汤健 作品数:9 被引量:18 H指数:4 供职机构: 中国科学院微生物研究所 更多>> 发文基金: 国家高技术研究发展计划 中国科学院“百人计划” 中国科学院留学经费择优支持回国工作基金 更多>> 相关领域: 生物学 医药卫生 更多>>
抗肿瘤血管基因工程抗体的研究 该文利用大肠杆菌表达VEGF<,165>,经纯化后作为抗原,从人源噬菌体抗体库中筛选出可与VEGF<,165>特异结合的单链抗体,命名为hv37.基因序列分析表明,抗体hv37是由重链及轻链可变区786个核苷酸组成,蛋白... 汤健关键词:血管内皮细胞 胃肠道肿瘤 肿瘤免疫治疗 肿瘤生长 抗IV型胶原酶单链抗体在毕赤酵母中分泌表达 被引量:4 2001年 利用毕赤酵母系统表达抗 IV型胶原酶人单链抗体。首先把目的基因克隆到毕赤酵母表达载体上 ,电击转化受体菌。在甲醇诱导下表达单链抗体。 SDS- PAGE和免疫印迹显示毕赤酵母分泌表达人单链抗体 ,表达量约 2 0 mg/ L酵母培养物。该表达系统与大肠杆菌相比 ,简化了表达产物的分离纯化程序。 阎锡蕴 汤健 刁爱坡关键词:毕赤酵母 分泌表达 IV型胶原酶特异性人源基因工程抗体 一种Ⅳ型胶原酶特异性人源基因工程抗体。主要是构建了Ⅳ型胶原酶的抗体基因,它是由705个核苷酸组成,由该基因所表达的Ⅳ型胶原酶特异性人源抗体是由235个氨基酸组成。该抗体能够与Ⅳ型胶原酶特异结合,它能够广泛用于与抑制Ⅳ型胶... 阎锡蕴 汤健 田波文献传递 IV型胶原酶特异性人源基因工程抗体 一种Ⅳ型胶原酶特异性人源基因工程抗体。主要是构建了Ⅳ型胶原酶的抗体基因,它是由705个核苷酸组成,由该基因所表达的Ⅳ型胶原酶特异性人源抗体是由235个氨基酸组成。该抗体能够与Ⅳ型胶原酶特异结合,它能够广泛用于与抑制Ⅳ型胶... 阎锡蕴 汤健 田波文献传递 血管内皮细胞生长因子复性条件研究 1999年 利用大肠杆菌 BL2 1 (DE3)表达血管内皮细胞生长因子 (VEGF16 5)表达蛋白以包含体形式存在。为了获得有生物活性的蛋白质 ,我们对影响复性的参数 :氧化型、还原型谷胱甘肽比例 ,复性液的 p H值 ,复性时间 ,精氨酸浓度 ,血管内皮细胞生长因子起始浓度进行了较为系统的研究 ,初步获得了具有一定生物活性的 VEGF16 5二聚体蛋白。 钟彦伟 汤健 阎锡蕴 汪力亚 姜素椿关键词:血管内皮细胞生长因子 包含体 Ⅳ型胶原酶人基因工程抗体的研制 被引量:1 1998年 肿瘤组织内Ⅳ型胶原酶表达和活性升高与肿瘤转移密切相关 .抑制Ⅳ型胶原酶活性的物质能够有效地抑制或降低肿瘤的转移 .因此Ⅳ型胶原酶已成为恶性肿瘤辅助诊断和控制癌转移的标志分子之一 .利用噬菌体抗体展示技术 ,在人抗体库研究的基础上 ,成功地研制出一种Ⅳ型胶原酶特异人源单链抗体hCo4.该抗体主要是由抗体轻链可变区和重链可变区组成 ,分子量约为 2 7ku .ELISA和免疫印迹均证明hCo4能够与Ⅳ型胶原酶特异结合 ,是目前所报道的Ⅳ型胶原酶特异抗体中分子量最小的人基因工程抗体 .该抗体的亲和力与从分泌抗Ⅳ型胶原酶单抗的杂交瘤细胞制备的鼠源单链抗体亲和力相同 .它有可能成为一种研究Ⅳ型胶原酶与肿瘤转移相互关系的工具以及用于肿瘤免疫诊断和治疗 . 汤健 阎锡蕴 刘元义 田华松 田波关键词:基因工程 抗体 重组血管内皮细胞生长因子包涵体复性条件研究 被引量:4 1999年 利用大肠杆菌BL21(DE3) 表达血管内皮细胞生长因子165( VEGF165) ,表达蛋白以包涵体形式存在。为了获得大量有生物活性的蛋白质,我们对影响复性的参数:氧化型、还原型谷胱甘肽比例,复性液的pH 值,复性时间,精氨酸浓度以及血管内皮细胞生长因子( VEGF165) 包涵体的起始浓度进行了较为系统的研究,初步获得了具有一定生物活性的VEGF165 二聚体蛋白。 钟彦伟 阎锡蕴 汤健 汪力亚 姜素椿关键词:血管内皮细胞 包涵体 血管内皮生长因子人单链抗体──基因克隆、高效表达、亲和力成熟及生物活性鉴定 被引量:6 2000年 利用抗体噬菌体展示技术,克隆了血管内皮生长因子人基因工程单链抗体, 抗体表达量达菌体总蛋白的45%.用层析柱复性技术同步完成抗体的纯化和复性.生 物活性实验表明,该抗体不仅特异结合人VEGF_165而且竞争抑制VEGF_165与其受体的 结合.为了提高单链抗体的亲和力,采用错配PCR法,随机突变抗体重链可变区基因, 建立次级抗体突变库,并从中筛选出高亲和力突变株.研究了抗体突变株蛋白质三维 结构特点及其与亲和力的关系,这些结果不仅为肿瘤血管靶向治疗奠定了基础,而且 为抗体的高效表达及其亲和力体外成熟提供了参考模型. 阎锡蕴 汤健 吴小平 王凤采 李建生 杨东玲关键词:血管内皮生长因子 肿瘤 人血管内皮细胞生长因子在毕赤酵母中的高效表达 被引量:4 2000年 The gene of VEGF 165 was subcloned into the P.pastoris secretive expression vector pHIL S1 and the recombinant expression plasmid pHIL S1 VEGF 165 was constructed.After transformation into yeast GS115,the positive transformants were obtained through phenotype selection and DNA Dot blotting.After induction by methanol,soluble dimer VEGF 165 were expressed and secreted into the culture supernatant with its expression occupying 47% of the total protein in the supernatant.Dot blot analysis showed that the expressed human VEGF 165 could bind to its receptors flt 1 and KDR. 阎锡蕴 汤健 黄宇鸿关键词:VEGF 毕赤酵母 酵母表达系统 免疫原性 基因表达