丁健
- 作品数：16 被引量：104H指数：7
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- 培养胎肝细胞上清对暴发性肝衰竭小鼠存活率的影响被引量：7
- 1997年
- 目的探讨胎肝细胞悬液治疗严重肝病的机理以及使用培养胎肝细胞分泌上清（ＦＨＣＳ）替代的可能性．方法采用Ｄ＿氨基半乳糖（Ｄ＿ｇａｌｎ）／内毒素（ＬＰＳ）诱发小鼠暴发性肝衰竭（ＦＨＦ），观察ＦＨＣＳ的保护作用．结果ＦＨＣＳ能显著提高ＦＨＦ小鼠的存活率（Ｐ＜００１），降低血清转氨酶（Ｐ＜００５），减轻肝细胞坏死程度，并促进肝细胞再生．结论ＦＨＣＳ对ＦＨＦ有较好的保护与治疗作用。
- 王英杰王小红王宇明李梦东丁健
- 关键词：肝功能衰竭细胞培养
- 人肝细胞的球体培养及其意义被引量：7
- 1997年
- 人肝细胞的球体培养及其意义王英杰李梦东王宇明刘国栋丁健普通单层培养的肝细胞贴壁生长后，再次消化损伤大，活力显著下降，难以在肝细胞移植和生物人工肝等研究中广泛应用。作者在体外两步灌流分离肝细胞后，综合应用限制贴壁技术进行了人肝细胞球体悬浮培养的实验研究...
- 王英杰李梦东王宇明刘国栋丁健
- 关键词：肝细胞
- 内毒素／肿瘤坏死因子所致肝细胞损害机制的体外研究被引量：20
- 1996年
- 为了解内毒素（ＬＰＳ）／肿瘤坏死因子（ＴＮＦ）所致肝细胞损害的机制，以乳酸脱氢酶（ＬＤＨ）及噻唑蓝染色（ＭＴＴ）为细胞毒性指标，利用Ｗｉｓｔａｒ大鼠肝细胞进行了ＬＰＳ及其介质ＴＮＦ等的肝细胞损害机制研究。结果发现：ＬＰＳ、ＴＮＦ－α、ＩＬ－１、ＩＬ－６等对肝细胞ＬＤＨ漏出及ＭＴＴ无显著影响（Ｐ＞０．０５），仅在ＬＰＳ、ＬＰＳ／ＴＮＦ－α加入肝细胞－Ｋｕｐｆｆｅｒ细胞混合培养组后有所变化；经ＧａｌＮ／ＬＰＳ体内作用后分离的Ｋｕｐｆｆｅｒ细胞与正常肝细胞混合培养，加入ＬＰＳ、ＴＮＦ及ＬＰＳ／ＴＮＦ－α均可致ＬＤＨ漏出显著增高（Ｐ＜０．０ｌ），多粘菌素Ｂ及抗－ＴＮＦ能分别完全和部分阻断此效应；经ＬＰＳ或ＴＮＦ－α体内作用后抽取的大鼠血清，加入培养肝细胞可致ＬＤＨ漏出显著增高（Ｐ＜０．０１）与ＭＴＴ显著降低（Ｐ＜０．０５），经５６℃灭活后此细胞毒性作用完全消失。上述结果提示，ＬＰＳ及其介质ＴＮＦ无肝细胞直接毒性作用，而经其活化的Ｋｕｐｆｆｅｒ细胞可能引起一系列瀑布效应，导致肝细胞损害。
- 王宇明丁健顾长海刘国栋袁良平陈国致
- 关键词：内毒素肿瘤坏死因子肝细胞损害肝瘤
- 反义寡核苷酸对H1δ9细胞中了型肝炎病毒被引量：1
- 1999年
- 在Ｈ-１δ９细胞中观察反义寡核苷酸（ＡＳＯＤＮ）及其硫代修饰物（Ｓ－ＡＳＯＤＮ）对丁型肝炎病毒（ＨＤＶ）基因复制与表达的抑制作用。方法在分子水平证实互补于ＨＤＶ基因链核酶自裂位点和Ｓｔｅｍｌ区的ＡＳＯＤＮ可抑制核酶自裂的基础上，进一步台成针对该区６８４－６９８位核苷酸的１５聚ＡＳＯＤＮ及Ｓ－ＡＳＯＤＮ，在培养的ＨＩδ细胞中加人不同寡核苷酸，分别采用ＥＬＩＳＡ和斑点杂交法检测上清中ＨＤＡｇ及细胞中的ＨＤＶｃＤＮＡ。结果加人终浓度为６μｍｏｌ／Ｌ的Ｓ－ＡＳＯＤＮ后２４ｈＨ１δ９细胞中ＨＤＶＲＮＡ复制及ＨＤＡｇ分泌均受抑制，抑制率分别为８４５％和７６．１４％。Ｓ－ＡＳＯＤＮ的终浓度为２、４、６μｍｏｌ／Ｌ时，其抑制作用呈剂量依赖关系。在同等剂量时，ＡＳＯＤＮ与Ｓ－ＡＳＯＤＮ抑制作用相近。结论提示所用ＡＳＯＤＮ及Ｓ－ＡＳＯＤＮ均能有效抑制转基因细胞中ＨＤＶ基因的复制与表达，为进一步在动物体内研究Ｓ－ＡＳＯＤＮ抗ＨＤＶ的作用提供了实验依据。
- 李宏文毛青李奇芬王升启朱宝珍郑红丁健
- 关键词：反义寡核苷酸丁型肝炎病毒基因复制
- 大鼠肝细胞的简易分离与聚集培养被引量：6
- 1996年
- 大鼠肝细胞的简易分离与聚集培养王英杰，李梦东，王宇明，丁健培养肝细胞作为理想的体外模型，在肝病研究中日益发挥着重要作用，但经典胶原酶原位灌流法技术难度大，普遍单层法培养的肝细胞存活时间短，故在一定程度上限制了肝细胞培养的广泛开展。鉴此，我们采用体外简...
