- 抗人神经纤毛蛋白1的单域抗体及其制备方法
- 抗人神经纤毛蛋白1的单域抗体及其制备方法，属于基因工程和抗体工程技术领域。制备方法：克隆抗人神经纤毛蛋白1单域抗体基因，并将其导入载体，构建重组载体；将重组载体导入宿主细菌，构建表达抗人神经纤毛蛋白1单域抗体的重组工程菌...
- 颜江华王生育罗芳洪吴婷倪二茹王勇军
- 文献传递
- 免疫杀手细胞的体外扩增方法及其对肝癌细胞BEL-7402的杀伤作用
- 2012年
- 目的:探讨免疫杀手细胞(immune-killer cells,IKCs)的体外扩增方法及其对人肝癌细胞BEL-7402的杀伤作用。方法:改良自然杀伤细胞培养扩增法扩增IKCs细胞,流式细胞仪分析IKCs表型,台盼蓝染色计数法观察细胞增殖状况,AlamarBlue法观察IKCs细胞对BEL-7402细胞的杀伤作用,用BALB/c裸鼠模型检测IKCs细胞对肝癌动物模型的治疗作用。结果:IKCs细胞培养14 d的细胞总数扩增300倍以上,主要由CD3^+CD56^+、CD3^-CD56^+和CD8^+细胞亚群组成,CD3^+CD56^+和CD3^-CD56^+比例达85%以上,CD8^+比例达到77%以上。IKCs细胞对肝癌BEL-7402细胞的杀伤实验显示,当效靶比为25:1时和100:1时,其杀伤活性分别为66.5%和97.8%(P<0.01)。裸鼠肝瘤模型治疗实验显示,IKCs细胞对早期和晚期人肝癌BEL-7402细胞裸鼠模型均有显著的治疗作用,与对照组比较,其抑瘤率达69%以上(P<0.01)。结论:本实验建立的肿瘤免疫杀手细胞IKCs的培养扩增方法是可行的、有效的,有望成为一种新的肿瘤免疫细胞治疗方法。
- 王生育罗芳洪倪二茹吕海燕支黎明颜江华张顺浪
- 关键词：肝癌杀伤
- 抗人神经纤毛蛋白1的单域抗体及其制备方法
- 抗人神经纤毛蛋白1的单域抗体及其制备方法，属于基因工程和抗体工程技术领域。制备方法：克隆抗人神经纤毛蛋白1单域抗体基因，并将其导入载体，构建重组载体；将重组载体导入宿主细菌，构建表达抗人神经纤毛蛋白1单域抗体的重组工程菌...
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- 抗NRP-1单克隆抗体对胶质瘤细胞株恶性生长表型的影响
- 背景:Neuropilins-1(NRP-1)是一个新型的多功能受体,在肿瘤血管内皮细胞和多种肿瘤细胞株高表达,其信号通路与新生血管内皮细胞的活化、增殖与迁移和肿瘤细胞的恶性生长表型有关。目的:检测NRP-1在胶质瘤细胞...
- 颜江华唐小勇倪二茹王生育曹畅吕莎张海鹏陈陆馗
- 抗人NRP1单克隆抗体的活性鉴定及初步应用被引量：8
- 2012年
- 目的鉴定抗人神经菌毛素1(neuropilin1,NRP1)单克隆抗体的生物活性并利用该抗体检测常见肿瘤细胞株NRP1蛋白的表达情况。方法腹水法制备4株抗NRP1单克隆抗体并用rProtein A亲和柱纯化抗体,间接ELISA检测4株抗体的滴度水平,Western blot分析4株抗体结合NRP1蛋白的特异性,流式细胞术分析4株抗体结合NRP1蛋白的亲和力,共聚焦免疫荧光实验进一步验证抗体结合NRP1蛋白的能力;细胞免疫组织化学染色检测14株肿瘤细胞表达NRP1蛋白的情况。结果 4株抗体均能特异结合NRP1蛋白,其中A6结合NRP1能力最强,能结合在表达NRP1蛋白的细胞膜表面。细胞免疫组织化学染色结果显示NRP1在HepG2、C6、HEK293、BEL-7402、MDA-MB-453呈高水平表达,在U87、MGC803、MCF7、MDA-MB-231中表达水平相对较弱,而在U251、BGC823、H6、HT-29的表达介于两者之间,在SMMC-7721细胞中未检测到表达。结论 4株抗NRP1单克隆抗体均能特异结合NRP1蛋白,多种肿瘤细胞株均不同程度表达NRP1蛋白,为进一步探讨NRP1蛋白与肿瘤发生发展的关系奠定了基础。
- 倪二茹曾凡伟王生育曹畅吕莎张海鹏颜江华
- 关键词：NRP1单克隆抗体特异性免疫细胞化学染色
