宫锋
- 作品数:130 被引量:191H指数:8
- 供职机构:军事医学科学院野战输血研究所更多>>
- 发文基金:国家重点基础研究发展计划国家自然科学基金国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学农业科学轻工技术与工程更多>>
- α-半乳糖苷酶的单克隆抗体及其应用
- 本发明公开了一种α-半乳糖苷酶的单克隆抗体及其应用。本发明提供了保藏号为CGMCC No.8794的小鼠杂交瘤细胞(mus musculus hybridoma)B7G11。还提供了由保藏号为CGMCC No.8794的...
- 宫锋高红伟李素波季守平檀英霞宋锦文张士坤贠志敏张雪王颖丽
- 文献传递
- 细胞因子在放射医学及辐射防护中的应用被引量:7
- 1994年
- 细胞因子在放射医学及辐射防护中的应用贺福初,宫锋细胞团子的研究已持续十几年。近年来d于分于生物学尤其是基因重组技术的应用,3基础和临床方面的研究取得了长足的进展。E前一般将细胞因子分成三类:(1)造血生长B子:如GM-CSF(sranulocvte-...
- 贺福初宫锋
- 关键词:细胞因子辐射防护
- 一种抑制人异种器官移植中免疫排斥反应的方法
- 本发明公开了一种抑制人异种器官移植中免疫排斥反应的方法。本发明所提供的抑制人异种器官移植中免疫排斥反应的方法是将人α1,3-半乳糖苷酶基因,人α1,2岩藻糖转移酶基因和人A20基因导入猪体细胞,得到Gal-α1,3-Ga...
- 宫锋贾延军鲍国强由英王颖丽田曙光
- 文献传递
- mPEG修饰红细胞解决AIHA患者配血困难的体外研究被引量:5
- 2006年
- 目的探讨mPEG-SPA修饰对红细胞结构功能的影响,以及修饰O型红细胞解决AI HA患者疑难配血的可能性。方法对比2.0mmol/L mPEG-SPA修饰前后RBC保存期内的结构和功能指标,采用抗球蛋白法对比修饰前后的配血结果,采用流式细胞术观察mPEG-SPA修饰对自身抗体的遮蔽效果。结果保存期内2.0mmol/LmPEG-SPA修饰RBC对其结构功能无影响,配血结果表明2.0mmol/L mPEG-SPA修饰的RBC符合临床用血要求,流式检测结果显示mPEG-SPA修饰对自身抗体有很好的遮蔽效果。结论mPEG修饰RBC有可能为解决AI HA患者配血困难开辟一条实用有效途径。
- 徐华齐珺邢荷香檀英霞宫锋章扬培
- 关键词:配血
- 制备脆弱拟杆菌来源的新型α-半乳糖苷酶单抗用于检测通用型红细胞中的微量残留酶被引量:1
- 2015年
- 目的建立一种检测微量脆弱拟杆菌(Bacteroides fragilis)来源的α-半乳糖苷酶的方法用于测定酶解转变的通用型红细胞上的残留酶。方法用脆弱拟杆菌来源的基因重组α-半乳糖苷酶(纯度大于90%)免疫BALB/c小鼠,制备单抗;用稳定分泌抗体的杂交瘤细胞株制备腹水单抗,再经HiT rap rP rotein A柱纯化获得高纯度的抗体;间接ELISA法测定单抗效价,Western印迹法评价单抗特异性。联合纯化后的单抗和兔多抗采用间接ELISA法检测酶解法制备的通用型红细胞和洗涤液中的残留酶量。结果获得了高效价高纯度的单抗,Western印迹实验显示该抗体可特异性地与新型α-半乳糖苷酶结合;间接ELISA法检测微量α-半乳糖苷酶的下限为1 ng/ml,红细胞按1∶4的体积比经4次洗涤后,其残留酶量<10 ng/ml。结论所建立的在血型转变过程中检测微量残留α-半乳糖苷酶的方法,可用于酶解法制备的通用型红细胞的安全性评价。
- 李素波贠志敏高红伟张雪檀英霞张士坤季守平宫锋
- 关键词:Α-半乳糖苷酶单克隆抗体血型转变
- 重组α-半乳糖苷酶工程菌菌种稳定性鉴定被引量:2
- 2004年
- 高红伟徐莉娟田曙光李素波王颖丽宫锋章扬培
- 关键词:Α-半乳糖苷酶异种抗原遗传性疾病异种移植酶类
- 人工血小板PLGA-PEG-RGD在制备静脉用全身性纳米止血药中的应用
- 本发明公开了一种用于预防和治疗全身性出血,包括创伤失血、脏器内出血、深部出血及手术出血的静脉用纳米止血药PLGA-PEG-RGD及其制备工艺。实验证明,本发明的PLGA-PEG纳米颗粒负载RGD三肽的人工血小板PLGA-...
