朱文
- 作品数：85 被引量：575H指数：13
- 供职机构：四川大学华西医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家教育部博士点基金国家科技重大专项更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学化学工程更多>>
- 代谢酶CYP2D6基因多态性与肺癌易感性的病例对照研究被引量：7
- 2005年
- 背景与目的外源性化合物代谢酶参与环境致癌物在体内的代谢,代谢酶基因多态性被认为与肺癌的易感性相关.本研究的目的是探讨代谢酶细胞色素2D6酶(CYP2D6)基因多态性在四川汉族正常人群和肺癌患者中的分布,以及CYP2D6基因多态性与肺癌易感性的关系.方法应用PCR-RFLP技术检测152例正常人和150例原发性肺癌患者的外周血CYP2D6ch基因型;应用病例对照研究分析CYP2D6ch基因多态性与肺癌易感性的关系.结果 (1)CYP2D6ch基因的C和T等位基因在正常人群中分布频率分别为39.5%和60.5%,而肺癌患者中分布频率分别为46.3%和53.7%;两组间C和T等位基因频率比较无显著性差异(P=0.089).(2)CYP2D6ch等位基因型C/C、C/T、T/T在正常人群中分布频率分别为18.4%、42.1%和39.5%,而在肺癌患者中分布频率分别为22.7%、47.3%和30.0%,两组间比较无显著性差异(P=0.215).(3)携带CYP2D6ch非T/T等位基因型的个体患肺鳞癌风险是携带T/T等位基因型的2.084倍(95%CI 1.024～4.244,P=0.043).(4)携带CYP2D6ch非T/T等位基因型的轻度吸烟者患肺癌风险是携带CYP2D6ch T/T等位基因型轻度吸烟者的2.92倍(95%CI 1.087～7.828,P=0.033).结论 CYP2D6ch非T/T等位基因型与肺鳞癌风险升高相关,在轻度吸烟人群中,非T/T等位基因型与肺癌风险升高相关.
- 郭占林周清华朱文李代蓉袁天柱王艳萍陈晓禾刘伦旭伍伫杨俊杰
- 关键词：基因多态性
- GSTT1基因多态性与中国四川汉族人群肺癌遗传易感性关系的研究被引量：8
- 2005年
- 背景与目的 GSTs可能参与机体致癌物的解毒反应,如保护个体免受吸烟的损害,因此GSTs基因多态性被认为是个体是否患癌的易感因素.本研究的目的是探讨GSTT1基因多态性与中国四川汉族人群肺癌遗传易感性的关系.方法采用病例对照和PCR-RFLP方法检测中国四川汉族人群肺癌患者150例和健康对照者152例的GSTT1基因缺失型的频率,并评价其与吸烟和肺癌遗传易感性的关系.结果①GSTT1(-)基因型在肺癌组和对照组分别为54.7%(82/150)和38.2%(58/152),二者间比较有显著性差异(OR=1.681,95%CI＝1.009～2.803,P＝0.046);②GSTT1(-)基因型患肺鳞癌 (OR＝2.969, 95%CI＝1.511～5.834,P＝0.002)及肺腺癌(OR＝2.095,95%CI＝1.060～4.140,P＝0.033)的风险性明显增加;③吸烟者中GSTT1(-)基因型者患肺癌的风险是GSTT1(+)者的4.051倍;④GSTT1(-)基因型者中,吸烟者患肺癌的风险是不吸烟者的53.885倍;⑤吸烟≥20包年者中,GSTT1(-)基因型者患肺癌的风险是GSTT1(+)者的4.296倍.结论①GSTT1(-)基因型增加四川汉族人群患肺癌的风险性,特别是增加患肺鳞癌的风险;②GSTT1(-)基因型和吸烟之间存在交互作用,吸烟量越大且为GSTT1(-)基因型者则患肺癌的风险性越大.
