宋香
- 作品数：8 被引量：40H指数：3
- 供职机构：江南大学生物工程学院工业生物技术教育部重点实验室更多>>
- 相关领域：轻工技术与工程化学工程生物学更多>>
- 谷氨酸棒杆菌S_(9114)中谷氨酸脱氢酶的初步研究被引量：2
- 2003年
- 本研究以谷氨酸生产菌种S9114 为材料 ,对GDH的辅酶专一性、最适温度、最适pH和动力学参数进行了研究 ,结果发现谷氨酸生产菌S9114 细胞内含有两种GDH ,其GDH不仅能以NADPH为辅酶 ,而且能以NADH为辅酶 ,其Km值分别为 12 .4mmol/L和 1.5 8× 10 -3 mmol L ,Vmax分别为2 .4 8μmol min .ml和 5 .2 5 μmol min .ml,其最适反应温度为 4 2℃和 82℃ ,最适反应pH分别为 7.5和8.0 ,并对热比较稳定。经DEAE柱层析分析也表明谷氨酸生产菌S9114 细胞内同时存在两种GDH。
- 王燕杨平平宋香段作营毛忠贵
- 关键词：谷氨酸生产菌谷氨酸脱氢酶
- 谷氨酸棒杆菌S_(9114)中谷氨酸脱氢酶破碎条件的研究被引量：2
- 2004年
- 为了研究谷氨酸棒杆菌S9114中的谷氨酸脱氢酶的特性,对细胞破碎条件对其酶活性的影响进行了研究。结果发现不同破碎条件对谷氨酸生产菌S9114细胞内谷氨酸脱氢酶的释放量不同。利用超声波对S9114细胞进行破碎时,获得GDH较好破碎效果的条件是工作时间与暂停时间比为1∶4,破壁工作时间为10min。而利用Frenchpressurecellpress进行了细胞破碎时,破碎条件为18,000Pa破碎两次。
- 王燕杨平平宋香段作营毛忠贵
- 关键词：谷氨酸棒杆菌谷氨酸脱氢酶酶活性超声波
- 稀土元素对谷氨酸棒杆菌生长及酶活性的影响被引量：11
- 2004年
- 研究了单一稀土氯化亚铈(CeCl3)对谷氨酸棒杆菌的生长及谷氨酸脱氢酶(GDH)和乳酸脱氢酶(LDH)酶活的影响.结果表明:稀土元素在低剂量下能促进谷氨酸棒杆菌的生长;达到一定剂量会抑制菌体的生长;对酶活性的影响也是在低剂量下激活,在高剂量下抑制.
- 宋香王燕段作营毛忠贵
- 关键词：稀土元素谷氨酸棒杆菌谷氨酸脱氢酶乳酸脱氢酶
- 稀土元素对谷氨酸发酵产酸及其谷氨酸脱氢酶的影响被引量：15
- 2004年
- 以目前我国谷氨酸发酵广泛使用的谷氨酸棒杆菌S9114 为实验菌株 ,研究了稀土元素对谷氨酸发酵产酸及其谷氨酸脱氢酶的影响。结果表明LaCl3、CeCl3和NdCl3浓度分别为 0 72 0、0 0 71和 0 0 0 7mmol/L时 ,促使谷氨酸发酵产酸水平提高 6%～ 8% ,对菌体的GDH NADPH的酶活性有显著的激活作用。实验还表明 ,稀土元素对纯化GDH
- 王燕杨平平宋香鄢贵龙段作营毛忠贵
- 关键词：谷氨酸脱氢酶产酸GDH谷氨酸发酵谷氨酸棒杆菌NADPH
- 谷氨酸生产菌S_(9114)中依赖于NADPH谷氨酸脱氢酶的纯化及性质被引量：3
- 2003年
- 利用DEAE 纤维素离交柱层析、疏水柱层析和凝胶过滤层析等从谷氨酸棒杆菌S9114 中分离纯化出依赖于NADPH的谷氨酸脱氢酶 (GOH NADPH )。经HPLC测定 ,该酶的分子量为 188ku ;经SDS -PAGE电泳测得该酶的亚基分子量为 3 2ku。提示该谷氨酸脱氢酶由 6个亚基组成。该酶对NADPH具有高度专一性 ,在pH 7 5、3 7℃下 ,以α 酮戊二酸、NH4Cl和NADPH为底物时的米氏常数Km 分别为 9 2 2mmol/L、5 2 7mmol/L和 2 3 1× 10 -3mmol/L。最适反应pH为 7 5 ,最适反应温度为 42℃ ,并对热比较稳定。此外 ,KCl对GDH NADPH的活性具有激活作用。