- 檀英霞万一千宫锋季守平李素波王磊磊高红伟宋锦文张士坤王颖丽鲍国强
- 文献传递
- 重组人α-半乳糖苷酶A在巴氏毕赤酵母中的表达及鉴定被引量:1
- 2006年
- 目的:克隆人α-半乳糖苷酶A(α-GalA)cDNA,并在毕赤酵母中表达重组的人α-GalA。方法:利用RT-PCR方法从人肝癌细胞中克隆人α-半乳糖苷酶A cDNA并构建到可用甲醇诱导的分泌型巴氏毕赤酵母表达载体pPICZαA中。将重组质粒导入毕赤酵母并用Ze ion抗生素筛选转化细胞。在甲醇诱导后,利用SDS-PAGE、W estern印迹及酶活测定方法在酵母上清中鉴定重组的人α-GalA。结果:获得人-αGalA cDNA,构建酵母表达质粒pHGCZɑA,将重组表达载体导入到酵母细胞,并在上清中检测到人α-GalA蛋白。结论:获得了人α-GalA cDNA及具有生物活性的重组人α-GalA,为临床应用于法布莱氏病的治疗奠定了基础。。
- 徐莉娟高红伟季守平宫锋章扬培
- 关键词:毕赤酵母
- 血型转变被引量:6
- 2000年
- α_半乳糖苷酶是实现B→O血型转变、制备通用型血的关键工具酶。本文报道利用反转录PCR方法从中国海南兴隆咖啡豆中克隆α_半乳糖苷酶cDNA ,插入嗜甲基酵母 pichapastoris表达载体 pPIC9K中 ,转化P .pas torisGS1 1 5 ,筛选高表达重组菌株。经甲醇诱导表达 7d后 ,发酵液总蛋白分泌量约 1 .2mg/mL ,SDS_PAGE呈现约41kD特异表达带 ,与专一性底物对_硝基_苯基_α_D_吡喃半乳糖苷反应证明 ,表达产物具有α_半乳糖苷酶活性 ,最高达到 1 8U/mL。初步实验表明 ,表达的α_半乳糖苷可酶解B型红细胞 ,成功实现B→O血型转变。本文同时综述了国外有关使用mPEG遮蔽红胞表面抗原、制备通用型血液研究的进展 ,以及我们在此领域的研究工作。
- 章扬培杨军季守平宫锋任会明刘泽澎
- 关键词:血型转变Α-半乳糖苷酶甲氧基聚乙二醇
- α-半乳糖苷酶活性测定方法的研究被引量:11
- 2006年
- 目的:应用分光光度法建立一种简便、准确、灵敏、稳定的重组α-半乳糖苷酶(AGA)活性检测方法。方法:利用紫外-可见分光光度计,根据产物生成量计算所测标本的酶活性。结果:该方法的批内变异系数为2.63%,批间变异系数为4.42%,均〈5%;在所检测该酶质量浓度范围(0.3~2.5)μg/ml)内线性关系良好;每组的平均回收率均在95%~105%之间。结论:与已经建立的测活方法相比较,该方法具有无需酶的标准品,结果可靠、误差小、稳定性好、操作简单,适合实验室及工业化生产应用的优点。
- 高红伟宫锋王璇琳徐莉娟由英王颖丽田曙光章扬培
- 关键词:Α-半乳糖苷酶活性测定光谱分析