帅勇
- 作品数：4 被引量：18H指数：2
- 供职机构：湖南师范大学生命科学学院蛋白质化学与发育生物学教育部重点实验室更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金教育部留学回国人员科研启动基金湖南省教育厅科研基金更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 免疫共沉淀结合质谱分析筛选HMGB4相互作用蛋白被引量：9
- 2012年
- 为揭示HMGB4在精子发生过程中所起的作用,采用免疫共沉淀技术富集NTera-2细胞中的HMGB4结合蛋白.SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)对免疫沉淀复合物进行分离,从胶中切取HMGB4结合蛋白条带,胶内酶解后进行电喷雾串联质谱(LC-ESI-MS/MS)分析,得到相应的肽序列标签(peptide sequence tags,PST).通过搜索数据库在NTera-2细胞系中鉴定到5个HMGB4相互作用蛋白,分别是Pdha1、Keratin 6B、Keratin 5、Actb Actin cytoplasmic 1、RPL18.为进一步研究HMGB4在精子发生机制中的生理功能提供了基础.
- 王成赵晓蒙帅勇李晓峰刘喜枝张晓婷周畅
- 关键词：免疫共沉淀相互作用蛋白
- 人类睾丸特异表达新基因HMGB4的分离鉴定和初步功能分析
- 本文运用数字差异显示方法克隆了一个新的人类睾丸特异性表达基因HMGB4。序列分析表明,HMGB4是HMGB家族的一个新成员,与其他三个HMGB家族成员不同的是HMGB4缺乏其家族共同具有的酸性尾部。Northern bl...
- 帅勇
- 关键词：功能分析睾丸发育精子发生
- 文献传递
- 重叠延伸PCR法构建小鼠Sumf1基因的定点突变真核表达载体被引量：8
- 2009年
- 前期通过染色质免疫沉淀技术（chromatin immunoprecipitation assay，CHIP）筛选出了转录因子activator protein．2 alpha（AP-2α）的靶基因Sumf1．采用重叠延伸PCR定点诱变技术，对AP．2α在Sumf1内含子片段上的两个结合位点的碱基进行定点突变，并构建定点突变表达载体．DNA测序表明，Sumf1内含子片段103—111bp，411～419bp两处的碱基已分别由GCCGTCAGG突变为GAAGTCCTG，由GCCTCTAGG突变为GGATCTCTG，成功实现定点诱变，为进一步研究AP-2α对基因Sumf1的表达调控奠定了基础．
- 帅勇胡兴旺易朵王成赵晓蒙周畅
- 关键词：重叠延伸PCR定点诱变
- 高迁移率族蛋白HMGB4的表达及多克隆抗体的制备被引量：1
- 2011年
- 高迁移率族蛋白B4(high mobility group box,HMGB4)是HMGB家族的新成员,研究表明其可能在睾丸发育和精子发生等方面发挥重要作用.为进一步研究HMGB4的结构、功能及与其相互作用的蛋白而进行his-HMGB4融合蛋白表达载体的构建.序列鉴定分析后,用该重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3),异丙基β-D硫代半乳糖苷(IPTG)诱导产生his-HMGB4融合蛋白,继而纯化获得相对分子质量约25 000的融合蛋白.将此融合蛋白免疫新西兰兔,经Western印迹和ELISA检测,制备的抗体可特异性识别HMGB4蛋白,其效价达1∶20 000.获得的高效价、高特异性的兔抗HMGB4蛋白多克隆抗体为下阶段研究HMGB4的功能奠定了基础.
- 易朵王成帅勇肖湘文赵晓蒙周畅
- 关键词：原核表达纯化多克隆抗体
