孙雪梅
- 作品数：8 被引量：28H指数：4
- 供职机构：华中科技大学同济医学院更多>>
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- 肝炎平对肝纤维化大鼠血浆同型半胱氨酸水平的影响被引量：1
- 2005年
- 目的探讨肝炎平对肝纤维化大鼠血浆同型半胱氨酸、半胱氨酸、半胱_甘氨酸及谷胱甘肽水平的影响。方法制备CCl4大鼠肝纤维化模型。动物随机分为正常对照组(N组)、肝炎平治疗组(G组)、和络舒肝胶囊治疗组(H)及肝纤维化模型组(D组)。采用高效液相色谱法(HPLC)测定各组血浆同型半胱氨酸(homocysteine)、半胱氨酸(cysteine)、半胱_甘氨酸(cysteinyl_glycine)及谷胱甘肽(glutathione,GSH)水平。结果肝炎平治疗组及和络舒肝胶囊治疗组同型半胱氨酸含量明显下降,与模型组相比较有显著性差异(P<0.05)。结论肝炎平通过调节肝纤维化大鼠体内含硫氨基酸代谢,降低血浆同型半胱氨酸,可能是其抗大鼠肝纤维化作用的机制之一。
- 唐望先孙雪梅吴翠环晏维张芳杰
- 关键词：肝炎平同型半胱氨酸肝纤维化
- 肝复乐对肝纤维化大鼠神经递质受体表达的调节作用被引量：2
- 2009年
- 目的研究中药肝复乐对肝纤维化大鼠肝细胞神经递质受体表达的调节作用,探讨其抗肝纤维化的机制。方法将40只Wistar大鼠分为3组:正常对照组10只?肝复乐组15只及模型组15只。用CCl4皮下注射制备大鼠肝纤维化模型,采用光镜及电镜观察肝组织病理学改变;运用半自动生化分析仪测定谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、血清γ谷丙转氨酶(GGT),放射免疫法测定血清层黏连蛋白(LN)、Ⅲ型前胶原(PC-Ⅲ)、Ⅳ型胶原(Ⅳ-C)、透明质酸(HA)的含量,免疫组织化学SP法检测各组肝组织M1、N型胆碱能受体(M1-AChR、N-AChR),α1、β2型肾上腺素能受体(α1-AR、β2-AR)的表达水平。结果肝复乐组病理改变较模型组明显改善;肝复乐组M1-AChR、N-AChR的表达较模型组显著降低(均P<0.05),而α1-AR、β2-AR的表达较模型组显著升高(均P<0.05)。结论肝复乐能通过抑制肝组织M1-AChR、N-AChR的表达,促进α1-AR、β2-AR的表达,从而调节神经递质在肝纤维化中的作用。
- 孙雪梅刘红艳王光林段瑞娴程勇卫吴翠环唐望先
- 关键词：肝复乐胆碱能受体肾上腺素能受体肝纤维化
- 人端粒酶催化亚单位锤头状核酶诱导肝癌细胞凋亡的作用被引量：7
- 2004年
- 目的 构建带有U6启动子的人端粒酶催化亚单位锤头状核酶真核表达质粒及其突变体,转染入肝癌细胞株SMMC7721,观察端粒酶活性、细胞增殖和凋亡的情况。 方法 用分子克隆技术构建由U6作为启动子、绿色荧光蛋白基因作为报告基因的核酶真核表达质粒pGTRz-U6及其突变体pGTmRz-U6,并以空质粒pEGFP-C1作为对照。Lipofectamine2000转染人肝癌细胞株SMMC7721,G418筛选阳性克隆。RT-PCR检测核酶及hTERT基因的表达,四甲基偶氮唑盐(MTT)作细胞生长曲线观察其生长情况,TRAP-银染法检测端粒酶活性变化,流式细胞计数(FCM)法检测细胞的凋亡水平。 结果 核酶、突变核酶在SMMC7721中持续表达;凝胶成像系统分析SMMC7721-pEGFP-C1、SMMC7721-mRz、SMMC7721-Rz hTERT基因表达,用SPSS10.0软件对3种细胞进行分析,发现三者hTERT基因表达水平不同(F=47.987,P<0.01);t检验分析得出SMMC7721-Rz hTERT基因表达明显低于SMMC7721-mRz和SMMC7721- pEGFP-C1(t值分别为-7.640和-11.602,P值均<0.01)。SMMC7721-pEGFP-C1和SMMC7721-mRz hTERT表达没有区别(t=-0.178,P>0.05)。TRAP-银染及FCM结果分别显示,随着细胞的分裂,SMMC7721-Rz和SMMC7721-mRz细胞端粒酶活性逐渐降低,凋亡水平逐渐增加,7PDS细胞凋亡率分别是29.86％和9.87％。
