张搏
- 作品数：18 被引量：50H指数：4
- 供职机构：广西科学院更多>>
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- 相关领域：生物学化学工程石油与天然气工程更多>>
- 非均相催化剂两步法催化潲水油制备生物柴油被引量：4
- 2010年
- 对取自餐饮的潲水油进行一系列预处理,脱去其中的胶类、色素、水分等杂质,然后用自制的固体酸、固体碱催化剂经"两步法"工艺将其转化为生物柴油。结果发现,在预酯化反应中,催化剂A用量为6%、醇油摩尔比为12∶1,反应2.5 h后,潲水油的酸值由50 mg KOH.g-1降至2 mg KOH.g-1。通过正交实验得到碱催化酯交换反应最佳条件为:反应时间2 h、反应温度100℃、催化剂B用量6%、醇油摩尔比9∶1,在此条件下转化率达96.4%。表明所制备的固体酸、固体碱催化剂能有效将潲水油转化为生物柴油。
- 陶站华张搏
- 关键词：潲水油生物柴油固体酸催化剂固体碱催化剂
- 一种用于生物柴油生产的磁性固体酸催化剂制备方法
- 本发明公开了一种用于生物柴油生产的磁性固体酸催化剂的制备方法，所述固体酸催化剂是以氧化锆基Fe<Sub>3</Sub>O<Sub>4</Sub>/ZrO<Sub>2</Sub>复合物并对其进行磺酸基改性而成。制备方法为：...
- 张搏
- 文献传递
- 一种产脂肪酶工程菌及其制备脂肪酶催化剂和脂肪酸甲酯的方法
- 本发明公开了一种通过从自然界中筛选的粘质沙雷氏菌构建所得一株脂肪酶基因工程菌CCTCC M 2010152，并研究开发了利用该工程菌制备具有较高有机溶剂耐受性且催化活性高的固定化脂肪酶，以及该脂肪酶用于脂肪酸甲酯制备的方...
- 张搏朱绮霞黄日波
- 文献传递
- 短小芽孢杆菌HZbp脂肪酶基因的克隆表达被引量：1
- 2010年
- 以短小芽孢杆菌HZbp总DNA为模板以PCR的方式获得512 bp的脂肪酶基因,并在该基因的两端引入了EcoR1和Sal1的酶切位点,将该基因与大肠杆菌表达质粒pSE380连接,获得重组质粒pSE380-BPL。重组质粒转入大肠杆菌表达细胞株BL21,获得工程菌株BL21-BPL。序列分析显示所克隆的基因具有脂肪酶的保守G-X-S-X-G序列,SDS-PAGE电泳显示该脂脂肪酶的分子质量约为20 kDa。在LB培养基中,IPTG诱导浓度为1.0 mmol/L,33℃诱导培养10 h后,发酵液酶活达到8 U/mL。
- 张搏朱绮霞
- 关键词：脂肪酶短小芽孢杆菌克隆
- 酿酒酵母脂肪酶基因TGL3的克隆及其在毕赤酵母中的高效表达被引量：2
- 2010年
- 目的:克隆Saccharomy cescerevisiae脂肪酶基因,并实现其在Pichia pastoris中高效表达。方法:根据NCBIGenBank中已公布的Saccharomyces cerevisiae脂肪酶基因TGL3设计引物,以Saccharomyces cerevisiae总DNA为模板,PCR扩增目的片段,构建重组子pPIC9K-TGL3,转化到Pichia pastoris GS115。结果:扩增得到1929bp的基因片段,与GenBank中公布的序列氨基酸同源性达99.7%,编码的643个氨基酸中有脂肪酶的保守序列GXSXG,位于235～239位。重组子摇瓶发酵120h发酵液上清脂肪酶酶活达到60U/mL,酶学性质研究表明:该酶的最适作用温度为40℃,在25℃～40℃之间能保持60%以上酶活力。最适pH值为8.5,在pH6.5～9.0之间能保持50%以上的酶活力。除Al3+和Fe2+外,该酶不受Ca2+、Mg2+、Zn2+、Cu2+、Mn2+、Ni+、Sr2+等多种金属离子的影响。结论:发酵液上清脂肪酶酶活达到60U/mL,是原菌株的10倍,成功实现了该基因的高效表达。
- 陈英卢福芝曾丽娟朱绮霞张搏韦宇拓黄日波
- 关键词：酿酒酵母脂肪酶基因克隆毕赤酵母
- 固定化粘质沙雷氏菌脂肪酶催化制备脂肪酸甲酯被引量：1
- 2010年
