朱大兴
- 作品数：38 被引量：203H指数：7
- 供职机构：四川大学华西医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家教育部博士点基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学化学工程更多>>
- KAI1基因在人肺癌细胞株中的表达水平及调控机制的研究
- :(1)探讨不同组织学类型的人肺癌细胞株和正常人成纤维细胞株MRC-5中KAI1基因mRNA的表达水平;(2)不同转移潜能的人大细胞肺癌细胞株中KAI1基因mRNA表达水平的差异;(3)探讨去甲基化药物5-Aza-CdR...
- 尤嘉琮陈军马力朱大兴周清华
- 关键词：肺癌细胞株KAI1基因基因表达基因调控
- 肺癌术后迟发性中–大量胸腔积液诊治分析被引量：1
- 2018年
- 背景与目的目前文献缺乏对肺癌术后迟发性胸腔积液的诊治分析,肺癌切除术后迟发性乳糜胸仅有4例个案报道。本研究旨在观察肺癌根治切除术后迟发性中–大量胸腔积液的发生情况,探讨其发生原因和治疗策略。方法回顾性分析2016年12月至2018年4月四川大学华西医院肺癌中心单个医疗组肺癌根治性切除术患者235例,其中6例(2.6%)发生迟发性中–大量胸腔积液,所有病例均做了胸水常规、生化、细菌培养、乳糜试验(苏丹III染色)、脱落细胞学检测,并进行诊治分析。结果 6例迟发性中–大量胸腔积液患者均行了胸腔穿刺置管、细管引流;迟发性胸腔积液发生在术后17–42(平均值=34)d,胸水引流量800–2800(平均值=1467)mL,胸水性质均为渗出液,以淋巴细胞为主;乳糜试验(苏丹III染色)阳性,诊断为术后迟发性乳糜胸。4例患者联合低脂饮食1个月治疗,另2例患者同时胸腔内注射50%高糖行胸膜固定术治疗,均未再发中–大量胸腔积液。结论肺癌根治切除术后迟发性中–大量胸腔积液并不少见,这6例患者均为迟发性乳糜胸,通过胸腔穿刺细管引流、低脂饮食、胸腔注射50%高糖行胸膜固定等保守治疗均可治愈。
- 张明科黄开利田龙田龙范铭钰
- 关键词：肺叶切除乳糜胸
- 人端粒酶催化亚单位启动子调控自杀基因HSV-TK靶向性表达治疗肺癌的体内外实验研究被引量：5
- 2008年
- 目的研究人类单纯疱疹病毒的胸苷激酶(HSV-TK)/更昔洛韦(GCV)治疗系统在人端粒酶催化亚单位(hTERT)启动子的调控下对肺癌细胞A549的体外靶向性增殖抑制作用和对裸鼠体内A549移植瘤的治疗效果。方法1用已构建的hTERT启动子和SV40启动子调控的TK基因表达质粒pGL3-hTp-TK和pGL3-SV40-TK转染端粒酶阳性的人肺腺癌细胞A549及端粒酶阴性的人胚肺细胞MRC-5,RT-PCR方法检测转染细胞中TK基因的表达情况;2MTT法检测GCV对上述转染细胞体外增殖的抑制作用;并应用流式细胞仪检测GCV对上述转染细胞凋亡的影响;3将A549细胞接种于裸鼠皮下,研究pGL3-hTp-TK/GCV和pGL3-SV40-TK/GCV对移植瘤的体内生长抑制作用。