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黄永章: 作品数：126 被引量：379H指数：11; 供职机构：湖北医药学院附属人民医院更多>>; 发文基金：湖北省自然科学基金国家自然科学基金湖北省高等学校优秀中青年科技创新团队计划项目更多>>; 相关领域：医药卫生生物学更多>>

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银杏叶提取物预处理对小鼠局灶性脑梗死的保护作用被引量：2: 2009年; 目的观察银杏叶提取物(GBE)对小鼠局灶性脑梗死是否具有保护作用。方法健康成年雄性昆明小鼠随机分为假手术组、模型组以及GBE预处理组。用线栓法制作小鼠永久性大脑中动脉闭塞模型。假手术组及模型组术前30min腹腔注射0.9%氯化钠注射液0.4ml,GBE预处理组腹腔注射舒血宁35mg/kg。按八级行为评分法记录小鼠清醒后神经功能缺损程度,TTC染色测定梗死体积,黄嘌呤氧化酶法测定SOD1活性,TBA法测定丙二醛(MDA)含量,TUNEL测定细胞凋亡。结果与模型组相比,GBE预处理组小鼠术后24h神经功能缺损评分下降,梗死体积缩小,SOD1活性升高,MDA含量减少,神经元凋亡减轻。结论GBE对小鼠局灶性脑梗死具有一定保护作用,提高SOD1活性为其发挥保护作用的机制之一。; 董敏席刚明杨建业黄永章郭凌郧孔霞郑飞; 关键词：脑梗死银杏叶提取物

全反式维甲酸对大鼠腹主动脉球囊损伤后内膜增生的影响: 2002年; 目的 :研究全反式维甲酸 (ATRA)对球囊损伤大鼠腹主动脉内膜增生的影响。方法 :制作球囊损伤的大鼠腹主动脉剥脱模型 ,Wistar大鼠 12只随机分为 1对照组 (n=6) :腹腔内注射 intralipid(1ml/d) ,2 ATRA组 (n=6) :腹腔内注射溶解于 intralipid的 ATRA(4 mg· kg-1 · d-1 )。球囊损伤 14 d后 ,损伤区域的血管段用 40 g/L甲醛固定 ,然后染色 ,进行组织学观察和形态学分析。结果 :ATRA明显减小新生内膜面积 ,增加管腔面积。结论 :ATRA具有抑制损伤血管内膜增生的作用。; 党书毅王家宁黄永章王卫民陈霞萍刘志祥周芳张群林; 关键词：全反式维甲酸腹主动脉球囊损伤内膜增生

痹康灵对骨关节炎治疗作用的实验研究被引量：21: 2004年; 为观察痹康灵对骨关节炎 (OA)的治疗效果并探讨其作用机制 ,将 32只中国白兔分为正常对照组 (A组 )、空白对照组 (B组 )、西药对照组 (C组 )、中药治疗组 (D组 ) ,每组各 8只 ,A组不造模 ,B、C、D组均采用Hulth法建立兔OA模型。术后 3天给予A和B组生理盐水 ,C组罗非昔布溶液 ,D组痹康灵 ,每天各 6ml·kg-1,灌胃给药。自术后第 1周每天驱赶动物 2次 ,共 30分钟 ,4周后取右侧胫骨平台关节软骨和滑膜进行光镜观察。采用免疫组化检测法分别检测关节软骨和滑膜中的白细胞介素 1β(IL β)、基质金属蛋白酶 1(MMP 1)、基质金属蛋白酶 3(MMP 3)的水平。结果显示 ,B组IL 1β ,MMP 1、MMP 3的水平均非常显著高于A组(P <0 .0 1) ,并均显著高于C组 (0 .0 1
0 .0 5 )。光镜观察 ,B组退变较其余 3组明显 ;C组与D组间退变不明显 ;但 2组退变均甚于A组。表明痹康灵能抑制IL 1β、MMP 1、MMP 3的产生 ,具有抗炎、保护和修复关节软骨的作用。; 张磊胡阿威张功礼邓长康禹志宏何文芝施永彦张昊黄永章王家宁杨洪平余永桂; 关键词：动物

