李用国
- 作品数：106 被引量：386H指数：10
- 供职机构：哈尔滨医科大学附属第一医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家科技重大专项黑龙江省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学文化科学更多>>
- 树突状细胞HBsAg疫苗抗乙型肝炎病毒免疫的体外研究被引量：4
- 2002年
- 目的 研究人单核细胞来源的树突状细胞 (DC)激活的HBsAg特异性细胞毒性T淋巴细胞 (CTL)对表达HBsAg的HepG2 /S靶细胞的杀伤效应 ,以探索DC HBsAg疫苗在抗乙型肝炎病毒 (HBV)中的作用。方法 从健康外周血中分离出单核细胞 ,在粒细胞 巨噬细胞集落刺激因子(GM CSF)和白细胞介素 4(IL 4)的作用下培养 7d诱导出DC ,然后以DC为刺激细胞在体外诱导出HBsAg特异性CTL ;将携有HBV S基因的pLXSN/S重组质粒电击导入肝癌细胞系 (HepG2 ) ,建立表达HBsAg的靶细胞模型HepG2 /S ;用染色法检测HBsAg特异性CTL对HepG2 /S靶细胞的杀伤效应。结果 DC激活的HBsAg特异性CTL对HepG2 /S靶细胞具有较强的杀伤效应 ,不同浓度HBsAg(0 μg/L ,5 0 μg/L和 10 0 μg/L)诱导的CTL的杀伤率分别为 3 .8%、69.5 %和85 .1% ,而CTL对HepG2细胞无明显杀伤效应。
- 李用国罗云萍兰英华梁增伟许红梅任红
- 关键词：树突细胞抗病毒免疫乙型肝炎病毒
- 哈尔滨市39例HIV-1毒株原发耐药的变异研究被引量：4
- 2012年
- 目的分析哈尔滨市39例未经抗病毒治疗的HIV-1感染者原发耐药的情况,明确哈尔滨市HIV/AIDS患者原发耐药的耐药谱,为今后该市确定对于HIV/AIDS患者进行高效抗逆转录病毒治疗方案提供参考。方法应用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)方法对哈尔滨市39例未经抗病毒治疗的HIV-1感染者血浆HIVpol基因序列进行扩增,分析耐药突变位点以及对各类抗病毒药物的耐药程度。结果 39例扩增阳性的pol区基因中,系统进化树分析结果显示:B亚型共18例(46.15%),包括泰国B′7例(17.95%),欧美B 11例(28.21%);CRF01_AE亚型15例(38.46%);07_BC亚型5例(12.82%);1例出现CRF01_AE与A亚型的重组(2.56%)。基因型耐药结果分析显示:针对蛋白酶抑制剂,未出现蛋白酶抑制剂(PI)主要耐药突变,9例出现次要耐药突变(L10I、A71T/V)。针对核苷类逆转录酶抑制剂(NRTI)和非核苷类逆转录酶抑制剂(NNRTI),出现3例核苷类逆转录酶抑制剂耐药突变(K219Q、T69N),导致对去羟肌苷(ddI)、齐多夫定(AZT)、司他夫定(d4T)的潜在低度耐药;出现10例非核苷类逆转录酶抑制剂耐药突变(V179D/E),导致对依非韦伦(EFV)、奈韦拉平(NVP)潜在低度耐药。结论哈尔滨市未经治疗的HIV-1感染者中原发耐药的发生率出现上涨趋势,需引起足够的重视。
- 李文静李航王福祥李用国
- 关键词：HIV-1反转录酶蛋白酶
- 树突细胞激活的肿瘤特异性CTL对肝癌荷瘤裸鼠的治疗作用被引量：1
- 2003年
- 李用国梁增伟兰英华蔡大川周卫平任红
- 关键词：树突状细胞抗肿瘤免疫
- 甲胎蛋白与热休克蛋白70融合DNA疫苗抗肿瘤免疫被引量：7
- 2006年
- 目的通过小鼠甲胎蛋白(AFP)与结核分枝杆菌热休克蛋白70(HSP70)基因融合制备DNA疫苗,研究该种DNA疫苗诱导小鼠的免疫应答及其对荷瘤小鼠的治疗作用。方法应用分子克隆技术构建AFP与HSP70的融合表达载体,免疫实验共分5组:磷酸盐缓冲液组、pcDNA3．1组、pcDNA3.1-AFP组、pcDNA3．1-HSP70组、pcDNA3．1- AFP-HSP70组(融合疫苗组),每组7只小鼠。2次免疫后分离小鼠脾细胞,体外诱导细胞毒性T淋巴细胞做杀伤实验, 以乳酸脱氢酶法检测杀伤率,以酶联免疫吸附法检测脾细胞释放的干扰素γ;体外培养小鼠肝癌细胞系Hepa1-6,以每200 μl 4×106细胞数在C57BL／6J小鼠右前腋皮下注射作荷瘤鼠模型,以融合疫苗免疫荷瘤鼠,观测肿瘤大小评价融合疫苗的治疗作用。结果AFP与HSP70的融合疫苗能诱导AFP特异性细胞毒性T淋巴细胞反应,HSP70对于该反应有增强作用(P<0．05),杀伤率在效:靶比为50:1时为32％左右;免疫后小鼠脾细胞体外刺激后分泌干扰素γ约200 pg／ml,融合疫苗组分泌高于其他组(P<0．05),融合疫苗组肿瘤小于其他组(P<0．05),生存时间长于其他组(P<0．05)。结论 AFP与HSP70的融合疫苗能激发AFP特异性细胞毒性T淋巴细胞．并且对肝癌移植瘤有治疗作用。