- 袁天柱周清华朱文郭占林李代蓉王艳萍陈晓禾刘伦旭杨俊杰
- 关键词：GSTT1肺癌易感性易感基因
- 肺癌病因学和遗传易感性研究进展被引量：11
- 2005年
- 朱文周清华
- 关键词：遗传易感性病因学研究环境致癌物家族聚集现象流行病学资料癌发生
- 靶向抑制ERK1/2信号传导通路对人高转移大细胞肺癌细胞株L9981恶性表型的影响被引量：3
- 2005年
- 背景与目的肺癌的发生和发展是一个多基因调控、多阶段多步骤发生的复杂过程,目前已知信号传导异常在肺癌发生和发展各个阶段都具有重要作用。本研究旨在探讨外源性MEK1/2抑制剂U0126对人高转移大细胞肺癌细胞株L9981中细胞外信号调节激酶ERK1/2表达和活化的影响及细胞恶性生物学行为的影响。方法将具有nm23H1基因杂合性缺失的人高转移大细胞肺癌原代细胞株L9981培养传代,应用蛋白印迹法(Westernblot)和免疫沉淀法,检测U0126对L9981中总ERK1/2和双磷酸化ERK1/2的表达水平,以及ERK1/2相对活性的影响;应用MTT法及改良Boyden小室法分别检测U0126对L9981体外增殖活性及侵袭能力的作用规律。结果不同浓度的U0126作用于L998120min后,随着U0126浓度的增加ERK1/2的相对活性均逐渐下降,不同U0126浓度组间磷酸化ERK1/2表达水平比较均有非常显著性差异(P<0.01);而不同浓度U0126组间总ERK1/2表达水平比较无显著性差异(P=0.387)。相同浓度的U0126作用于L9981不同时间后,随着作用时间的延长,细胞中ERK1/2的相对活性均逐渐下降,各时间组间磷酸化ERK1/2表达水平比较有显著性差异(P<0.01);而各时间组间总ERK1/2表达水平比较无显著性差异(P=0.689)。U0126对L9981细胞株ERK1/2相对活性的作用具有时间和剂量依赖性。不同浓度的U0126作用于L9981后,随着U0126浓度的增加,细胞体外增殖活性随之降低,不同浓度组间比较均有显著性差异(P<0.01)。不同浓度的U0126作用于L9981后,随着U0126浓度的增加,细胞体外侵袭能力随之降低。在U0126浓度为0、10和20μmol/l时三个剂量组间细胞体外侵袭能力比较无显著性差异(P>0.05),而在U0126浓度增加为40和60μmol/l时与U0126浓度为0、10和20μmol/l时细胞体外侵袭能力比较均有显著性差异(P<0.01)。结论ERK1/2信号传导通路特异性抑制剂U0126对人高转移大细胞肺癌细胞株ERK1/2信号传导通路的抑�
- 李印周清华孙芝琳孙泽芳王艳萍覃扬朱文陈晓禾
- 关键词：ERK1/2U0126
- 检测肺癌患者外周血和骨髓微转移的临床意义被引量：34
- 2003年
- 目的探讨检测肺癌患者外周血和骨髓微转移的特异性、敏感性及临床意义。方法应用巢式RT-PCR技术,检测59例肺癌患者、11例肺部良性病变患者和20例健康人外周血、骨髓中CK19 mRNA表达。结果巢式RT-PCR检测技术的敏感性达到10-6。59例肺癌患者中,20例检测出外周血微转移,13例检测出骨髓微转移,其阳性检出率分别为33.9％(20/59)和22.0％(13/59),二者有显著正相关(P<0.05)。肺癌患者外周血和骨髓微转移与肺癌组织学类型、细胞分化程度及P-TNM分期均存在密切关系(P<0.05或P<0.01)。肺良性病变患者、健康人外周血和骨髓中均未检测出CK19 mRNA表达。结论肺癌患者外周血和骨髓中均存在用常规方法检测不出的微转移;应用巢式RT-PCR技术检测肺癌患者外周血和骨髓中CK19 mRNA表达,对肺癌微转移的分子诊断具有重要的理论意义和临床应用前景。
- 周清华宫友陵覃扬孙芝琳孙泽芳刘伦旭李潞朱文
- 关键词：肺癌肿瘤转移外周血微转移骨髓微转移CK-19
- nm23-H_1基因对人肺癌细胞中细胞外信号调节激酶活性的影响被引量：8
- 2004年
