吴小平
- 作品数：9 被引量：28H指数：4
- 供职机构：中国科学院微生物研究所更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划中国科学院“百人计划”更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 抗肿瘤血管三结构域单链抗体V_H/L的构建与表达被引量：5
- 2001年
- 以本室研制的一株抗肿瘤血管单克隆抗体AA98为基础 ,采用PCR扩增抗体AA98基因的重链可变区(VH)和轻链 (L) ,以重链恒定区 1(CH1) 5′端 12个氨基酸的序列作为连接肽 ,并将连接肽中的Lys突变为Ser,构建VH 连接肽 L三结构域单链抗体。重组VH/L单链抗体在大肠杆菌中得到了高效表达 ,其表达量占菌体总蛋白质的 2 0 %。表达的蛋白质在菌内形成包含体 ,经凝胶过滤法复性 ,获得了有抗原结合活性的VH/L。该三结构域单链抗体的成功构建和复性 ,为重组抗体片段的研制提供了借鉴。
- 吴小平杨东玲张志强阎锡蕴
- 关键词：复性
- 高效广谱抑制肿瘤生长和转移的新型抗体
- 本发明是利用生物技术研制出的一类抑制肿瘤生长和转移的新型抗体。本发明包括：鼠单克隆抗体AA98，人-鼠嵌合抗体ChiAA98，和抗体AA98的Fab和Fv功能片段。这类抗体的特点在于特异识别肿瘤新生血管，具有诱发ADCC...
- 阎锡蕴袁玖李力吴小平
- 文献传递
- 人单链抗体亲和力成熟研究被引量：9
- 2001年
- 目的 探索基因工程抗体亲和力体外成熟新技术 ,获得抗血管内皮生长因子高亲和力的抗体 ,使之成为肿瘤血管靶向治疗的载体。方法 采用错配PCR和单链重叠延伸法 ,随机突变抗体重链可变区 ,建立次级噬菌体单链抗体突变库 ,并从中筛选出高亲和力单链抗体突变株。结果 抗体突变株不仅保留了母体抗体的特异性 ,而且亲和力明显提高。根据基因序列分析 ,高亲和力突变株中有 4个氨基酸发生了改变 ,分别是Trp38→Cys38,Gln45 →Arg45 ,Lys1 0 7→Arg1 0 7,Arg1 0 9→Leu1 0 9。抗体立体结构模拟显示其中 3个氨基酸突变位于抗原结合部位。结论 实验结果为抗血管内皮生长因子人源单链抗体的应用奠定了基础 ,同时为抗体结构与功能研究以及抗体亲和力体外成熟提供了参考模型。
- 吴小平阎锡蕴杨东玲曲红
- 关键词：血管内皮生长因子噬菌体展示技术
- 新型抗肿瘤血管生成基因工程抗体的研究
- 该文由新型肿瘤血管牧特异基因工程抗体的研究和抗血管由波生长因子单链抗体的体外亲和力成熟两部分组成.
- 吴小平
- 关键词：基因克隆肿瘤血管VEGF
- 文献传递
- 高效广谱抑制肿瘤生长和转移的新型抗体
- 本发明是利用生物技术研制出的一类抑制肿瘤生长和转移的新型抗体。本发明包括:鼠单克隆抗体AA98,人－鼠嵌合抗体ChiAA98,和抗体AA98的Fab和Fv功能片段。这类抗体的特点在于特异识别肿瘤新生血管,具有诱发ADCC...
- 阎锡蕴袁玖李力吴小平
- 文献传递
- 一种新型肿瘤血管抗体Fab的基因克隆与表达被引量：5
- 2000年
- 鼠单克隆抗体AA98是我室研制的一株新型抗肿瘤血管抗体 ,体内实验证明它可以抑制血管生成 ,抑制肿瘤生长。从分泌抗体AA98的杂交瘤细胞中提取总RNA ,采用逆转录 PCR(RT PCR)分别扩增重链Fd及轻链κ,并进行序列测定。将Fd和κ链依次与噬菌粒 pComb3H连接 ,构建pComb3H AA98Fab表达载体。在大肠杆菌中表达了AA98Fab。免疫印迹表明该Fab片段识别分子量为 10 0kD的蛋白 ,具有原抗体AA98的抗原特异性。AA98Fab是研究抗体AA98作用机理的工具 ,也为制备重组免疫毒素 。
- 吴小平张志强杨东玲阎锡蕴
- 关键词：肿瘤血管基因克隆
- 血管内皮生长因子人单链抗体──基因克隆、高效表达、亲和力成熟及生物活性鉴定被引量：6
- 2000年
- 利用抗体噬菌体展示技术，克隆了血管内皮生长因子人基因工程单链抗体， 抗体表达量达菌体总蛋白的４５％．用层析柱复性技术同步完成抗体的纯化和复性．生 物活性实验表明，该抗体不仅特异结合人ＶＥＧＦ_１６５而且竞争抑制ＶＥＧＦ_１６５与其受体的 结合．为了提高单链抗体的亲和力，采用错配ＰＣＲ法，随机突变抗体重链可变区基因， 建立次级抗体突变库，并从中筛选出高亲和力突变株．研究了抗体突变株蛋白质三维 结构特点及其与亲和力的关系，这些结果不仅为肿瘤血管靶向治疗奠定了基础，而且 为抗体的高效表达及其亲和力体外成熟提供了参考模型．
- 阎锡蕴汤健吴小平王凤采李建生杨东玲
- 关键词：血管内皮生长因子肿瘤
- 噬菌体抗体库技术制备高亲和力人抗体被引量：3
- 2002年
- 吴小平阎锡蕴
- 关键词：噬菌体抗体库技术
- 重组乙肝病毒免疫球蛋白
- 本发明是一种高技术生物工程产品,包括三种不同结构的乙肝高效免疫球蛋白(乙肝抗体),既抗乙肝病毒单链抗体、抗体Fab和全分子抗体。其主要特征在于:(1)这些抗体能够特异结合乙肝表面抗原,可通过中和乙肝病毒而起到预防和辅助治...
- 阎锡蕴杨东玲吴小平
- 文献传递
