙二醛(MDA)含量升高;癌细胞浸润周围的肌肉和筋膜;免疫组化和Western blotting结果显示,细胞波形蛋白和HIF-1α表达增强,E-钙粘素表达下降;肿瘤细胞呈现出上皮间质转化(EMT)。结果提示,亚硝酸钠在体内能够促进鼠肝癌细胞EMT发生,其机制与亚硝酸盐诱导活性氧(ROS)促进HIF-1α表达增加有关。
- 徐红瑞林波王思谦张挚路晓霞刘悦皇甫超申
- 关键词：H22细胞移植瘤缺氧诱导因子1Α
- 长期酒精暴露对SMS2^-/-小鼠肝脑的损伤及机制被引量：7
- 2014年
- 目的观察长期酒精暴露引起的肝脑损伤与氧化应激的关系,探讨酒精引起多系统损伤的机制,神经酰胺在酒精暴露诱导海马应激损伤中的调节作用。方法建立C57BL6J野生小鼠和神经鞘磷脂合成酶2基因敲除(SMS-/-2)小鼠酒精暴露模型,利用HE和Masson染色观察肝脏细胞和结构变化,透射电子显微镜观察肝脏超微结构变化,免疫荧光染色法观察对照组与模型组小鼠海马CA1区氧化应激引起的阳性细胞数量变化,免疫印迹技术检测海马组织c-Fos、核因子-κB(NF-κB)激活蛋白的相对表达量。结果酒精暴露导致野生型和SMS-/-2小鼠肝细胞脂肪变性和肝纤维化,并有Mallory小体形成和炎症细胞浸润。免疫组织化学染色显示,酒精暴露后野生型和SMS-/-2小鼠海马c-Fos、NF-κB阳性细胞表达增多(P<0.01)且具有剂量依赖性;与相同处理条件的野生型小鼠相比,SMS-/-2小鼠海马c-Fos、NF-κB阳性细胞表达较多(P<0.05)。免疫印迹技术检测各组间小鼠海马组织cFos、NF-κB蛋白相对表达量与上述结果一致。结论长期酒精暴露引起肝脏和神经系统损伤的病理基础是氧化应激和炎症反应;神经酰胺参与酒精暴露诱导与促进肝脑细胞损伤的过程;酒精、胰岛素抵抗和神经酰胺相互作用造成肝脑损伤。
- 赵静雅崔占军贺维亚孙玉华王思谦邓锦波鲁广秀
- 关键词：神经酰胺免疫印迹法小鼠
- 亚硝酸钠预处理对急性酒精损伤的小鼠肝脏的保护作用被引量：1
- 2012年
- 本文旨在研究亚硝酸钠预处理对急性酒精损伤小鼠肝脏的保护作用。将40只C57bL/6 小鼠随机分为4组:急性酒精肝损伤组腹腔注射乙醇(4.5 g/kg);亚硝酸钠预处理组腹腔注射亚硝酸钠(16 mg/kg) 12 h后,再给予乙醇(4.5 g/kg);对照组仅给予生理盐水;单纯亚硝酸钠组仅给予亚硝酸钠(16 mg/kg)。处理结束时检测肝脏指数,比色法检测肝组织超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、过氧化氢酶(CAT)活性,丙二醛(MDA)含量及血清丙氨酸转氨酶(ALT)和天门冬氨酸转氨酶(AST)活性,HE和荧光标记TUNEL染色观察肝组织病理学改变,免疫组织化学染色法和Western blot检测缺氧诱导因子-1α (HIF-1α)蛋白表达。结果显示,与急性酒精肝损伤组相比,亚硝酸钠预处理组肝脏指数、血清ALT和AST活性显著下降,急性酒精损伤引起的小鼠肝组织病理学变化得到改善,坏死程度明显减轻,肝组织SOD、GSH-Px、CAT活性增加,MDA含量和细胞凋亡指数降低,肝细胞内HIF-1α蛋白表达水平显著升高。以上结果提示,亚硝酸钠预处理可减轻急性酒精肝损伤,其机制涉及氧化应激的抑制和HIF-1α蛋白水平的上调。
- 路晓霞王思谦张挚徐红瑞刘彬皇甫超申
- 关键词：亚硝酸钠预处理酒精性肝损伤缺氧诱导因子-1Α
- 煮沸裂解法快速提取Tg2576小鼠DNA被引量：3
- 2011年
- 目的建立Tg2576小鼠DNA快速简便高效的提取方法。方法借鉴煮沸裂解法制备质粒DNA方法,改进后用于提取Tg2576小鼠DNA,比较酚/氯仿法和煮沸裂解法两种提取DNA的方法。结果在小鼠鉴定过程中,使用酚/氯仿法和煮沸裂解法提取DNA均能取得满意的结果;但前者操作繁琐,至少需2d完成,而后者操作步骤大大简化,可在1d内完成,且提取所用试剂毒性小、成本低。结论煮沸裂解法提取DNA灵敏度高、耗时短、操作简便,值得在Tg2576小鼠基因型鉴定中使用,也可以在其他转基因动物鉴定实验中推广。
- 于东明王思谦范媛媛邓锦波
- 关键词：阿尔茨海默病DNA提取
