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奶牛隐性乳房炎金黄色葡萄球菌分离鉴定及其肠毒素分析: [目的]：　　了解贵阳地区奶牛隐性乳房炎的感染情况及其主要菌群，探讨牛乳中主要病原菌金黄色葡萄球菌的PCR快速检测方法，然后对其进行肠毒素的分析，为保障牛乳的食用安全提供检测技术支持。　　[方法]：　　采用C.M.T检测...; 寨鸿瑞; 关键词：奶牛隐性乳房炎金黄色葡萄球菌肠毒素; 文献传递

鸭肠炎病毒核衣壳蛋白基因的克隆与原核表达被引量：5: 2008年; 目的：对DEV贵州分离株NP基因进行克隆与序列分析，构建NP基因的原核表达载体，分析NP基因原核表达产物的免疫反应性。方法：根据GeneBank登载的DENNP基因序列设计引物，对DEV贵州分离株进行PCR扩增、克隆和测序，采用生物信息学软件程序分析NP蛋白的氨基酸序列；将该基因插入到原核表达载体pET32a上进行原核表达和Western Blotting分析。结果：DEV贵州分离株NP基因全长759bp，核苷酸序列与参考株一致；NP基因编码蛋白相对分子量为27．1kDa，理论pI为5．89，肽链上第10．15、88．92和182．186区段及其附近区域可能是B细胞表位优势区；构建得到的重组质粒pET32-NP可表达出一条大小约为48kDa的蛋白，且能与兔抗DEN-IgG发生特异性结合。结论：NP基因在DEN基因组中高度保守，其原核表达产物具有良好的免疫反应性。; 代淑燕寨鸿瑞文明刘忠伟周碧君; 关键词：鸭肠炎病毒核衣壳蛋白基因原核表达

奶牛隐性乳房炎病原菌的分离鉴定及药敏试验被引量：10: 2008年; 为了解贵阳市某乳业有限公司奶牛场隐性乳房炎流行情况及其主要病原菌,采用CMT方法检出隐性乳房炎乳样后,对阳性乳样进行细菌分离与鉴定,同时对其主要病原菌进行了体外药敏试验。结果表明,该公司奶牛场隐性乳房炎的感染率为40%,主要病原菌为葡萄球菌属和链球菌属细菌,其敏感的抗菌药物有先锋V霉素、利福平、丙氟哌酸、氟哌酸、新霉素、卡那霉素、庆大霉素等,经临床用药观察,有效地控制了该公司奶牛场隐性乳房炎。; 寨鸿瑞田甜王开功周碧君文明; 关键词：奶牛隐性乳房炎药敏试验

牛乳腺β-酪蛋白基因的克隆及其表达载体的构建被引量：2: 2009年; 利用高保真PCR法,分别扩增了牛乳腺β-酪蛋白基因的1.8和1.1 kb的5′和3′调控序列,将其分别克隆入TA载体。经PCR验证后测序,用NCBI Blast软件分析表明其克隆片断与奶牛β-酪蛋白基因相应区域同源性分别为97.0%和99.0%,表明成功克隆了酪蛋白基因5′和3′的调控区。然后利用DNA重组技术依次亚克隆入改造过的真核表达载体pcD-NA3(切除CMV启动子),构建成牛乳腺特异表达载体。获得的重组载体经限制性内切酶酶切鉴定,测序验证等表明,成功构建了牛乳腺特异表达载体。; 田甜寨鸿瑞刘若余王兆龙; 关键词：Β-酪蛋白基因克隆 CDNA

表达人溶菌酶基因牛乳腺特异表达载体的构建: 2009年; 利用高保真PCR法,分别扩增了牛乳腺酪蛋白基因的1.8kb和1.1kb的5’和3’调控序列,克隆入TA载体。经测序鉴定后,利用DNA重组技术依次亚克隆入改造过的真核表达载体pcDNA3(切除CMV启动子),并插入人溶菌酶基因(hLYZ)的cD-NA,构建成牛乳腺特异表达载体。获得的重组载体经限制性内切酶酶切鉴定、PCR验证等表明,成功克隆了酪蛋白基因5’和3’的调控区,并成功构建了表达人溶菌酶基因的牛乳腺特异表达载体。; 田甜寨鸿瑞刘若余; 关键词：人溶菌酶克隆 CDNA

贵阳市奶牛隐性乳房炎的调查与病原鉴定被引量：1: 2009年; 为了解贵阳地区奶牛场隐性乳房炎情况,试验采用C.M.T方法筛选隐性乳房炎乳样后,选取部分阳性乳样进行细菌分离与生化鉴定,并针对23S rRNA设计引物对金黄色葡萄球菌分离物进行分子鉴定。结果表明,贵阳地区奶牛场隐性乳房炎的检出率为40%(680/1700),从90份阳性乳样中分离出细菌188株,主要有金黄色葡萄球菌、无乳链球菌、乳房链球菌、表皮葡萄球菌、停乳链球菌和大肠杆菌等,分别占分离菌的32.90%、12.23%、10.11%、8.51%、7.98%和7.44%;针对金黄色葡萄球菌建立的PCR鉴定方法具有较好的特异性和灵敏性,与传统生化鉴定结果的符合率达到90.32%。; 寨鸿瑞田甜王开功周碧君文明; 关键词：奶牛隐性乳房炎细菌 PCR

奶牛β-酪蛋白基因的克隆及序列分析被引量：4: 2009年; 利用高保真PCR技术扩增了黑白花奶牛β-酪蛋白基因(CSN2)5’和3’调控成分,纯化PCR产物与pMD 19-TVector亚克隆后酶切鉴定和测序。结果表明:克隆片断与奶牛β-酪蛋白基因相应区域同源性分别为97.0%和99.0%,并且包含有大部分的CSN2表达核心调控序列和多个转录、翻译因子的结合位点,获得了黑白花奶牛β-酪蛋白基因调控区的克隆。为构建乳腺特异表达载体,指导外源基因在转基因动物乳腺内高效表达奠定了基础。; 田甜寨鸿瑞陈玉珍刘若余; 关键词：奶牛 Β-酪蛋白调控区

奶牛乳房炎研究进展被引量：15: 2009年; 奶牛乳房炎是奶牛场的常发病和难以防治的疾病,危害奶牛业的发展,是造成奶牛业经济损失的主要因素。现就奶牛乳房炎的危害、类型、病因、诊断、防治等进行综述,为奶牛乳房炎的防治提供一定的参考依据。; 寨鸿瑞田甜朱伟王开功周碧君文明; 关键词：奶牛乳房炎病原菌

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寨鸿瑞