- 王英杰李梦东王宇明丁健
- 关键词：肝细胞
- 人胎肝细胞培养上清对大鼠肝细胞增殖作用的初步观察
- 1997年
- 目的观察培养人胎肝细胞分泌上清（ＦＨＣＳ）对培养大鼠肝细胞的影响。方法用相差显微镜动态观察培养大鼠肝细胞的形态变化，并用放免分析法检测其ＤＮＡ合成量。结果ＦＨＣＳ对鼠肝细胞的原代培养有明显作用，表现为大鼠肝细胞增殖活跃、生长旺盛，维持正常形态及存活时间延长，肝细胞ＤＮＡ合成量明显增加（Ｐ＜０．０１）。结论ＦＨＣＳ对体外大鼠肝细胞有明显的增殖刺激作用，该作用可能与分离、培养胎肝细胞过程中分泌产生的多种细胞因子和营养物质有关，并为早期胎肝细胞悬液治疗重型肝炎的可能机理。
- 王英杰王宇明李梦东丁健陈国致
- 关键词：肝细胞肝炎
- 内毒素诱导产生的一氧化氮对体外肝细胞的损伤作用被引量：1
- 1999年
- 目的 探讨NO在LPS所致肝损害中的作用。方法 采用LPS刺激体外肝细胞、Kupffer细胞或两者混合培养,观察NO产生情况及培养肝细胞形态改变。结果 LPS刺激后,各级培养上清中NO产物水平均显著升高,尤其Kupffer细胞单独培养及肝细胞/Kuppffer细胞混合培养组升高更加显著,分别约为对照组的10倍和8倍,并且混合培养组中肝细胞形态出现明显改变,贴壁肝细胞变小、变园,核内染色质致密、结块,部分染色质边积,核膜皱折变形。而加用iNOS抑制剂氨基胍则培养上清中NO产物水平明显降低(约降低60％～65％),肝细胞形态未见明显改变。结论 通过诱导肝细胞、尤其Kupffer细胞产生大量NO而介导肝细胞损伤可能是LPS所致肝损害的重要机理之一。
- 张明森王宇明顾长海丁健刘国栋
- 关键词：内毒素一氧化氮肝细胞KUPFFER细胞体外
- 血小板活化因子对体外培养肝细胞的作用被引量：9
- 1999年
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- 何云王宇明何燕袁凤仪丁健
- 关键词：血小板活化因子肝细胞KUPFFER细胞肝损伤
- 重型肝炎患者血中性粒细胞吞噬功能及超微结构的变化被引量：4
- 1999年
- 多种肝病患者血中性粒细胞（ＰＭＮｓ）存在数量及质量的变化，它不仅是患者易于发生各种感染的原因，而且在肝损伤的发病机制中具有重要作用［１］。为此，我们对以重型肝炎为主的病毒性肝炎患者进行了ＰＭＮｓ功能及超微结构的研究，现报告如下。材料与方法一、一般资料...
- 王宇明王英杰丁健刘友生
- 关键词：肝炎重型肝炎中性粒细胞
- 大鼠肝细胞的微载体粘附培养被引量：5
- 1997年
- 为探讨简便、实用、长期培养肝细胞的有效方法,以cytodex 3为材料,对Wistar大鼠肝细胞进行微载体粘附培养。结果发现:分离的肝细胞经限制贴壁、定期旋转后粘附于被覆胶原的微载体上呈浮游生长。存活并保持正常形态与白蛋白分泌功能平均达1月之久。因此,用微载体粘附方法可进行肝细胞的长时间、高活性及高密度培养。在肝细胞移植、生物人工肝等领域的研究中具有一定的实用价值。
- 王英杰李梦东王宇明丁健黄文琦
- 关键词：肝细胞微载体