结果1转染pGL3-SV40-TK的A549和MRC-5细胞均有TK mRNA表达,转染pGL3-hTp-TK的A549细胞也有TK mRNA表达,但MRC-5细胞无TK mRNA表达;2GCV对转染pGL3-SV40-TK的A549、MRC-5细胞和转染pGL3-hTp-TK的A549细胞的体外增殖均有明显抑制作用,对转染pGL3-hTp-TK的MRC-5细胞无明显抑制作用;转染pGL3-SV40-TK和pGL3-hTp-TK的A549细胞经GCV处理后细胞凋亡指数(分别为21.58%和23.19%)均显著高于转染pGL3-hTp的A549细胞及空白对照,转染pGL3-SV40-TK的MRC-5细胞凋亡指数(9.35%)显著高于对照组,而转染pGL3-hTp-TK的MRC-5细胞凋亡指数(0.88%)无明显升高;3pGL3-SV40-TK/GCV和pGL3-hTp-TK/GCV治疗系统对裸鼠A549移植瘤的生长具有明显抑制作用,抑瘤率分别为46.7%和40.5%,均显著高于各阴性对照组(分别为9.7%,14.3%,7.0%和8.0%)。结论hTERT启动子可以调控HSV-TK基因在肺癌细胞中靶向性表达,HSV-TK/GCV治疗系统在hTERT启动子调控下对肺癌细胞A549的体外增殖和裸鼠体内的移植瘤生长均有明显的抑制作用。
- 王艳萍唐小军周清华车国卫陈小禾朱大兴
- 关键词：自杀基因端粒酶催化亚单位靶向性表达
- 突变型nm23-H1基因的磷酸化活性研究被引量：2
- 2009年
- 背景与目的磷酸化活性是nm23-H1重要的生物学活性,本研究旨在探讨不同位点的突变对nm23-H1磷酸化活性的影响。方法以野生型nm23-H1研究对照,采用放射自显影的方法检测nm23-H1野生型(WT)和4种突变型(P96S,H118F,S120G和S44A)原核表达蛋白的自身丝氨酸与自身组氨酸磷酸化活性,应用反相高效液相色谱技术(RP-HPLC)检测上述蛋白的NDPK激酶活性。结果野生型和突变型nm23-H1蛋白的自身丝氨酸与自身组氨酸磷酸化活性由大到小依次为P96S、WT、S44A、S120G和H118F,而NDPK活性由大到小依次为:WT、S120G、P96S、S44A和H118F;经线性相关分析,自身丝氨酸与组氨酸磷酸化活性呈正相关(r=0.983,P<0.01),但NDPK活性与自身丝氨酸和自身组氨酸活性均无相关性(分别为r=0.458,P>0.05;r=0.482,P>0.05)。结论不同位点的突变对nm23-H1自身丝氨酸、自身组氨酸及NDPK激酶活性影响不同,NDPK活性与自身磷酸化活性并不完全关联。其中118位组氨酸是nm23-H1激酶活性的关键氨基酸;96位脯氨酸可能与nm23-H1的磷酸转移能力有关;而120位丝氨酸可能为自身丝氨酸和组氨酸磷酸化位点;44位丝氨酸可能为另一具有NDPK激酶的氨基酸。
- 杨雪琴马力朱大兴王东王阁周清华
- 关键词：NM23-H1突变
- 利用Pyrobest DNA聚合酶一步法进行大片段基因的定点突变被引量：4
- 2007年
- 目的:介绍一种简单、快速、高效和经济的进行大片段基因定点突变的方法。方法:小量抽提含有NM23H1-EGFP融合基因的逆转录病毒真核表达质粒pLXSN-NM23H1-EGFP,体外合成突变引物对,利用高保真Pyrobest DNA聚合酶对质粒DNA进行PCR突变反应,然后用DpnⅠ限制性内切酶消化PCR产物以去除模板DNA,取适量消化产物转化大肠杆菌XL1-Blue,随机挑选克隆进行测序筛选、鉴定所需突变株。结果:在NM23H1-EGFP基因中引入了S44A、P96S、H118F、S120G、P96S-S120G等5个替换突变位点及9bp处的插入突变。结论:该方法简单、快速、高效、经济,不须纯化中间产物,不须亚克隆,突变效率几乎为100%,是一种值得推广应用的方法。