- 将实验室构建的产粘质沙雷氏菌脂肪酶的基因工程菌于20 L发酵罐中发酵,并将分离提取获得的粗脂肪酶液用sol-gel包埋法和大孔吸附树脂吸附两种方法进行固定化,考察了醇油比、含水量、反应温度、反应时间、催化剂用量对生物柴油产率的影响。实验结果显示采用大孔树脂吸附法制备的固定化酶的催化效果优于sol-gel包埋法制备的固定化酶,在优化条件下,以大孔树脂吸附法制备的固定化酶可使生物柴油的单批转化率达到88%。
- 张搏朱绮霞黄日波
- 关键词：粘质沙雷氏菌脂肪酶基因工程菌固定化酶
- 响应面法优化醋酸钙不动杆菌菌株23的脂肪酶产酶条件被引量：6
- 2008年
- 采用响应面法对醋酸钙不动杆菌(Acinetobacter calcoaceticus)菌株23的发酵产脂肪酶培养基进行优化实验。实验首先考察该菌株产酶所需的最适碳源和氮源,然后用Plackett-Burman法设计实验确定影响产酶的主要影响因素,用最陡爬坡实验逼近最大响应区域,最后通过Box-Behnken方法进行二次回归分析得到最佳的产酶条件为:营养肉汤18.4%、蛋白胨9.18%、吐温800.52%、K2HPO40.2%,橄榄油1%,MgSO40.05%,CaCl20.05%,FeSO40.1%。在该优化条件下,发酵液的脂肪酶活力可以达到15.2U/ml,比优化前提高3倍。
- 张搏
- 关键词：脂肪酶醋酸钙不动杆菌响应面
- 利用冰核蛋白N末端结构域在大肠杆菌表面展示粘质沙雷氏菌脂肪酶被引量：4
- 2012年
- 【目的】利用细胞表面工程技术将活性脂肪酶展示于大肠杆菌细胞表面并对展示脂肪酶的酶学性质进行研究。【方法】将丁香假单胞菌冰核蛋白N末端结构域序列与粘质沙雷氏菌脂肪酶编码基因融合,构建成脂肪酶表面展示载体,并转化大肠杆菌BL21(DE3)。【结果】重组菌以终浓度0.05 mmol/L异丙基硫代-D-半乳糖苷(IPTG)、25°C条件下诱导培养,16 h后表面展示脂肪酶活力达到最大值1 852 U/g细胞干重。表面展示酶的最适pH为9.0,最适反应温度为40°C,表面展示酶热稳定性较游离酶有较大提高,在40°C孵育1 h后仍能保持90%以上的酶活力。【结论】以上结果表明细菌表面展示技术为脂肪酶固定提供了一个很有前景的替代方法。
- 陶站华张搏
- 关键词：脂肪酶粘质沙雷氏菌大肠杆菌
- 导入脂肪酶基因提高荧光假单胞菌26-2的产酶效率被引量：2
- 2009年
- 采用导入脂肪酶基因的方法对荧光假单胞菌(Pseudomonas fluorescence)26-2的产酶效率进行实验。实验以质粒ppic9k-lipA为模板,通过PCR的方式在26-2脂肪酶基因的两端引入BamH1和EcoR1的酶切位点,并将该基因与大肠杆菌荧光假单胞菌穿梭质粒pDSK519连接,获得重组质粒pDSK519-lipA,再将重组质粒转入荧光假单胞菌26-2,获得工程菌株P.f luorescence26-2-1。在相同的发酵条件下,工程菌株的发酵液酶活力比原始菌株的发酵液酶活力提高2倍,实现了荧光假单胞菌脂肪酶基因的同源性表达。
- 张搏王青艳
- 关键词：荧光假单胞菌脂肪酶基因
- 粘质沙雷氏菌脂肪酶基因的克隆表达和酶学性质的研究被引量：11
- 2010年
- 目的:克隆粘质沙雷氏菌脂肪酶基因(lipA)使其在大肠杆菌BL21(DE3)中实现高效表达,并对重组酶进行酶学性质研究。方法:以产脂肪酶粘质沙雷氏菌总DNA为模板,PCR扩增脂肪酶基因lipA,构建重组表达载体pET-lipA,并将其导入大肠杆菌进行诱导表达,对表达产物进行SDS-PAGE和酶学性质的测定。结果:经过优化培养条件,脂肪酶活力最高能达到104U/mL。重组脂肪酶的最适反应温度为40～45℃,最适pH为7.0～7.5,在50℃保温1h下仍能保持80%的酶活力,Ca2+、Sr2+、Mn2+和Mg2+对脂肪酶酶活有较强的激活作用,尤其是Ca2+使脂肪酶酶活提高了1倍多,而Ni2+、Fe2+、Fe3+、Cu2+、Zn2+和Al3+对酶活具有较强的抑制作用,尤其是Zn2+和Al3+使酶活力几乎完全丧失。该酶对一些有机溶剂有较好的耐受性,与50%甲醇混合24h,仍能保持84%的酶活力。结论:该脂肪酶具有较好的热稳定性和甲醇耐受力,作为生产生物柴油的催化剂具有很大的应用价值,为基因工程酶法生产生物柴油打下良好的基础。
- 朱绮霞陈英张搏黄日波
- 关键词：粘质沙雷氏菌脂肪酶克隆
