张国勇
- 作品数：8 被引量：4H指数：1
- 供职机构：温州医学院附属第一医院更多>>
- 发文基金：浙江省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- C57BL／6小鼠EAE模型的建立及Foxp3、CD4＋CD25＋调节性T细胞检测
- 2010年
- 目的以髓鞘少突胶质细胞糖蛋白细胞外免疫球蛋白样结构域（MOG驯）为抗原免疫C57BL／6小鼠，建立实验性自身免疫性脑脊髓炎（EAE）模型，并检测CIM＋CD25＋T细胞、Foxp3mRNA等指标的表达。方法采用分子克隆技术诱导表达MOGlgd-TrxA融合蛋白，纯化后以此融合蛋白为抗原于侧腹壁皮下多点注射免疫C57BL／6小鼠作为实验组（MOG组）；同时以硫氧还蛋白（TrxA）、豚鼠脊髓匀浆（GPSCH）、生理盐水免疫小鼠分别作为阴性、阳性及正常对照组。双盲法连续早晚观察30d，通过评估动物的临床神经功能、组织病理（HE染色和Kltiver．Barrera法髓鞘染色、免疫组化法）情况，评价模型的质量。流式细胞仪（FACS）检测小鼠脾脏中CD4＋CD25＋调节性T细胞；real—timePCR检测Foxp3mRNA的相对表达水平，并分析两者相关性。结果MOG组及GPSCH组小鼠均呈慢性非缓解型病程，两组在发病时问、达峰时间、临床神经功能评分等方面差异均无统计学意义（P〉0．05）。TrxA组及正常对照组无一动物发病。模型组（包括MOG组和GPSCH组）动物HE染色可见血管周围炎性细胞浸润，胶质结节形成，髓鞘染色可见斑片状髓鞘脱失，大脑、小脑、脑干和脊髓均有不同程度受累。免疫组化定性和半定量分析显示MOG组和GPSCH组病灶周围炎症浸润处AQP-4表达与TrxA组相比明显增高（P〈0．05）；MOG组CIM＋CD25＋T细胞占CIM＋T细胞比例为（4．71±1．61）％，GPSCH组为（1．44±0．65）％，均明显低于TrxA组和正常对照组（P〈0．01），且MOG组和GPSCH组之间的差异亦具有统计学意义（P〈0．01）。MOG组标准化Foxp3mRNA的表达量为2．26±1．97，GPSCH组为1．44±1．20，均低于TrxA组的8．58±3．34（P〈0．01）；但MOG组和GPSCH组间的差异无统计学意义（P〉0．05）。相关性分析显示，模型组小鼠CIM＋CD25＋调节性T细胞与roxp3mRNA表达水平
- 翁益云夏君慧鲍剑虹张国勇张旭
- 关键词：髓鞘少突胶质细胞糖蛋白水通道蛋白-4FOXP3CD4+CD25+调节性T细胞
- 视神经脊髓炎标志性抗体的发现及其意义被引量：1
- 2007年
- 视神经脊髓炎是一种选择性损伤视神经和脊髓的中枢神经系统自身免疫性脱髓鞘性疾病。其与多发性硬化在免疫病理、发病机制、临床表现、治疗和预后等方面均不尽相同。关于视神经脊髓炎是多发性硬化的一种亚型还是一种独立的疾病在学术上一直存在争议。最近在视神经脊髓炎患者血清中检测到一种标志性抗体,并发现其特异性靶点为水通道蛋白-4。这一重要研究进展将会对重新认识和进一步研究视神经脊髓炎以及对其临床诊断和治疗产生重要影响。
- 张国勇张旭
- 关键词：视神经脊髓炎抗体水通道蛋白-4多发性硬化
- 实验性变态反应性脑脊髓炎AQP-4、CD4^+CD25^+调节性T细胞研究
- 2010年
- 目的:以髓鞘少突胶质细胞糖蛋白细胞外免疫球蛋白样结构域(MOGIgd)为抗原免疫C57BL/6小鼠,建立EAE模型,并检测AQP-4、CD4+CD25+T细胞的表达水平。方法:①采用分子克隆技术诱导表达MOGIgd-TrxA融合蛋白,纯化后以此融合蛋白为抗原于侧腹壁皮下多点注射免疫C57BL/6小鼠作为实验组(MOG组);同时以硫氧还蛋白(TrxA)、豚鼠脊髓匀浆(GPSCH)免疫小鼠分别作为阴性、阳性组。评估动物的临床神经功能、组织病理情况,评价模型的质量。②免疫组化法、荧光定量PCR技术测定AQP-4表达水平;经流式细胞仪(FACS)检测小鼠脾脏中CD4+CD25+调节性T细胞。