刘娇
- 作品数：13 被引量：14H指数：2
- 供职机构：黑龙江八一农垦大学动物科技学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金中国博士后科学基金黑龙江省高校科技创新团队建设计划项目更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 副猪嗜血杆菌分泌组中主要保护性抗原的筛选与鉴定
- 副猪嗜血杆菌(Haemophilus parasuis, HPS)是革拉瑟氏病(Glasser's disease)的病原体,该病以纤维素性多发性浆膜炎、关节炎和脑膜炎为特征,对养猪业危害严重并造成巨大的经济损失.HPS...
- 刘娇李建军崔宁张艳禾谢芳李刚周泷倪洪波王春来
- 关键词：副猪嗜血杆菌保护性抗原蛋白筛选
- 文献传递
- 副猪嗜血杆菌重组亚单位疫苗候选抗原蛋白的筛选和确证
- 引言副猪嗜血杆菌(Hps)是猪Gl(a|¨)sser氏病的病原菌,该病以多发性浆膜炎、关节炎、脑膜炎和肺炎以及高发病率和高死亡率为特征。由于Hps血清型的多样性、各血清间交叉保护力低、致病和免疫机制都不是很明了,给该病的...
- 王春来李建军刘娇李艳玲张艳禾李刚谢芳
- 副猪嗜血杆菌种特异性基因的筛选与鉴定
- 2014年
- 为筛选副猪嗜血杆菌(HPS)种特异性的基因,采用抑制消减杂交(SSH)技术,以HPS DNA为Tester,以猪胸膜肺炎放线杆菌(APP)DNA为Driver,通过2轮消减杂交和2次PCR扩增,将第2次PCR产物连接pMD19-T载体,转化大肠杆菌DH5α感受态细胞,筛选阳性克隆后测序,经Southern Blot验证和BLAST分析,获得6个HPS特异基因片段。研究为建立副猪嗜血杆菌基因鉴别诊断方法及ELISA抗原靶标的鉴定奠定基础。
- 李继昌崔宁刘娇周泷张艳禾谢芳李刚牛惠王春来
- 关键词：副猪嗜血杆菌抑制消减杂交
- 黑龙江地区牛源大肠杆菌毒力和耐药基因检测分析被引量：10
- 2015年
- 为了了解黑龙江地区牛源大肠杆菌毒力基因及主要治疗药物耐药基因的分布,试验采用KB(Kirby-Bauer)法和PCR方法检测了2011—2013年从黑龙江地区各规模化养牛场分离的66株大肠杆菌的毒力和耐药基因。结果表明:66株大肠杆菌中有33株带有毒力基因,检出率达到50.0%,携带1种及其以上的毒力基因分别为30株和3株,占阳性菌株总数的91.0%和9.1%;耐药基因检出率分别为磺胺类耐药基因Sul1/Sul2(32.1%)、Sul3(9.4%),氯霉素类耐药基因Cat1(15.1%)、Cml A(13.2%)、Flor(15.1%),氨基糖苷类耐药基因aph A3(1.9%)、aad A(22.6%)、aac C2(22.6%)、aac C4(20.8%)。
- 张洋龙郎秀艳蒋惠婷刘娇毕莹张建军常春龙倪宏波
- 关键词：大肠杆菌毒力基因耐药基因药物
- 牛源坏死梭杆菌43K外膜蛋白的黏附特性研究
- 2023年
- 旨在明确牛源坏死梭杆菌43K OMP的黏附特性。将43K OMP基因克隆连接至pET-32a载体,转化入大肠杆菌BL21 DE3中,通过IPTG诱导进行原核表达,应用黏附试验、天然蛋白竞争试验、抗体抑制试验和蛋白酶水解试验,明确牛源坏死梭杆菌43K OMP的黏附性,同时将纯化的重组蛋白和提取的天然43K OMP与牛子宫内膜细胞和牛乳腺上皮细胞共孵育,观察43K OMP对细胞的黏附作用。结果显示:43K OMP基因克隆到pET-32a载体中,随后在大肠杆菌BL21 DE3以包涵体形式成功表达;携带重组质粒(H2019)的大肠杆菌经IPTG诱导后,与空载体对照相比,与宿主细胞的结合显著增强(P<0.05);天然43K OMP与细胞共孵育后,黏附细胞的细菌数量显著降低(P<0.05);H2019与43K OMP多抗或单抗预孵育后,显著降低黏附宿主细胞的细菌数量(P<0.05);经不同浓度蛋白酶K处理H2019后,黏附细胞的细菌数量显著降低(P<0.05),且与蛋白酶K浓度呈现剂量依赖关系。同时,43K OMP天然蛋白和重组蛋白能黏附于牛子宫内膜细胞和乳腺上皮细胞表面。牛源坏死梭杆菌43K OMP能黏附宿主细胞,43K OMP作为一种黏附蛋白有助于牛源坏死梭杆菌对宿主细胞的黏附作用。
- 贺显晶刘娇王志慧武瑞郭东华
- 关键词：细菌黏附上皮细胞
- 副猪嗜血杆菌细胞致死膨胀毒素CDT各亚基功能研究
- 副猪嗜血杆菌(Haemophilusparasuis,H.arasuis)是猪革拉瑟氏病的病原菌,该病以猪多发性浆膜炎和脑膜炎为主要特征.细胞致死膨胀毒素(Cytolethal Distending Toxins, CD...