- 朱大兴周清华王艳萍车国卫唐小军朱文陈小禾孙芝琳
- 关键词：DNA聚合酶定点突变
- 人大细胞肺癌高低转移株差异表达基因消减cDNA文库的构建和初步筛选
- 2007年
- 背景与目的筛选肺癌转移相关基因有助于阐明肺癌侵袭转移的分子机理。为了筛选不同转移潜能肺癌的转移相关差异表达基因,本研究构建不同转移潜能的人大细胞肺癌细胞株NL9980和L9981间差异表达基因的消减cDNA文库,并对消减文库进行初步筛选。方法应用抑制消减杂交技术构建人大细胞肺癌高低转移株NL9980与L9981间差异表达基因的正向消减cDNA文库和反向消减cDNA文库,利用α互补原理,经蓝白菌落初步筛选获得阳性克隆,应用斑点杂交的方法对正向和反向消减cDNA文库进行杂交筛选。结果成功构建了人大细胞肺癌高低转移株差异表达基因的正向消减cDNA文库和反向消减cDNA文库。经蓝白菌落筛选和斑点杂交,正向消减文库获得了307个阳性克隆,反向消减文库获得了78个阳性克隆。结论抑制消减杂交是克隆差异表达基因的有效方法,利用此方法可以成功构建人大细胞肺癌高低转移株差异表达基因消减cDNA文库。不同转移潜能人大细胞肺癌细胞株中存在可能与转移相关的差异表达基因。
- 李娟周清华陈军朱大兴马力闫惠琴朱文刘红雨
- 关键词：肺肿瘤转移相关基因抑制消减杂交斑点杂交
- 基于“分子分期”的局部晚期非小细胞肺癌“个体化外科治疗”的长期生存结果被引量：15
- 2011年
- 背景与目的局部晚期肺癌约占肺癌的35%-40%,其内科治疗平均生存6-8个月。本研究的目的是探讨和总结检测肺癌病人外周血"微转移",对局部晚期肺癌病人进行"分子分期",指导选择局部晚期肺癌手术适应症、术前新辅助化疗和术后辅助治疗的受益者,以及对局部晚期肺癌进行"个体化外科治疗"的可行性及其对长期生存的影响。方法应用RT-PCR检测516例局部晚期肺癌病人手术前外周血CK19mRNA表达(其中115例行术前新辅助化疗者在新辅助化疗前后分别检测病人外周血"微转移"),对肺癌"微转移"进行"分子诊断",对肺癌病人进行"个体化分子分期",指导临床选择外科手术适应症、术前新辅助化疗和术后辅助治疗的获益者。回顾分析516例局部晚期肺癌基于"分子分期"的"个体化外科治疗"的长期生存结果。结果 516例病人中鳞癌322例,非鳞癌194例;P-TNM分期:IIIA期112例,IIIB期404例;"个体化分子P-TNM分期":M-IIIA期:97例,M-IIIB期:278例,M-IV期:141例。本组病例行支气管肺动脉袖状成形肺叶切除256例;肺叶切除联合部分左心房切除重建41例;支气管肺动脉袖状成形联合上腔静脉切除重建90例;肺切除联合部分膈肌切除重建3例;支气管肺动脉袖状成形肺叶切除联合部分左心房切除重建30例;支气管肺动脉袖状成形联合主动脉鞘膜切除10例;右全肺切除联合左心房、右侧全部膈肌、下腔静脉和肝右静脉切除重建1例;肺切除联合气管隆突切除重建10例;支气管肺动脉袖状成形联合气管隆突切除重建和上腔静脉切除重建,或联合上腔静脉和左心房、或联合气管隆突和左心房切除重建55例。手术死亡5例,死亡率为0.97%。516例肺癌病人中141例外周血检测到CK19mRNA表达,阳性率为27.3%。肺癌病人外周血微转移阳性率与肺癌组织学类型、P-TNM分期、N分期等均有密切关系(P<0.05),但与患者年龄、性别、是否吸烟、原发�
- 周清华石应康陈军刘斌王允朱大兴张洪涛徐鹏宫友陵陈钢韦森邱小明牛中喜陈晓峰雷哲段亮伍伫
- 关键词：局部晚期非小细胞肺癌分子分期
- 非小细胞肺癌新辅助免疫治疗生物标志物研究进展被引量：2
- 2022年
- 外科手术是早中期非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer, NSCLC)患者的主要治疗手段。NSCLC的辅助治疗和新辅助治疗在预防疾病复发和控制远处转移具有重要意义。免疫检查点抑制剂(immune checkpoint inhibitors, ICIs)作为新的药物治疗手段已经在晚期NSCLC患者中带来长期生存获益,并在NSCLC新辅助治疗人群中显示出较高的降期率和病理缓解率。但是如何早期识别、鉴定NSCLC ICIs新辅助治疗的获益人群是当前面临的巨大挑战之一。目前,NSCLC ICIs新辅助的标志物研究尚无定论。因此,我们总结了目前已经披露的新辅助免疫治疗临床试验及相关的生物标记物的研究进展。
- 舒春露朱大兴周清华
- 关键词：肺肿瘤新辅助治疗生物标志物
- 改良Hemi-Clamshell入路:局部晚期肺癌手术入路的新选择
- 2019年
- 临床资料 患者,男,42岁,因咳嗽和头面部肿胀入院。入院查体:头面部及双上肢肿胀,颈部淋巴结未扪及肿大。胸部CT检查发现右肺上叶近肺门部见最大截面积7.9cm×4.5cm的软组织密度肿块影,右颈根部、双肺门、同侧及对侧纵隔淋巴结多发增大,纵隔内肿大淋巴结与肿块融合,包埋上腔静脉致其管腔明显变窄,同时侵犯头臂静脉、左无名静脉(图1)。患者全身骨显像核素扫描、头颅磁共振成像(MRI)和腹部增强CT等检查未见确切远处转移灶,纤维支气管镜检查未发现各级支气管管腔异常,全套肺功能检查结果显示患者的用力肺活量(FVC)为2.07L、第一秒用力呼气容积(FEV1)为1.76L,一秒率(FEV1/FVC)为85.02%,弥散功能正常。
- 黄开利邓汉宇郑强强朱大兴范铭钰秦昌龙周清华
- 关键词：肺癌
- 带蒂心包脂肪垫包裹支气管吻合口预防支气管吻合口瘘的临床效果观察被引量：3
- 2020年
- 背景与目的支气管袖式肺叶切除是中心型肺癌重要的手术方式,它是最能体现"最大程度切除肿瘤,同时最大程度保留肺功能"的肺癌手术原则。支气管胸膜瘘是支气管袖式肺叶切除最严重的手术并发症,严重威胁患者的生命安全。本文将总结带蒂心包脂肪垫包裹支气管吻合口在预防支气管袖式肺叶切除术后支气管吻合口瘘的临床效果。方法回顾性分析四川大学华西医院肺癌中心2016年1月-2019年5月期间行支气管袖式肺叶切除术,并用带蒂心包脂肪垫包裹支气管吻合口的39例中心型肺癌患者临床资料,观察该组患者术后并发症,尤其是支气管吻合口相关并发症发生情况。结果该组患者手术后恢复良好,均于术后6 d-14 d内出院;30 d内无支气管胸膜瘘发生,无因胸腔内出血再次行手术病例,无严重心律失常,无严重肺部感染及呼吸衰竭发生;术后继续随访期间,术后6个月发生重度吻合口狭窄导致术侧残余肺不张1例。结论支气管袖式肺叶切除的肺癌患者,术中用带蒂心包脂肪垫包裹支气管吻合口,可有效预防术后吻合口瘘相关并发症的发生,从而提高手术安全性。
- 黎小云邓汉宇郑希朱大兴周清华唐小军
- 关键词：中心型肺癌支气管胸膜瘘