- 兰英华李用国陈敏唐俐任红
- 关键词：甲胎蛋白热休克蛋白70
- 树突细胞与抗HIV免疫被引量：6
- 2000年
- 树突细胞(Dc)是目前发现的抗原提呈细胞中功能最强的一类,其最显著的特征是能激活初始型T细胞。感染HIV的艾滋病患者,其体内的DC也会被感染。感染后的DC,一方面在早期产生保护性免疫应答;另一方面,随病情进展,DC的数量减少、功能降低,进而引起机体免疫功能的下降。通过叠氮胸苷(AZT)、蛋白酶抑制剂和细胞因子治疗可抑制病毒复制、恢复DC功能,并使艾滋病患者的免疫缺陷减轻,病情得到改善。
- 李用国
- 关键词：树突细胞HIV感染免疫作用艾滋病
- 乙型肝炎病毒感染时的骨髓造血干细胞被引量：6
- 2010年
- 目的研究乙型肝炎患者骨髓造血干细胞中HBV的感染、复制及对造血干细胞增殖的影响。方法收集乙型肝炎患者9例,健康者7例骨髓液,磁珠分离仪分离纯化骨髓液CD34+细胞,取部分干细胞进行免疫组化和原位杂交,以感染HBV的干细胞(2.2.15细胞)为阳性对照,并设健康人骨髓干细胞为阴性对照。余两组干细胞分别分为两组,一组在含有干细胞生长因子(SCF)、酪氨酸激酶受体家族Ⅲ的配体(FLT3)、促血小板生成素(TPO)、白介素-3(IL-3)和10%FBS的IMDM培养基中孵育,另一组在无细胞因子的同样培养基中孵育。第0、1、6、12d进行PCR病毒载量检测并做细胞计数。结果患者组骨髓干细胞经免疫组化染色后为变为棕黄色与阳性对照组一致,经原位杂交后细胞染色为蓝紫色与阳性对照组一致,而阴性对照组均未染色。对患者组骨髓干细胞加细胞因子和无细胞因子第1、6、12d细胞计数分别比较,均明显少于正常对照组(t=0.818,P<0.05;t=3.599,P<0.05;t=2.967,P<0.05)。加细胞因子患者组第6、12d细胞内病毒载量明显高于不加细胞因子患者组(t=3.36,P<0.05;t=5.71,P<0.01)。结论 HBV可以感染骨髓造血干细胞并且可随干细胞的增殖不断复制。感染了HBV的干细胞增殖能力减弱。
- 石雁梅兰英华单蕾周晋李用国
- 关键词：造血干细胞
- 地震后危重多发伤伴混合感染病例分析被引量：1
- 2008年
- 张新翁玲李用国
- 关键词：病例分析地震后医院内感染外伤感染重症监护
- 小鼠甲胎蛋白与结核杆菌热休克蛋白70基因融合载体的构建及体外表达被引量：1
- 2004年
- 目的 构建小鼠甲胎蛋白 (α Fetoprotein ,AFP)与结核杆菌热休克蛋白 70 (Mycobacteriumtuberculosisheatshockprotein 70 ,Mt.HSP70 )基因融合载体 ,并研究其在真核细胞中的表达情况。方法 以pcDNA3.1为基本单位构建AFP及与HSP70的融合表达载体 ,融合基因以G S G G S连接子连接 ;用脂质体将系列载体导入COS 7细胞 ,4 8h后以免疫化学方法检测其表达。结果 构建的AFP和HSP70的单独及融合表达载体导入COS 7细胞 4 8h后经RT PCR检测可扩增出相应片段 ,细胞免疫化学染色为阳性。结论 AFP和HSP70的单独及融合表达载体构建成功 ,并能在真核细胞中表达。
- 兰英华梁增伟李用国陈敏任红
- 关键词：甲胎蛋白热休克蛋白70肝细胞
- 透析 接受化疗 长期服用免疫抑制剂及毒瘾者抗乙型肝炎病毒治疗探讨
- 2014年
- 目前对于透析、接受化疗及长期服用免疫抑制剂和毒瘾者合并乙型肝炎病毒(HBV)感染时,其抗病毒治疗均推荐选择强效、低耐药的核苷(酸)类似物治疗,不推荐干扰素治疗。对于透析者,当转氨酶和HBV-DNA水平未达到抗病毒治疗指征时,应考虑透析因素的影响,需积极行肝活检,以明确是否需要抗病毒治疗;对于化疗或者使用免疫抑制剂者,治疗前、治疗中、治疗后均需要密切监测乙型肝炎标志物,以确定是否需HBV治疗;对于毒瘾者,选择抗病毒治疗时机时应排除药物性肝损害的可能性。
- 宋术鹏兰英华李用国
- 关键词：毒瘾者抗HBV治疗
- 结核杆菌HSP70真核表达载体的构建
- 2000年
- 目的 :构建结核杆菌HSP70重组真核表达质粒。方法 :用PCR方法从结核杆菌H37RV基因组中扩增出结核杆菌HSP70基因NDA序列 ,应用T A克隆技术 ,克隆到质粒GPEM Gvector,经DNA测序证实基因碱基无误后 ,亚克隆到真核表达质粒PCDNA3 1(+ ) ,构建成PCDNA3 1 HSP70重组质粒。结果 :经酶切鉴定 ,证实重组质粒构建正确。结论 :结核杆菌HSP70真核表达载体构建成功。
- 梁增伟李用国任红
- 关键词：结核杆菌热休克蛋白70克隆PCDNA3.1
