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固定化锤头状ribozyme的初步研究: 1996年; 用共价连接方式将专一切割苜蓿夜蛾核多角体病毒多角体蛋白ｍＲＮＡ片段的锤头状ｒｉｂｏｚｙｍｅ（ｈａｍｍｅｒｈｅａｄｒｉｂｏｚｙｍｅ）固定在ＳｅｐｈａｒｏｓｅＣＬ－４Ｂ上，ｒｉｂｏｚｙｍｅ与载体之间有１９个原子的距离，研究并比较了该固定化ｒｉｂｏｚｙｍｅ与游离（非固定化）ｒｉｂｏｚｙｍｅ的底物专一性、催化活性、最适反应温度以及热和保存稳定性。讨论了固定化ｒｉｂｏｚｙｍｅ与固定化酶在性质上的相似性以及固定化ｒｉｂｏｚｙｍｅ研究在理论和应用上的可能意义。; 张晓岚陆长德祁国荣; 关键词：RNA 固定化

Ribozyme阻断体内基因表达的研究: 1995年; 利用ribozyme专一水解RNA的特性,设计ribozyme定点切割基因表达的中间物mRNA以及病毒RNA,可以阻断基因表达和抑制病毒复制,从而达到治病和防病的目的。自1990年以来,利用ribozyme技术,已经对爱滋病、肿瘤等疾病进行了大量的研究。本文着重介绍ribozyme体内阻断基因表达的应用和一些规律性问题。; 张晓岚黄扬中祁国荣; 关键词：RIBOZYME 基因治疗基因表达

抗BmNPV即刻早期蛋白三联ribozyme在家蚕细胞中的表达被引量：1: 1996年; 为了阻断家蚕核多角体病毒（ＢｍＮＰＶ）的基因表达，以ＢｍＮＰＶ的即刻早期蛋白基因（ＩＥ）为靶序列，设计了三联ｒｉｂｏｚｙｍｅ．体外切割反应表明，该ｒｉｂｏｚｙｍｅ能特异地切割靶序列的ｍＲＮＡ；细胞实验表明，细胞中表达的ｒｉｂｏｚｙｍｅ也能够特异地切割靶序列，从而使受ＢｍＮＰＶ感染的Ｂｍ－Ｎ细胞中的多角体减少约３０％．; 张晓岚陈农安陆长德祁国荣; 关键词：家蚕核多角体病毒

Ribozyme对NPV感染家蚕细胞的保护作用被引量：2: 1997年; 用自行设计的能专一切割家蚕核多角体病毒即刻早期蛋白（BmNPVIE）mRNA上三个位点的三联体ribozyme－R426（由R47，R208和R687三个ribozyme串联而成），构建了在家蚕细胞中瞬时表达的质粒pGL2Rz。为了检测和筛选的方便，在BmNPVIE启动子和R426之间装入了荧光素酶基因。细胞实验的结果表明，Bm－N细胞转染36小时，荧光素酶基因的表达已达最高峰；细胞中抽提的R426的体外切割反应表明，单体R47和R208具有切割活性，而检测不出R687的切割条带。与体外转录的R426比较，细胞中抽提出的R426的活性明显降低。对表达R426的细胞进行野生型病毒BmNPV的感染实验表明，与仅表达荧光素酶基因的对照比较，细胞中形成的多角体减少约30％。; 张晓岚张峰祁国荣陆长德; 关键词：RIBOZYME 家蚕细胞三联体基因病毒

抗家蚕核多角体病毒(BmNPV)即刻早期蛋白基因的三联核酶的设计和性质被引量：3: 1996年; 以ＢｍＮＰＶＩＥ基因为靶序列，通过计算机设计了３个切割靶序列不同位点的锤头状核酶（Ｒｉｂｏｚｙｍｅ）（Ｒ４７、Ｒ２０８和Ｒ６８７）。为了提高核酶的切割效率，把３个核酶串联在一起形成三联的核酶（Ｒ４２６）。为使单个核酶之间不相互干扰，改变了茎区Ⅱ的碱基序列。核酸二级结构计算机模拟显示，这种改变非常成功。为了减少长的侧翼序列对Ｒ４２６的影响，将Ｒ４２６基因光隆到ｐＲＧ５２３质粒的ｃｉｓ－核酶之间，限制性内切酶线性化后，用Ｔ７ＲＮＡ聚合酶进行体外转录，得到具有短的侧翼序列的Ｒ４２６分子。转录和切割实验表明，Ｒ４２６两侧的ｃｉｓ－核酶的切割效率非常高，释放出的Ｒ４２６能够特异地切割转录和合成的靶序列。说明我们设计的三种核酶的“催化中心”能使３个单价核酶不相互干扰，各自独立发挥切割作用，也不影响其两端的ｃｉｓ－核酶的切割活性。这与实验设计的预期结果完全一致。; 张晓岚陈农安祁国荣陆长德; 关键词：家蚕核多角体病毒基因

碱基上的氨臂对T_4多核苷酸激酶催化的影响: 1995年; 寡聚核苷酸内部和５′末端含有的氨臂修饰胸苷酸，能够明显地影响Ｔ＿４多核苷酸激酶催化的［γ－￣（３２）Ｐ］ＡＴＰ的转移反应．其转移效率为未修饰寡聚核苷酸的５０％和２％．这种修饰的寡聚核苷酸对Ｔ＿４ＲＮＡ连接酶催化的反应没有影响．; 张晓岚陆长德祁国荣

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张晓岚