- 目的 探讨肿瘤转移抑制基因nm2 3 H1 对人高转移大细胞肺癌细胞株L9981中细胞外信号调节激酶ERK1/2活性的影响。方法 应用特异性识别总ERK1/2 ( p44 /4 2MAPkinase)和双磷酸化ERK1/2( phospho p44 /4 2MAPkinase)的抗体及蛋白印迹法 (Westernblot) ,检测L9981(缺失nm2 3 H1 基因的原代肺癌细胞株 )、L9981 nm 2 3 H1 (转染了nm 2 3 H1 基因的L9981细胞株 )、L9981 PLXSN (转染了空载体的L9981细胞株 )中总ERK1/2和磷酸化ERK1/2的水平。磷酸化ERK 1/2活性应用非放射性免疫沉淀和Westernblot法以及 p44 /4 2MAPkinase分析试剂盒予以检测。 结果 L9981 nm2 3 H1 细胞株中磷酸化ERK 1/2的水平 ,以及ERK1/2活性均显著低于L9981细胞株和L9981 PLXSN细胞株 (P <0 .0 1) ,L9981和L9981 PLXSN细胞株间磷酸化ERK 1/2水平和ERK 1/2活性比较均无显著性差异 (P >0 .0 5 )。三个细胞株间总ERK1/2水平比较均无显著性差异 (P >0 .0 5 )。结论 nm2 3 H1 基因可明显靶向地抑制人高转移肺癌细胞株L9981中ERK 1/2的转录表达和ERK 1/2的活性。推测nm2 3 H1 基因的作用机制可能与其抑制了MAPK/ERK信号传导通路有关。
- 李印周清华孙芝琳覃扬朱文王艳萍刘伦旭陈小禾孙泽芳
- 关键词：NM23-H1基因肺癌癌细胞信号传导通路
- nm23-H1基因转染前后人大细胞肺癌细胞株抑制消减cDNA文库的构建被引量：2
- 2008年
- 背景与目的已有的研究表明,nm23-H1基因是一个重要的肺癌转移抑制基因,为了筛选与该基因表达相关的差异表达基因,本研究拟构建nm23-H1基因转染前后人大细胞肺癌细胞株(L9981和L9981-nm23-H1)差异表达基因的抑制消减cDNA文库,为进一步筛选、克隆与nm23-H1转移相关的基因奠定基础。方法利用抑制消减杂交(suppressive subtractive hybridization,SSH)技术构建nm23-H1基因转染前后人大细胞肺癌细胞株(L9981和L9981-nm23-H1)间差异表达基因的正向和反向消减cDNA文库,经蓝白菌落筛选克隆,并PCR反应鉴定。结果成功构建了该两株细胞株差异表达基因的正向和反向消减cDNA文库。经蓝白菌落筛选,正向消减文库总共获得约300个白斑克隆,反向消减文库总共获得约400个白斑克隆,从正反向消减文库中各挑选96个克隆进行PCR扩增检测是否有插入片段,结果显示在挑选的正向文库中有84个克隆有插入片段,反向文库中有83个克隆有插入片段,其片段大小范围为(300-750)bp。结论抑制消减杂交是克隆差异表达基因的有效方法,我们应用SSH法和T/A克隆技术成功建立了nm23-H1基因转染前后人大细胞肺癌细胞株(L9981和L9981-nm23-H1)差异表达基因的抑制消减cDNA文库。nm23-H1基因在肺癌细胞中的表达可能影响某些转移相关基因的差异表达。
- 叶苏娟冯志华朱文蔡春季李潞孙丽亚万海粟马力周清华
- 关键词：肺肿瘤NM23-H1基因抑制消减杂交CDNA文库转移相关基因
- 高转移和低转移人大细胞肺癌细胞株的比较蛋白组学研究被引量：2
- 2008年
- 目的探讨比较人高转移大细胞肺癌细胞株(L9981)和人低转移大细胞肺癌细胞株(NL9980))间蛋白质表达的差异。方法采用固相pH梯度双向凝胶电泳分离L9981细胞株和NL9980细胞株的总蛋白,用图像分析软件比较分析细胞间的差异表达蛋白质。对13个差异表达的蛋白质点通过胶内酶解,基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALD-TOF-MS/MS)和蛋白质数据库检索进行鉴定。结果经ImageMaster软件分析后发现有8个蛋白质点仅在L9981中检测到有表达,8个蛋白质点仅在NL9980中检测到有表达,发现19个蛋白质点在两种肺癌细胞株中均存在,其中9个蛋白质点在L9981中表达量显著高于NL9980,10个蛋白质点在NL9980中表达量显著高于L9981(P<0.05)。通过对差异明显的蛋白质点进行质谱鉴定和蛋白质数据库查询,发现线粒体热休克蛋白和谷胱甘肽合成酶在L9981中的表达被上调,P47蛋白、免疫球蛋白重链可变区、烯醇化酶1和真核翻译起始因子3在L9981中的表达被下调,丙酮酸激酶仅在L9981中有表达,WD-40重复蛋白仅在NL9980中有表达。结论人高、低转移大细胞肺癌细胞株蛋白质组的表达存在明显差异,鉴定的差异蛋白质多与肿瘤的侵袭转移相关,这些差异蛋白质有可能为进一步发现与肺癌转移相关的分子标志物和阐明肺癌转移的分子机制提供线索。
