林学科
- 作品数:5 被引量:11H指数:2
- 供职机构:华中科技大学同济医学院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- 制作胚胎干细胞饲养层细胞条件的优化被引量:2
- 2010年
- 背景:研究表明小鼠胚胎成纤维细胞的制作受多种因素的影响。目前对这些因素的研究均建立于半经验的基础上,缺乏客观定量的数据支持。目的:对小鼠胚胎成纤维细胞制作胚胎干细胞饲养层细胞条件进行优化。方法:用两种不同方法从孕13.5d昆明小鼠胚胎中分离胚胎成纤维细胞,采用锥虫蓝染色计数,比较两种分离方法在细胞活性和数量方面的差异。对分离得到的胚胎成纤维细胞用0.05%胰酶在室温下消化不同时间,分析胰酶消化时间解离贴壁细胞能力和其对细胞活性影响;采用梯度浓度国产丝裂霉素灭活饲养层细胞2h和2.5h并制作细胞生长曲线,探索丝裂霉素最佳浓度和处理时间;通过不同冻存方法比较复苏后胚胎成纤维细胞活性,筛选出适合小鼠胚胎成纤维细胞最佳冻存方法。结果与结论:胚胎成纤维细胞对胰酶极其敏感,短时间多次消化法方法显著提高细胞活性和数量;室温下4~6min胰酶消化时间有利于保存细胞活性;10mg/L2.5h和20mg/L2h丝裂霉素灭活适合制作饲养层细胞;程序性降温使细胞更能适应温度变化,显著提高解冻后细胞活性和数量。
- 张万里李伟林学科李航翟荣林王国斌陶凯雄
- 关键词:小鼠胚胎成纤维细胞胚胎干细胞饲养层细胞丝裂霉素
- 小鼠EDNRB基因启动子生物信息学分析被引量:5
- 2011年
- EDNRB/EDN3/ECE-1信号传导通路在胚胎发育期神经嵴细胞分化、迁移、发育为神经节细胞的过程中起到关键作用。采用进化足迹法,利用生物信息学在线软件分析先天性巨结肠相关EDNRB基因启动子序列,结果显示:小鼠EDNRB基因定位于14号染色体,编码442个氨基酸,分子量为:49430Da,转录起始点300bp左右可能为启动子区域,启动子区域包含长度为1473bp的CpG岛,存在两段保守序列,人类和小鼠保守区域内含有33个共同的转录因子结合位点。
- 张万里李伟吴川清林学科李航王国斌陶凯雄
- 关键词:EDNRB启动子生物信息学转录因子
- 高剂量叶酸补充孕小鼠与子代结肠EDNRB表达关系在先天性巨结肠症发病机制作用初步探索
- 第一部分 高剂量叶酸补充孕小鼠模型的建立及评价
目的:首次在国内尝试用RHAA配方建立孕小鼠高剂量叶酸(high-dose folic acid,HFA)补充模型,并对该模型进行评价,以求初步阐明环境因素(高叶酸饮...
- 林学科
- 关键词:胚胎发育信号传导通路
- 文献传递
- 妊娠期间高叶酸饮食诱导子代小鼠先天性巨结肠模型的研究被引量:1
- 2011年
- 目的观察母体妊娠期间高叶酸(FA)饮食在子代小鼠先天性巨结肠(HD)发生中的作用。方法分别用0(低叶酸组)、2(正常对照组),40、160、320mgFA/kg(高叶酸组)RHAA配方饲料补充孕小鼠,分别观察上述5组不同叶酸饮食环境下刚出生的仔鼠的结肠标本是否具有HD表型,并采取酶联免疫吸附试验(ELISA)检测孕鼠及仔鼠的血清叶酸浓度。结果随着饲料叶酸含量的升高,孕鼠及仔鼠血清叶酸浓度也呈相应逐渐升高,直至160mgFA/kg饲料饮食,母鼠及仔鼠体内叶酸水平达到最高值;低叶酸组与正常对照组仔鼠无巨结肠发生;在高叶酸组中:40、160、320mg3组巨结肠发生率分别为2.1%(1/42)、6.1%(2/33)、2.8%(1/36),并与仔鼠血清叶酸浓度密切相关。结论母体妊娠期间高叶酸饮食可以诱导仔鼠HD的发生,高叶酸饮食因素在HD发病机制中有着重要作用。
- 吴川清林学科陶凯雄杜寒松韩高雄李航帅晓明
- 关键词:叶酸饮食先天性巨结肠