- 宋东坡林菊生傅桂莲孙雪梅孔心涓黎培员马昕
- 关键词：SMMC7721锤头状核酶HTERT基因端粒酶催化亚单位
- 肝炎平对血吸虫性肝纤维化家兔血浆谷胱甘肽及半胱氨酸的影响被引量：8
- 2005年
- 目的:探讨肝炎平抗家兔血吸虫性肝纤维化的作用及对血浆谷胱甘肽及半胱氨酸水平的影响。方法:实验分为3组:正常对照组(N组)、血吸虫感染+吡喹酮组(A组)及血吸虫感染+吡喹酮+肝炎平治疗组(B组)。采用高效液相色谱法(HPLC)测定各组血浆谷胱甘肽(glutathione ,GSH )及半胱氨酸(cysteine)水平。结果:B组胶原纤维含量低于A组;B组与A组比较,血浆谷胱甘肽及半胱氨酸水平均升高(P <0. 0 5 )。A组家兔血浆谷胱甘肽水平为(2 6 .18±2 .3 6) μmol/L ,B组为(4 1 0 0±5 3 2 ) μmol/L ;A组血浆半胱氨酸水平为(94. 83±8 .84) μmol/L ,B组为(117. 44±16 .88) μmol/L。结论:肝炎平通过调节血吸虫性肝纤维化家兔体内含硫氨基酸代谢,使血浆谷胱甘肽及半胱氨酸水平升高,增强抗氧化能力,可能是其具有抗肝纤维化作用的机制之一。
- 金琦唐望先孙雪梅吴翠环黄小丽叶红
- 关键词：血吸虫性肝纤维化半胱氨酸谷胱甘肽肝炎平兔血浆家兔
- 肝硬化高同型半胱氨酸血症与 MTHFR 基因 C667T 多态性的关系被引量：4
- 2005年
- 目的 研究肝硬化血浆同型半胱氨酸(HCY)水平及其与 N^2，N^(10)-亚甲基四氢叶酸还原酶 (MTHFR)基因多态性的关系。方法 采用柱前衍生化 HPLC 方法检测112例健康对照者、87例肝硬化 患者血浆同型半胱氨酸的水平，用多聚酶链反应-限制性内切酶片断长度多态性技术(PCR-RFLP)检测 其 MTHFR 基因 C667T 多态性。结果 健康对照组平均血浆 HCY 浓度为(8．34±3．59)μmol/L，肝硬化组 平均血浆 HCY 浓度为(21．71±4．85)μmol/L。与健康对照组相比，肝硬化组血浆 HCY 水平显著升高，差 异有统计学意义(P＜0．01)。PCR-RFLP 检测结果发现 MTHFR 基因型有3种，即纯合子突变 TT(+/+)型， 杂合子突变 TC(+/ )型，正常 CC(-/-)型。肝硬化组中+/+型、+/ 型和 / 型频率分别为29．9%、52．9%、 17．2％；健康对照组分别为19．6%、33．9%、46．4%，两组差异有统计学意义。肝硬化组 MTHFR 基因突变 无论是纯合子还是杂合子突变基因型，其血浆 HCY 水平均明显高于正常基因型。结论 高同型半胱氨酸 血症可能是肝硬化的一个危险因素，血浆 HCY 水平可作为肝硬化的一个辅助诊断指标，MTHFR 基因 C667T 多态性可能是肝硬化高同型半胱氨酸血症的易感基因之一。
- 周秀敏林菊生孙雪梅唐望先张文英袁顺玉艾莉
- 关键词：肝硬化高同种半胱氨酸血症
- 奥曲肽对大鼠肝星状细胞胞质内游离钙及细胞增殖的影响被引量：4
- 2005年
- 目的:探讨在常氧和低氧条件下奥曲肽(octreotide)对大鼠肝星状细胞(HSC)胞内游离钙[Ca2+]i及增殖的调节.方法:采用钙荧光探针(Fura-2/AM)负载培养的大鼠HSC,观察常氧和低氧条件下培养48h后octreotide对HSC[Ca2+]i的调节,同时用四唑盐(MTT)比色法比较不同浓度的octreotide对大鼠HSC增殖的影响.环磷酸腺苷(cAMP)和环磷酸鸟苷(cGMP)放免分析药盒测cAMP,cGMP浓度.结果:与常氧条件相比,低氧条件下HSC[Ca2+]i显著升高(293.2±12.4nmol/Lvs137.7±7.8nmol/L.P<0.01).500、800和1000μg/Loctreotide在常氧状态下可引起HSCs[Ca2+]i降低(P<0.05),其值分别为92.5±2.5、83.8±2.3和76.6±2.2nmol/L.