- 高利伟朱文冯志华安宁
- 关键词：比较蛋白质组学肺癌转移
- 肺癌患者外周血中Lunx mRNA的检测及其临床意义被引量：16
- 2007年
- 目的评价肺癌患者外周血中Lunx mRNA表达用于诊断肺癌微转移的特异性和敏感性,探讨肺癌转移的早期诊断方法。方法2004年3月～2005年2月,以Lunx mRNA为肿瘤标记物,采用逆转录-聚合酶链反应(reverse transcription-polym erase chain reaction,RT-PCR)技术,检测60例～期行手术治疗的肺癌患者(肺癌组)外周血Lunx mRNA的表达,并以行手术治疗的20例肺良性病变患者(肺良性病变组)及10例健康人外周血(健康对照组)作为对照。结合病理类型、临床分期、随访,评价Lunx mRNA作为肺癌微转移肿瘤标记物的临床意义。结果(1)肺癌组患者外周血中Lunx mRNA的阳性表达率为46.7%(28/60),Lunx mRNA在肺良性病变组(0/20)和健康对照组外周血中无表达(0/10);(2)Lunx mRNA在肺癌I期患者中阳性表达率为8.3%(1/12),期患者中为33.3%(5/15),期患者中为66.7%(22/33),期和期患者的Lunx mRNA表达差异无统计学意义,期与期、期患者的Lunx mRNA表达差异有统计学意义(χ2=15.88,P=0.000);(3)在38例腺癌患者中17例Lunx mRNA表达为阳性,在14例鳞癌患者中7例表达为阳性,3例腺鳞癌患者中3例表达为阳性,3例小细胞肺癌患者中1例表达为阳性,1例大细胞肺癌和1例肉瘤样癌患者表达为阴性。不同病理类型的肺癌患者的Lunx mRNA表达差异无统计学意义;(4)截至2005年3月的随访发现,Lunx mRNA表达阳性的28例患者中有9例发生转移,Lunx mRNA表达阴性的32例患者中仅1例发生转移。结论在肺癌患者外周血微转移的检测中,Lunx mRNA表现出较高的敏感性和特异性,有可能成为诊断肺癌外周血微转移较合适的分子标记物。
- 庄翔刘伦旭朱文陈利华宋煜宏任光国李强韩泳涛
- 关键词：肺癌微转移LUNXMRNA外周血
- 蛋白激酶C抑制剂CalphostinC抑制人高转移大细胞肺癌细胞株侵袭和转移的实验研究
- 2009年
- [目的]探讨以蛋白激酶C(PKC)为靶点应用其特异性抑制剂开发抗肿瘤侵袭与转移靶向药物的可行性。[方法]应用MTT法和改良Boyden小室法分别检测三株肺癌细胞株细胞(L9981、L9981-pLXSN和L9981-nm23-H1)的侵袭力、增殖力;以及加入CalphostinC作用后,三株细胞株细胞侵袭力、增殖力的变化。[结果]L9981和L9981-pLXSN体外侵袭力和增殖活性明显高于转染nm23-H1基因的L9981-nm23-H1肺癌细胞株(P<0.001);L9981和L9981-pLXSN细胞间体外侵袭力和增殖活性则无显著性差异(P>0.05)。用CalphostinC处理三株肺癌细胞株后,细胞体外侵袭力和增殖活性显著下降(P<0.001),但L9981-nm23-H1细胞体外侵袭力和增殖活性仍低于L9981和L9981-pLXSN(P<0.001),而后两者细胞间则无显著性差异(P>0.05)。[结论]PKC抑制剂CalphostinC可明显抑制L9981肺癌细胞株的细胞增殖力和侵袭力;CalphostinC和nm23-H1在影响人高转移大细胞肺癌细胞株细胞体外增殖活性和侵袭力的过程中具有协同和相加作用。
- 聂强杨平玲周清华朱文刘伦旭付军科李定彪李印车国卫
- 关键词：蛋白激酶C抑制剂肺肿瘤大细胞癌细胞株靶向治疗
