于晓妉
- 作品数：91 被引量：234H指数：8
- 供职机构：军事医学科学院基础医学研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划国家高技术研究发展计划更多>>
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- 组蛋白去乙酰化酶抑制剂FK228对前列腺癌LNCaP细胞抑制效应的细胞信号通路研究被引量：5
- 2009年
- 目的研究组蛋白去乙酰化酶抑制剂FK228对前列腺癌LNCaP细胞抑制作用的细胞信号机制。方法Western blot分析细胞蛋白乙酰化水平、细胞信号通路蛋白及细胞周期相关蛋白的表达。结果FK228能够使细胞内蛋白乙酰化水平增高,乙酰化组蛋白H3积累,多种细胞信号通路的相关蛋白如雄激素受体、HER-2、Raf-1、Akt、CDK4等呈时间依赖性和剂量依赖性被清除。结论FK228能够同时阻断对细胞生长具有重要作用的多条细胞信号通路,从而对前列腺癌LNCaP细胞发挥抑制作用。
- 孙圣坤于晓妉史立新洪宝发张旭
- 关键词：组蛋白脱乙酰基酶细胞信号通路组蛋白去乙酰化酶抑制剂FK228
- 间充质干细胞来源的成骨细胞具有免疫调控能力被引量：8
- 2005年
- 为了探讨来源于间充质干细胞 (mesenchymalstemcell,MSC)的成骨细胞的免疫调控能力 ,将MSC在成骨诱导体系中诱导分化 1周后用MTT法检测细胞生长变化 ,流式细胞术鉴定其免疫表型改变 ,淋巴母细胞转化实验观察其免疫调控能力。结果表明 ,MSC在向成骨诱导过程中细胞生长迅速 ,明显快于未诱导的MSC ,细胞表型未发生明显变化 ,即CD73,CD10 5 ,CD4 4 ,CD2 9等仍为强阳性 ,而造血细胞的表面标志CD34,CD4 5和参与免疫反应的细胞表面分子HLA DR ,CD86等仍为阴性。淋巴母细胞转化实验结果显示 ,源于MSC的成骨细胞具有免疫调控能力 ,且随着成骨细胞量的增多 ,抑制T细胞增殖能力越强。结论 :MSC来源的成骨细胞具有免疫调控能力。
- 江小霞张毅李秀森吴英于晓妉唐佩弦毛宁
- 关键词：间充质干细胞成骨细胞免疫调控
- 曲古抑菌素A对前列腺癌LNCaP细胞雄激素受体的清除作用被引量：4
- 2005年
- 目的:研究组蛋白去乙酰化酶抑制剂曲古抑菌素A(trichostatinA,TSA)对前列腺癌细胞的抑制作用机理。方法:四甲基偶唑氮蓝(MTT)检测药物对肿瘤细胞增殖的影响;Hochest33342染色观察细胞凋亡的形态学变化;Western印迹分析雄激素受体(AR)蛋白的表达;反转录PCR检测AR转录水平的变化。结果:TSA在较低浓度即能有效抑制LNCaP细胞的增殖,EC50为125.9nmol·L-1,并诱导肿瘤细胞凋亡;药物处理后细胞周期依赖性蛋白激酶抑制剂p21表达增高,AR呈时间及剂量依赖性被清除。TSA对AR的清除是发生在蛋白水平的降解,而不影响其转录。结论:TSA能够清除对细胞生长具有重要作用的AR细胞信号通路,从而对前列腺癌LNCaP细胞发挥抑制作用。
- 孙圣坤刘兵李秀森侯春梅洪宝发于晓妉
- 关键词：受体雄激素组蛋白脱乙酰基酶组蛋白去乙酰化酶抑制剂曲古抑菌素A细胞信号通路
- 曲古抑菌素A对肺癌细胞株H322抑制效应及机制的研究
- 2012年