低氧时500,800和1000gg/Loctreotide可引起HSCs[Ca2+],降低(P<0.01),其值分别为204.3±7.4、174.1±4.8和156.6±6.6nmol/L.常氧对照组A值(0.232±0.016)明显低于低氧对照组(0.533±0.036)(P<0.01);经500、800和1000μg/Loctreotide处理后,无论是常氧还是低氧状态下A值均明显降低(P<0.01).低氧条件下cAMP和cGMP含量不发生改变(P>0.05);无论是常氧还是低氧状态,经过octreotide500μg/L处理后,cAMP和cGMP含量与相应对照组相比增(cAMP:1.69±0.18pmol/mgvs1.10±0.32pmol/mg.1.87±0.30pmol/mgvs1.37±0.25pmol/mg,P<0.05;cGMP:1.08±0.24pmol/mgvs0.86±0.12pmol/mg.1.17±0.53pmol/mgvs0.89±0.20pmol/mg,P<0.05),而Octreotide800,1000μg/L组更高(cAMP:1.99±0.27,2.48±0.37pmol/mgvs1.10±0.32pmol/mg,P<0.01:2.09±0.35.2.24±0.15pmol/mgvs1.37±0.25pmol/mg,P<0.01:cGMp:1.24±0.17,1.31±0.29pmol/mgvs0.86±0.12pmol/mg,P<0.01;1.38±0.29,1.46±0.35pmol/mgvs0.89±0.20pmol/mg,P<0.01).结论:缺氧可通过第二信使系统促进HSC的增生,而Octreotide无论常氧还是低氧条件下剂量依赖性抑制HSCs增殖;cAMP,cGMP参与了对HSC的调节.
- 薛秀兰林菊生孙雪梅周鹤俊
- 关键词：奥曲肽星状细胞CAMPCGMP大鼠肝星状细胞细胞增殖
- PNP/MeP-dR系统对肝癌细胞杀伤作用的实验研究被引量：2
- 2006年
- 目的探讨新型嘌呤核苷磷酸化酶/6-甲基嘌呤-2′-脱氧核糖核苷(PNP/MeP-dR)自杀基因系统对肝癌细胞的杀伤作用。方法构建PNP基因真核表达载体pcDNA3.0/PNP,脂质体介导法将其导入HepG2细胞,利用G418筛选获得稳定转染PNP基因的细胞株HepG2/PNP。采用台盼蓝拒染法测绘细胞生长曲线,MTT法和FCM检测细胞对MeP-dR的敏感性及旁观者效应,HPLC检测PNP酶活性。结果HepG2/PNP细胞对MeP-dR十分敏感,作用4d后MeP-dR对HepG2/PNP的IC50为4.5μmol/L,而100μmol/L的MeP-dR即可最大限度地杀死HepG2/PNP细胞。100μmol/L MeP-dR作用8d后,混合细胞中HepG2/PNP比例仅占5%即可导致所有细胞死亡。HPLC结果显示,PNP基因产物能够将MeP-dR转化为6-MP。结论PNP/MeP-dR系统对肝癌细胞的杀瘤效果明显优于传统的自杀基因系统。本研究为该系统应用于肝癌体内治疗打下基础。
- 蔡晓坤周俊立林菊生孙雪梅薛秀兰李超
- 关键词：肝肿瘤转染基因疗法HEPG2细胞
- RNA聚合酶Ⅱ启动子SMP8在活化肝星状细胞中的活性
- 2008年
- 我们已往的研究已经证实，RNA聚合酶Ⅲ启动子（pol Ⅲ）载体表达的针对TGF β1的核酶，在体外能有效逆转活化HSC的生物学活性。但TGFD1是广泛存在于各种细胞中，并发挥重要生物学效应的细胞因子，因此不具组织和细胞特异性的pol Ⅲ启动子核酶表达系统，在抑制HSC活化的同时会影响到正常肝细胞或其他细胞的功能，这使得基因治疗肝纤维化变得困难。为达到靶向性治疗肝纤维化的目的，我们探讨了在活化HSC中特异性激活的α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）启动子SMP8的生物学活性，研究其内含子1中CArG[CC（A／T）6GG]顺式作用元件对HSC中SMP8特异性启动子活性的影响，为下一步改造该启动子中的内含子1，使其作为靶向性基因治疗载体的启动子提供实验依据。
- 常莹姜华军孙雪梅艾莉陈婷袁顺玉宋宇虎林菊生
- 关键词：肝星状细胞
