段作营
- 作品数：117 被引量：646H指数：15
- 供职机构：江南大学生物工程学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：轻工技术与工程生物学化学工程医药卫生更多>>
- 海菏糖的研究进展被引量：1
- 2002年
- 本文介绍了海藻糖的结构、性质、综述了其在生产、分析及应用方面的研究进展。
- 李永红段作营等
- 关键词：海藻糖低聚糖
- 一种简便的ε-聚赖氨酸产生菌的筛选方法被引量：15
- 2006年
- 目的:建立一种简便、灵敏的ε-聚赖氨酸(-εPL)产生菌的筛选方法。方法:利用产正电分泌物的菌株和美蓝之间的静电作用而形成独特的透明圈,从而灵敏地筛选得到产正电分泌物的菌株;利用Dra-gendorff试剂与生物碱特有的颜色反应,从菌株中筛选,得到3株生物碱产生菌。结果:对产生物碱的菌株发酵液进行-εPL含量分析,确定1株-εPL高产菌Z-18。结论:经鉴定Z-18为白色链霉菌。
- 张超张东荣贺魏段作营毛忠贵
- 关键词：菌株筛选Ε-聚赖氨酸白色链霉菌
- 丙丁梭菌/酿酒酵母混合培养耦联乙酸外添强化丙酮合成─侧重LCA的ABE发酵
- 2015年
- 提出梭菌/酵母混合培养耦联乙酸外添体系强化丙酮合成的ABE发酵新策略,可以同时强化丁醇特别是丙酮的合成。与对照组相比,外添化学合成乙酸时,丁醇、丙酮质量浓度和丙酮/丁醇质量比分别达到13.91、8.27 g/L和0.59,增幅分别为19.6%、41.1%和18.0%;外添廉价的乙酸发酵上清液时,相应的发酵指标达到14.23、8.55 g/L和0.60,增幅分别为22.4%、46.0%和20.0%,发酵原料成本降低、丙酮发酵生产的可行性提高。结果表明,该发酵策略可刺激有利于梭菌生存和丁醇合成的4种氨基酸的分泌;可以在保证丁醇正常合成的前提下,适度抑制NADH再生、降低细胞能量周转、强化丙酮生物合成,进而显著改善了ABE发酵性能。
- 陈锐盖来兵罗洪镇张敬书赵艳丽段作营史仲平
- 关键词：丙酮乙酸NADH
- Gluconobacter oxydans WD膜结合山梨醇脱氢酶基因在E.coli中的克隆表达
- 2014年
- 本研究构建了四株含有氧化葡萄糖酸杆菌山梨醇脱氢酶基因的重组大肠杆菌,并初步探究SldB和SldA亚基在山梨醇脱氢酶转化甘油反应中的作用。将pET28a、pETduet与PCR扩增的目的基因连接,构建单启动子调控重组质粒pET28a-sldB、pET28a-sldA、pET28a-sldBA和双启动子调控重组质粒pETduet-sldB'-sldA'。只有含pET28a-sldBA和pETduet-sldB'-sldA'的重组菌具有转化甘油的活性,表明G.oxydans WD的山梨醇脱氢酶催化甘油脱氢需要SldB和SldA亚基的共同作用。串联基因sldBA的蛋白表达结果与双启动子控制sldB和sldA基因蛋白表达结果基本相同,表明位于sldB基因末端的sldA的RBS序列可被E.coli C43的核糖体识别。
- 苏帅段作营李华钟
- 关键词：克隆氧化葡萄糖酸杆菌
- 海栖热袍菌葡萄糖异构酶基因xylA的克隆、表达及酶学性质被引量：1
- 2008年
- 海栖热袍菌（Thermotoga maritima）是嗜极端高温的厌氧细菌，其产生的葡萄糖异构酶由于其出色的耐热性有着潜在的工业应用价值。由于海栖热袍菌苛刻的培养条件导致其葡萄糖异构酶产量较低。通过PCR方法克隆编码zmaritimaMSB8葡萄糖异构酶基因xylA，构建重组质粒pHsh—xylA，转入EscherichiacoliJMl09，通过热激诱导表达。通过热处理和离子交换层析纯化两步得到电泳纯的酶制品，纯化倍数和回收率分别为8．02和49．02。对酶学性质研究表明，该重组酶为金属离子激活性酶，Mg^2＋，Co^2＋对相对酶活有很强的激活作用，其最适pH为7．0，最适反应温度为95℃，且在pH6-8之间有着较好的稳定性，在95℃下半衰期长达5h以上。以葡萄糖为底物时的表观Km和Kmax、分别为105mmol／L和45．2mol／min·mg。
- 王一帆裴建军邵蔚蓝段作营李华钟
- 关键词：葡萄糖异构酶海栖热袍菌酶学性质
- 水蛭素促尿激酶纤溶作用研究被引量：8
- 2006年
