孙运祥
- 作品数：3 被引量：4H指数：2
- 供职机构：哈尔滨医科大学更多>>
- 发文基金：黑龙江省科技攻关计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- hGM-CSF基因的克隆及重组腺病毒的构建被引量：2
- 2005年
- 目的采用RT-PCR技术、基因重组技术及脂质体转染技术等克隆得到hGM-CSF基因并获得高滴度重组腺病毒。最终目的是为GM-CSF造血干细胞肿瘤基因治疗提供基础研究准备。方法应用RT-PCR技术从人脐带血淋巴细胞中克隆出hGM-CSF基因,再应用基因重组技术构建含hGM-CSF基因的重组腺病毒载体,进而通过反复转染293包装细胞得到高滴度重组腺病毒。结果克隆出hGM-CSF基因,经测序证实结果正确;得到高滴度的重组腺病毒,提取病毒DNA证实含目的基因。结论用LoxP/Cre体外重组法成功构建了hGM-CSF的复制缺陷型重组腺病毒。
- 郭玉嵩任丽君孙运祥田长富
- 关键词：重组腺病毒肿瘤基因治疗GM-CSF基因RT-PCR技术基因重组技术HGM-CSF肿瘤基因治疗
- 人IL-2复制缺陷型重组腺病毒的构建和鉴定
- 本研究的目的是构建含人白细胞介素2(IL-2)的复制缺陷型重组腺病毒，为研究其体内外的抗肿瘤作用打下基础。 方法:将hIL-2DNA片段与载体pDNR-Dual-CMV融合，转化大肠杆菌DH5α。得到重组质粒(p...
- 孙运祥
- 关键词：白细胞介素-2腺病毒载体同源重组抗肿瘤
- 文献传递
- 人IL-2复制缺陷型重组腺病毒的构建和鉴定被引量：3
- 2005年
- 目的构建含hIL-2的复制缺陷型重组腺病毒。方法将hIL-2DNA片段与载体pDNR-Dual-CMV融合,转化大肠杆菌DH5α。得到重组质粒(pDNR-Dual-hIL-2),经鉴定正确,将pDNR-Dual-hIL-2质粒与pLP-Adeno-x-CMV质粒重组得到重组载体pLP-Adeno-hIL-2,再次转化大肠杆菌DH5α,挑取正确克隆,大量扩增,提取质粒。将此质粒经PacⅠ酶切后与LipofectamineTM2000转染HEK293细胞,产生含人IL-2的复制缺陷重组腺病毒(AdhIL-2)。结果pLP-Adeno-hIL-2重组载体经PCR、酶切鉴定结果与预期相符,所得重组病毒滴度达到5×107PFUml。结论成功构建了hIL-2的复制缺陷型重组腺病毒。
- 孙运祥任丽君郭玉嵩田长富
- 关键词：白细胞介素2腺病毒载体同源重组人IL-2HEK293细胞HIL-2