结果:①MOG组及GP-SCH组小鼠均呈慢性非缓解型病程,两组在发病时间、达峰时间、临床神经功能评分等方面差异无统计学意义(P>0.05)。TrxA组无一动物发病。模型组(包括MOG组和GPSCH组)动物HE染色可见血管周围炎性细胞浸润,胶质结节形成,髓鞘染色可见斑片状髓鞘脱失,大脑、小脑、脑干和脊髓均有不同程度受累。免疫组化定性和半定量分析显示MOG组和GPSCH组病灶周围炎症浸润处AQP-4表达与TrxA组相比明显增高(P<0.05);②MOG组CD4+CD25+T细胞占CD4+T细胞比例为(4.71±1.61)%,GPSCH组为(1.44±0.65)%,均明显低于TrxA组(P<0.01),且MOG组和GPSCH组之间的差异亦具有统计学意义(P<0.01)。结论:用MOGIgd免疫C57BL/6小鼠诱导EAE模型稳定,发病率高,为今后进一步研究MS的免疫发病机制和采取有效治疗措施打下基础。EAE模型动物AQP-4的表达量与炎症浸润的严重程度相关。
- 翁益云夏君慧叶好好张国勇张旭
- 关键词：实验性变态反应性脑脊髓炎MOGAQP-4CD4+CD25+调节性T细胞
- 实验性变态反应性脑脊髓炎AQP-4、CD4+CD25+调节性T细胞研究
- 目的 以髓鞘少突胶质细胞糖蛋白细胞外免疫球蛋白样结构域(MOGIgd)为抗原免疫C57BL/6小鼠,建立EAE模型,并检测AQP-4、CD4+CD25+T细胞的表达水平；方法 ①采用分子克隆技术诱导表达MOGIgd-Tr...
- 翁益云张国勇夏君慧叶好好张旭
- MOG-TrxA诱导C57BL/6(H-2b)小鼠EAE动物模型及其中枢神经系统AQP-4表达的研究
- 目的:①探索利用基因工程表达的MOG-TrxA诱导C57BL/6(H-2b)小鼠EAE动物模型的方法;并进一步探讨小鼠EAE动物模型临床评分与炎症浸润和脱髓鞘的关系。②检测EAE动物模型中枢神经系统病灶周围AQP-4的免...
- 张旭夏君慧张国勇翁益云
- 文献传递
- C57BL/6小鼠EAE模型建立及Foxp3、CD4+CD25+调节性T细胞检测
- 目的 以髓鞘少突胶质细胞糖蛋白细胞外免疫球蛋白样结构域(MOGIgd)为抗原免疫C57BL/6小鼠,建立EAE模型,并检测水通道蛋白-4(AQP-4)、CD4+CD25+T细胞、Foxp3 mRNA等指标的表达；方法 ①...
- 翁益云夏君慧鲍剑虹张国勇张旭
- β-干扰素治疗继发进展型多发性硬化临床疗效的荟萃分析被引量：3
- 2008年
- 目的系统评价β-干扰素（interferon-β,IFN-β）维持治疗继发进展型多发性硬化的临床疗效。方法采用Cochrane系统评价方法,通过电子检索MEDLINE、EMbas、CBMdisc、Cochrane LibraryI、SI和美国临床试验登记中心等的数据库文献。评价纳入文献的方法学质量后,采用RevMan 4.2.10软件对提取的数据进行分析。结果共纳入4个RCTs研究。IFN-β治疗组与对照组比较,EDSS评分显示的2年疾病进展率差异有统计学意义（P=0.02〈0.05,OR=0.82,95%CI=0.70-0.97）,EDSS评分显示的3年疾病进展率差异无统计学意义（P=0.29〉0.05,OR=0.85,95%CI=0.62-1.15）,平均年复发率差异有统计学意义（P〈0.00001,OR=0.48,95%CI=0.41-0.57）。结论IFN-β维持治疗继发进展型多发性硬化能降低EDSS评分显示的2年疾病进展率,不能降低EDSS评分显示的3年疾病进展率,可明显降低平均年复发率。
- 张国勇蒋宁翁益云张旭
- 关键词：干扰素Β
- MOG诱导的小鼠EAE模型的建立及Foxp3、CD4+CD25+调节性T细胞检测
- 目的:以髓鞘少突胶质细胞糖蛋白细胞外免疫球蛋白样结构域(MOG)为抗原免疫C57BL/6小鼠,建立人类疾病多发性硬化(MS)的动物模型—实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE);并检测EAE小鼠Foxp3的表达及CD4CD25...
- 张旭夏君慧翁益云张国勇
- 文献传递