- 目的研究水蛭素对尿激酶诱导的纤溶作用的影响,并分析可能的机制。方法采用尿激酶为纤溶激酶,复钙柠檬酸钠抗凝血浆为纤溶酶原来源的体外溶栓模型,通过测定纤溶产物D-D imm er生成量,微孔板分光光度法跟踪纤溶过程,比较水蛭素与肝素对纤溶的影响。运用土豆羧肽酶抑制剂(CPI)对TAFIa的专一性抑制作用,分析水蛭素与肝素对TAFI活化的影响。结果水蛭素组D-D imm er较肝素组高(P<0.01),水蛭素加CPI组较水蛭素组更高(P<0.01);微孔板分光光度法跟踪纤溶过程,肝素组有明显的纤溶停止和血栓再形成倾向,水蛭素组则可观察到明显的溶栓现象,水蛭素加CPI组效果最好。结论对尿激酶诱导的纤溶,水蛭素比肝素有更好的间接促纤溶作用,其原因主要是水蛭素能有效抑制再次血凝的发生,减少了尿激酶和纤溶酶原的短暂性耗竭。在这一过程中,水蛭素不能彻底抑制TAFI活化,表明对TAFI活化的抑制可能不是水蛭素促尿激酶纤溶作用的主要原因。
- 唐瑜菁张莲芬段作营张荣军孙钧铭金坚
- 关键词：水蛭素尿激酶纤溶
- 人血清白蛋白-血管钠肽融合蛋白在毕赤酵母中的表达被引量：1
- 2014年
- 人工合成VNP基因,通过酶连构建HSA和VNP基因的融合基因,插入表达载体pPIC9K,电转至毕赤酵母GS115,构建成工程茵,甲醇诱导表达。重组表达质粒经双酶切验证构建正确;表达产物经SDS-PAGE分析分子量为69 000 Da,与理论值相符;Western blot鉴定产物兼有HSA和VNP免疫原性,说明其为杂合分子;兔胸主动脉环离体灌流实验证明融合蛋白具有舒张血管活性。本研究说明毕赤酵母适于HSA-VNP融合蛋白的表达,为进一步开发稳定的VNP药物提供了生物制备方法。
- 崔燕生姜曰水高昊雷楗勇钱凯陈蕴段作营金坚
- 关键词：毕赤酵母
- ε-聚赖氨酸抑菌性能的初步研究被引量：33
- 2006年
- ε聚赖氨酸是赖氨酸残基通过α羧基和ε氨基形成的酰胺键连接而成的短肽,具有抑菌谱广,水溶性好,安全性高,热稳定性好,抑菌pH范围广等优点.主要研究了ε聚赖氨酸对常见菌的抑菌性能;经过高温处理后的ε聚赖氨酸仍有抑菌活性,表明ε聚赖氨酸有较好的热稳定性;在米饭等食品防腐方面的应用,ε聚赖氨酸也有很好的效果,它与醋酸结合效果更明显.
- 张东荣张超段作营王正刚毛忠贵
- 关键词：Ε-聚赖氨酸抑菌
- 初始生物素含量波动时谷氨酸发酵关键酶系的酶活变化模式被引量：3
- 2012年
- 谷氨酸发酵培养基中的生物素初始含量会随玉米浆来源、批次的不同出现波动,进而影响谷氨酸发酵性能和稳定性。本文研究分析了谷氨酸发酵中,初始生物素含量正常/不当,特别是初始含量不当、采取补救措施条件下的丙酮酸、异柠檬酸和α-酮戊二酸代谢节点处关键酶的活性变化。生物素匮乏时,催化主代谢途径的关键酶活性均被弱化,特别是α-酮戊二酸脱氢酶完全失活,能量代谢主要靠乙醛酸循环维持。当发现生物素匮乏并补加生物素后,中心代谢途径关键酶——丙酮酸脱氢酶的活性恢复到正常水平,TCA重新成为主要供能途径。生物素过量时,丙酮酸羧化酶和谷氨酸脱氢酶活性基本不变,而其他关键酶均被激活。当发现生物素过量并添加吐温40后,丙酮酸脱氢酶和异柠檬酸脱氢酶依旧保持很高活性,而α-酮戊二酸脱氢酶和异柠檬酸裂解酶的活性则下降到正常水平。采用上述补救措施可以挽救因初始生物素匮乏或过量所引起的错误发酵,终酸浓度均可恢复到对照(生物素亚适量)水平(75～80g·L-1)。另外,对生物素初始含量和吐温添加进行复合式调控,终酸浓度可进一步提高,达到87g·L-1,比对照提高8.8%。
- 曹艳Enock Mpofu丁健段作营史仲平
- 关键词：谷氨酸发酵酶学分析生物素吐温
- 人白介素2-人血清白蛋白融合蛋白的纯化及活性鉴定被引量：3
- 2012年
- 采用课题组已构建的携带人白介素2-人血清白蛋白融合蛋白(rhIL-2-HSA)基因的重组毕赤酵母Pichia pastoris GS115进行rhIL-2-HSA的分离纯化研究。发酵上清液经超滤浓缩、Blue Sepharose亲和层析、Octyl Sepharose疏水层析和DEAE Sepharose离子交换层析纯化获得较高纯度的目的产物,SDS-PAGE检测为单一条带。Western Blot分析结果显示,目的产物同时具有HSA和IL-2的抗原性,为HSA和IL-2的融合分子。经CTLL-2/MTT细胞增殖法测定,纯化的融合蛋白的生物学活性为1.147×107 IU/mg。
- 李波段作营张红梅雷楗勇陈蕴唐瑜菁金坚李华钟
- 关键词：人血清白蛋白融合蛋白纯化