PEP-1介导过氧化氢酶对大鼠离体心肌缺血再灌注损伤的保护作用: 2009年; 目的:研究细胞穿透肽PEP-1携带过氧化氢酶(CAT)穿透大鼠离体心肌的能力,并探讨PEP-1-CAT融合蛋白预处理对大鼠离体心肌缺血-再灌注损伤的保护作用及其机制。方法:建立大鼠离体心脏Langendorff灌流模型,随机分为5组(n=10):缺血-再灌注组(I/R组)行平衡30 min、停灌30 min与再灌注60 min,CAT组、PEP-1-CAT融合蛋白预处理组(A、B、C、D组)在平衡15 min后依次以10,5,10,20μmol/L的融合蛋白预处理15 min,停灌、复灌与I/R组相同。记录各组左室舒张末压(LVEDP)、左室收缩压(LVSP)、左室内压最大变化速率(±dp/dtmax)及冠脉流量(CF)变化,测定平衡15 min时、再灌注15 min时冠脉流出液乳酸脱氢(LDH)活性。测定再灌注60 min时心肌丙二醛(MDA)含量。结果:PEP-1-CAT融合蛋白能高效转导入离体心肌组织并呈现剂量依赖性。在平衡15 min末,各组LVEDP、LVSP、±dp/dt max以及LDH活性比较差异无统计学差异(P>0.05)。与I/R组比较,B、C、D组在再灌注后各时间点LVEDP降低(P<0.01),LVSP、±dp/dt max以及CF升高(P<0.01),灌注15 min时冠脉流出液LDH活性降低(P<0.01),再灌注后60 min心肌MDA含量降低(P<0.01)。CAT处理组所有结果和对照组相比无统计学意义(P>0.05)。结论:PEP-1-CAT融合蛋白能高效转导入离体心肌织并对大鼠离体心肌缺血-再灌注损伤具有明显的保护作用,将为其治疗心肌缺血再灌注损伤奠定坚实的实验基础。; 王磊王家宁柯尊平黄永章唐俊明杨建业; 关键词：再灌注损伤过氧化氢酶氧自由基

人突变p27基因对大肠癌细胞SW480生长的影响: 2005年; 目的:观察人突变p27基因(p27mt)对人大肠癌细胞生长的影响,探讨p27mt基因在大肠癌基因治疗中的作用机制。方法:以携带突变p27基因复制缺陷型腺病毒(Ad-p27mt)为载体,转染大肠癌细胞SW480;用Westernblot方法检测p27mt蛋白的表达;细胞计数法检测p27mt对SW480细胞生长的抑制作用;用流式细胞仪检测细胞周期;用DNA片段分析法检测细胞凋亡。结果:通过免疫印迹分析Ad-p27mt转染SW480细胞后,p27在细胞中出现了蛋白高表达。PI染色流式细胞仪检测77.96%的细胞阻滞于G0/G1期,而Ad-LacZ组及空白对照组分别为27.57%和25.29%;生长曲线显示Ad-p27mt对细胞生长就有明显的抑制作用;DNA片段分析示p27mt基因可诱导细胞的凋亡。结论:p27mt对细胞周期有明显的阻滞作用,主要阻滞于G0/G1期;p27mt基因对细胞的生长抑制机制与诱导细胞凋亡和细胞周期的阻滞有关。; 徐少勇陈珺邓长生王家宁黄永章; 关键词：大肠癌凋亡

PEP-1-CAT预处理对H9c2细胞缺氧复氧损伤的保护作用: 2012年; 目的:探讨细胞穿透肽PEP-1介导的人过氧化氢酶(catalase,CAT)对H9c2细胞缺氧复氧损伤的保护作用。方法:利用基因工程方法表达和纯化His-tag-PEP-l-CAT融合蛋白,将H9c2细胞随机分为正常对照组(CTL)、缺氧复氧组(H/R)、H/R加CAT组(H/R+CAT)、H/R加PEP-1-CAT组(H/R+PEP-1-CAT)。分别向H/R+PEP-1-CAT及H/R+CAT组加入2 mol/L的PEP-1-CAT及CAT500μl处理6 h,将各组细胞置于缺氧箱中缺氧21 h,再复氧6 h。采用试剂盒检测乳酸脱氢酶(LDH)及丙二醛(MDA)水平;通过流式细胞仪检测细胞的凋亡水平;通过Western blot检测凋亡蛋白Bcl-2、Bax的表达。结果:与H/R组相比,H/R+PEP-1-CAT组的细胞的LDH、MDA、细胞的凋亡率及Bax的表达量均明显下降,Bcl-2的表达量升高(P<0.05)。结论:PEP-1-CAT预处理通过抗氧化和抗凋亡的作用发挥对H9c2细胞缺氧复氧损伤的保护作用。; 魏双王家宁唐俊明黄永章郭凌郧张蕾郑飞孔霞; 关键词：缺氧复氧过氧化氢酶 H9C2细胞