- 目的评价曲古抑菌素A(TSA)对肺癌细胞株H322的生长抑制效应及机制。方法以四氮甲基唑蓝、流式细胞术观察TSA作用后,肺癌细胞株H322的生长抑制情况以及细胞周期、细胞凋亡等变化,Westernblot分析细胞周期相关蛋白p21、抗凋亡蛋白survivin及细胞外信号调节激酶(ERK)的表达。结果 TSA对H322具有时间依赖性和浓度依赖性的生长抑制作用;TSA作用48h及96h后,H322细胞凋亡及G2/M期细胞明显增加(P<0.05)。p21蛋白表达水平显著提高,survivin蛋白及磷酸化ERK蛋白表达显著下降。结论 TSA对肺癌细胞株H322生长具有抑制作用,其机制可能是上调p21蛋白的表达,引起细胞周期的阻滞;同时抑制survivin的表达,阻断ERK信号通路,导致细胞凋亡。
- 张东刘长庭于晓妉刘岩
- 关键词：肺癌曲古抑菌素A细胞周期P21SURVIVIN
- 肿瘤转移与转移抑制基因被引量：2
- 1992年
- 伴随抗癌基因的发现及研究的深入,又发现一类与抑制肿瘤细胞转移表型相关的基因,这类基因被命名为转移抑制基因。其发现对于肿瘤转移过程的分子机制研究无疑是令人鼓舞的。本文对近年来发现的两种侵袭和转移抑制基因nm23和TIMP的研究现状进行了介绍。
- 于晓妉高进
- 关键词：肿瘤转移转移抑制基因
- 用于筛选组蛋白去乙酰化酶抑制剂细胞模型的验证被引量：1
- 2010年
- 目的验证已建立的组蛋白去乙酰化酶(HDAC)抑制剂筛选细胞模型,并采用该模型进行药物筛选。方法采用脂质体转染法将含有TA1和TA2启动子元件的荧光素酶报道基因真核表达载体pTA1-Luc和pTA2-Luc导入COS-7细胞,G418筛选获得稳定转染上述报告基因系统的细胞克隆。以特异性HDAC抑制剂缩酯环肽FK228,N-辛二酰苯胺异羟肟酸(SAHA)和曲古抑菌素A(TSA)为阳性对照,通过测定荧光素酶活性评估TA1和TA2启动子对HDAC抑制剂的反应;并采用此细胞模型对其他抗肿瘤药物和植物提取物进行初步筛选。结果稳定转染的COS-pTA1及COS-pTA2细胞对HDAC抑制剂具有良好的浓度依赖性(FK228:相关系数为0.7236;SAHA:相关系数为0.7997;TSA为相关系数为0.9815;P<0.01),其中COS-pTA1的特点是灵敏度高,可以有效避免因样品活性低而出现漏检。COS-pTA2细胞的特点是检测背景低,特异性强,可以有效排除假阳性的标本。两种细胞模型的联合筛选,可以鉴定具有HDAC抑制活性的化合物。结论该细胞模型可用于筛选具有HDAC抑制活性的先导化合物。
- 杜芝燕王妍徐元基于晓妉
- 关键词：组蛋白去乙酰化酶抑制剂细胞模型药物筛选
- 曲古抑菌素A对前列腺癌LNCaP细胞抑制效应的细胞信号通路研究被引量：7
- 2006年
- 目的:研究组蛋白去乙酰化酶抑制剂曲古抑菌素A(TSA)对前列腺癌LNCaP细胞抑制作用的细胞信号机制。方法:半固体培养检测TSA对前列腺癌细胞集落形成能力的影响;Western Blot分析细胞蛋白乙酰化水平、细胞信号通路蛋白及细胞周期相关蛋白的表达。结果:TSA能够有效杀伤前列腺癌LNCaP细胞,在较低浓度即能抑制具有集落形成能力的细胞;药物处理使细胞内蛋白乙酰化水平增高,乙酰化组蛋白H3积累,多种细胞信号通路的相关蛋白如雄激素受体、HER2、Raf-1、Akt、CDK4等呈时间依赖性和剂量依赖性被清除。结论:TSA能够同时阻断对细胞生长具有重要作用的多条细胞信号通路,从而对前列腺癌LNCaP细胞发挥抑制作用。
- 孙圣坤刘兵李秀森侯春梅洪宝发于晓妉
- 关键词：组蛋白脱乙酰基酶前列腺癌细胞信号通路曲古抑菌素A
- RNAi阻断GATA-3表达治疗小鼠过敏性鼻炎的实验研究被引量：5