- 王燕宋香杨平平段作营毛忠贵
- 关键词：谷氨酸生产菌谷氨酸脱氢酶NADPH谷氨酸棒杆菌发酵生产
- 氯化亚铈对谷氨酸棒杆菌S9114生长和几种脱氢酶酶活性的影响被引量：2
- 2004年
- 为了解单一稀土氯化亚铈(CeCl3)对谷氨酸棒杆菌的生物效应,研究了其对谷氨酸棒杆菌S9114的生长及谷氨酸脱氢酶(GDH)和乳酸脱氢酶(LDH)酶活的影响。结果表明,CeCl3在低剂量下促进S9114的生长,并显著激活其酶的活性;当CeCl3达到一定剂量时,开始抑制菌体的生长,并对其酶的活性产生抑制作用。
- 宋香王燕段作营毛忠贵
- 关键词：谷氨酸棒杆菌生物效应谷氨酸脱氢酶乳酸脱氢酶酶活稀土元素
- 谷氨酸生产菌S_(9114)中谷氨酸脱氢酶分离纯化条件的初步研究被引量：3
- 2004年
- ;为获得谷氨酸脱氢酶(g1utamatedehydrogenase,GDH)分离纯化的较好效果,文章对Frenchpres surecellpress的菌体破碎条件和DEAE-纤素柱分离条件进行了初研究。结果表明:细胞破碎的较好条件为Frenchpressurecellpress18000pa破碎两次;DEAE-纤维素柱层析GDH的较好条件为柱洗脱线性梯度盐浓度范围为0.2～0.6mo1/L,上样量为5～8mL,柱流速为2～3mL/min。
- 王燕杨平平宋香段作营毛忠贵
- 关键词：谷氨酸脱氢酶谷氨酸棒杆菌
- 谷氨酸生产菌S^(9114)中的谷氨酸脱氢酶的研究被引量：8
- 2003年
- 谷氨酸脱氢酶 (GDH)是谷氨酸生物合成的关键酶 ,谷氨酸棒杆菌S91 1 4是目前我国味精工业应用最广泛的生产菌种 ,其谷氨酸脱氢酶的研究尚未见报道。分离纯化该菌中的谷氨酸脱氢酶 ,研究其辅酶组成 ,对揭示谷氨酸脱氢酶的分子结构和性质 ,提高谷氨酸产率很有必要。将培养至对数期中期的细胞离心收集并用含适量DTT、ED TA的Tris_HCl缓冲液 (pH 7 5 )洗涤 ,用Frenchpressurecellpress破碎 ,离心去除菌体碎片得无细胞抽提液。然后使用 KTA_10 0快速纯化系统经DEAE_纤维素柱、疏水柱 (HIC)、G_2 0 0凝胶过滤柱层析得到纯化大约 70倍的以NAD PH为辅酶的GDH和部分纯化的以NADH辅酶的GDH。这两个酶分别对NADPH、NADH高度专一 ,不能相互代替。经HPLC和SDS_PAGE测得前一种酶的分子量和亚基分子量分别为 188kD和 32kD ,表明该酶为具有相同亚基的六聚体。酶活性测定使用HITACHIU_30 0 0分光光度计利用NAD(P)H在 340nm氧化的初速度进行。蛋白质含量测定利用Bradford方法进行 ,并以牛血清白蛋白为标准蛋白。纯化结果表明S91 1 4中确实存在两种GDH ,其中以NADH为辅酶的GDH尚未见报道。和某些具有两种GDH的微生物一样 ,S91 1 4可能也是以NADPH为辅酶的GDH参与谷氨酸的合成代谢 ,以NADH为辅酶的GDH参与谷氨酸的分解代谢。
- 王燕宋香杨平平段作营毛忠贵
- 关键词：谷氨酸脱氢酶谷氨酸棒杆菌NADHNADPH生产菌