- 李艳玲李建军张艳禾周泷崔宁刘娇李刚谢芳王春来
- 副猪嗜血杆菌主要保护性抗原的免疫效力评价
- 副猪嗜血杆菌（Haemophilus parasuis, HPS）是健康猪上呼吸道的一种共栖菌，在特定条件下侵入机体而引起革拉瑟氏病（Gl sser’s disease），以纤维素性多发性浆膜炎、关节炎和脑膜炎为特征，对...
- 刘娇
- 关键词：副猪嗜血杆菌保护性抗原免疫效力评价
- 胸膜肺炎放线杆菌血清7型S8ΔclpP/ΔapxⅡC/Δfur三基因缺失弱毒株的构建及生物学特性研究被引量：1
- 2014年
- 为进一步致弱胸膜肺炎放线杆菌(APP)毒力,制备基因缺失弱毒疫苗,本研究以本实验室构建的APP血清7型S8菌株双基因缺失株S8ΔclpP/ΔapxⅡC为亲本株,通过同源重组和蔗糖负向筛选的方法,再将铁摄取调节基因fur缺失,构建了无抗生素标记的三基因缺失突变株S8ΔclpP/ΔapxⅡC/Δfur。生物学特性研究表明,该缺失株与野生株S8相比,体外生长速度未发生明显变化,但溶血能力显著下降,与亲本株相比,铁摄取利用轻微降低。致病力试验结果表明,仔猪经气管接种该缺失株毒力显著低于野生型菌株,并且1×109cfu/mL剂量对猪不产生明显的呼吸道症状和肺部病变,表明该缺失株高度安全,可以作为APP基因缺失弱毒活疫苗的候选株。
- 周泷谢芳刘娇崔宁李艳玲牛惠李刚张艳禾王春来
- 关键词：胸膜肺炎放线杆菌基因缺失致弱
- 副猪嗜血杆菌细胞致死膨胀毒素CdtC亚基的克隆表达及细胞毒性分析被引量：2
- 2013年
- 细胞致死膨胀毒素(CDT)由CdtA、CdtB和CdtC三个亚基构成,是细菌的一种重要毒力因子。为研究副猪嗜血杆菌(H.parasuis)CDT的CdtC亚基的功能,本研究根据G enBank中cdtC基因序列设计引物,扩增cdtC基因,并克隆到原核表达载体pET-28a(+)中进行诱导表达。SD S-PAGE和w estern blot检测目的蛋白主要以包涵体形式存在,分子量约为25 ku。将纯化后的重组蛋白复性后进行体外细胞毒性试验。结果表明,CdtC蛋白对Vero细胞和PK-15细胞有较强的细胞毒性作用。本研究为研究细胞致死膨胀毒素CDT的致病机制奠定了基础。
- 李艳玲李建军周泷崔宁刘娇张艳禾李刚谢芳王春来
- 关键词：副猪嗜血杆菌细胞毒性
- K99-987P-F41重组蛋白及其应用
- 本发明涉及一种K99-987P-F41重组蛋白，其氨基酸序列如SEQ ID No.2所示。本发明还提供了该重组蛋白的编码基因、制备方法以及在制备产肠毒素大肠杆菌疫苗中的应用。本发明将ETEC黏附素K99、987P、F41...
- 倪宏波郎秀艳张洋龙邢思疑蒋慧婷刘娇
- 文献传递