- 2011年
- 目的探讨以GATA-3为基因治疗靶标,在体内实验阶段评估RNAi技术抑制Th2极化反应,阻止过敏性鼻炎发展的潜在治疗作用。方法采用脂质体鼻腔给药系统,将在体外实验中获得的针对GATA-3基因抑制效果最明显的特异性siRNA重组质粒载体Si338应用于小鼠过敏性鼻炎模型上,借助RT-PCR、ELISA、流式细胞术和HE染色分别检测鼻腔黏膜GATA-3的mRNA水平和相关炎症因子变化,以及Th1/Th2细胞亚群漂移和炎症细胞浸润的改变。结果①HE染色后,显微镜下观察到过敏性鼻炎小鼠鼻黏膜水肿,上皮脱落,炎症细胞浸润增加和嗜酸性粒细胞数均高于正常对照组,经RNAi治疗后,鼻黏膜中嗜酸性粒细胞数明显下降。②RT-PCR显示s,iRNA质粒载体有效下调Th2极化条件下的GATA-3 mRNA含量。③流式细胞术检测显示,过敏性鼻炎小鼠脾脏中,Th1/Th2细胞亚群出现漂移,Th1细胞的相对数量明显减少,Th2细胞相对数量明显增加,RNAi治疗后,Th1/Th2比率出现逆转。④ELISA显示过敏性鼻炎小鼠外周血中I,L-4与IL-5含量增高,Si338组IL-4含量明显降低。结论在获得高效、特异性干涉序列基础上,针对疾病上游基因,诸如GATA-3,给予RNAi技术的靶向治疗能够显著缓解过敏性鼻炎动物模型中鼻黏膜的Ⅰ型变态反应。本研究为今后前瞻性地探索siRNA基因治疗过敏性鼻炎提供了具有潜力的研究思路和可行的实验方法。
- 郑铭王妍周兵杜芝燕徐元基于晓妉
- 关键词：过敏性鼻炎动物模型RNA干扰
- 用于快速筛选组蛋白去乙酰化酶抑制剂的细胞模型
- 本发明公开了属于新药研发中从组合化合物库中快速筛选抗肿瘤药物-组蛋白去乙酰化酶抑制剂类先导化合物时使用的一种细胞筛选模型。该模型利用组蛋白去乙酰化抑制剂可以特异性活化某些启动子序列的特点，构建了含有特定启动子和萤火虫荧光...
- 于晓妉杜芝燕王妍徐元基
- 文献传递
- 曲古菌素A诱导前列腺癌DU-145细胞有丝分裂的灾变被引量：1
- 2007年
- 目的:研究组蛋白去乙酰化酶抑制剂(histone deacetylase inhibitor,HDACi)曲古菌素(trichostatina A,TSA)对前列腺癌DU145细胞有丝分裂的影响,探讨HDACi杀伤肿瘤细胞的新机制。方法:将前列腺癌DC-145细胞分成不加药对照组和不同剂量(100、200、300、400nmol/L)TSA加药组,药物作用一定时间后,MTT法检测TSA对DU145细胞的杀伤效应,瑞氏-姬姆萨染色观察细胞形态的变化,流式细胞术分析细胞周期的改变,免疫荧光染色观察DU145细胞异常的有丝分裂现象,Western blotting检测TSA处理对DU145细胞某些调控蛋白表达的影响。结果:TSA处理诱导DU145细胞发生有丝分裂,TSA处理24h后多核细胞数目由0.24%增加至1.21%。细胞周期计数结果显示,TSA处理后有丝分裂各期细胞比例发生明显改变,表现为有丝分裂前中期细胞所占比例增加,后末期细胞所占比例减少。免疫荧光染色显示,细胞出现多极纺锤体、染色体分离滞后等异常有丝分裂现象。TSA作用于DU145细胞后,能明显抑制Survivin蛋白的表达,增强细胞骨架蛋白Tubulin的乙酰化,并诱导P21蛋白高表达。结论:TSA能够诱使DU145细胞发生有丝分裂灾变,其机制可能与TSA降低Survivin蛋白的表达以及增强微管蛋白的乙酰化有关。
- 张旭辉于晓妉赵名易欣杜芝燕徐元基
- 关键词：组蛋白去乙酰化酶曲古菌素A前列腺癌细胞有丝分裂灾变