调经活血汤对多囊卵巢大鼠卵巢颗粒细胞凋亡的影响及机制研究被引量：10: 2009年; 目的研究调经活血汤对多囊卵巢(PCO)大鼠的血清激素水平、卵巢质量、形态及卵巢颗粒细胞凋亡等的影响,探讨其治疗效果及作用机制。方法大鼠造模成功后随机分成中药治疗组和对照组,观察动物体重增加幅度、血清激素水平变化情况,末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记法(TUNEL)观察卵巢颗粒细胞凋亡,免疫组化法观察颗粒细胞凋亡调控蛋白Bcl-2、Bax表达水平的变化。结果治疗组动物体重增加幅度明显降低,中药治疗组血清T浓度较对照组、正常组显著性降低;血清E2较对照组明显降低;血清P水平较对照组明显升高,血清FSH、LH浓度与对照组无明显差异。中药治疗组卵巢镜下可见多个囊状扩张的卵泡,但体腔较对照组明显缩小,颗粒细胞层数增加至4～7层,并可见少量黄体形成;中药治疗组卵巢颗粒细胞凋亡率较对照组显著降低,卵巢颗粒细胞Bcl-2表达的OD值较对照组显著增高,Bax表达的OD值显著降低。结论调经活血汤能使多囊卵巢大鼠卵巢颗粒细胞凋亡相关蛋白bcl-2表达明显升高,Bax表达明显降低,巢颗粒细胞凋亡率显著性降低;卵巢颗粒细胞层数增加,黄体形成增加:体重、血清T、E2激素水平明显下降,血清P激素水平明显升高,其作用可能与调节卵巢颗粒细胞上Bcl-2和Bax蛋白表达,影响两蛋白的比例关系,增加Bcl-2/Bax的比值,使Bax与Bcl-2蛋白形成异源二聚体,发挥其抗细胞凋亡的作用有关。; 胡亮亮胡平黄光荣段迎春张冬霞杨建业黄永章李进周爱枝; 关键词：多囊卵巢综合征颗粒细胞细胞凋亡

靶向克隆法构建NY-ESO-1基因的原核表达载体被引量：1: 2009年; 目的:利用PCR产物靶向克隆法构建人癌-睾丸抗原NY-ESO-1的原核表达载体。方法:从人新鲜的食管癌组织中提取总RNA,通过RT-PCR技术扩增NY-ES0-1基因3′端的340bp片段,采用靶向克隆法将目的基因插入到原核表达载体pET-15b中,得到重组表达质粒pET-15b-NY-ESO-1,经过筛选,挑选出阳性克隆进行XhoⅠ和BamHⅠ双酶切图谱分析、PCR检测和扩增产物核苷酸序列分析等,鉴定所构建的原核表达载体。结果:扩增得到NY-ESO-1基因片段,经测序证实与GenBank公布的序列一致,重组的质粒经过PCR,酶切鉴定获得了一个大小为340bp的特征性片段,证明重组质粒中已成功的插入了目的基因NY-ESO-1。结论:靶向克隆法可快速、高效地构建人NY-ESO-1基因的原核表达载体,为制备pET-15b-NY-ESO-1融合蛋白奠定了基础。; 俞远东徐少勇王斌王家宁黄永章; 关键词：原核表达

PCR靶向克隆法构建携带人类神经生长因子β基因的含有EGFP的重组腺病毒穿梭质粒: 2009年; 目的:在靶向克隆酶的作用下,利用PCR靶向克隆构建携带人神经生长因子的重组腺病毒穿梭质粒pShuttle-hNGFβ-EGFP。方法:按PCR引物设计原则设计两条引物,分别在上下游引物的5′端加上12个碱基与线性化载体切口两端同源载体序列,引物合成后PCR反应扩增目的基因hNGF-β,提纯后与EcoRⅤ酶切的穿梭质粒pShuttle-IRES-hrEGFP在靶向克隆酶(LPReccoenzyme)的作用下37℃孵育15min,转化感受态大肠杆菌,碱裂解法制备及纯化质粒DNA。结果:EcoRⅤ酶切鉴定证实pShuttle-hNGFβ-EGFP构建成功。结论:在不需要限制性内切酶的情况下用靶向克隆酶连接可快速、准确得到穿梭质粒pShuttle-hNGFβ-EGFP。; 谢华王清秀王家宁肖敏黄永章; 关键词：穿梭质粒神经生长因子

细胞穿透肽PEP-1介导增强型绿色荧光蛋白转导人结直肠癌SW480细胞被引量：3: 2007年; 背景与目的:细胞穿透肽是近年来发现的一类能介导大分子物质跨膜转导的小分子肽段,本实验研究细胞穿透肽PEP-1携带大分子蛋白穿透人结直肠癌细胞SW480的能力。方法:用基因工程的方法制备并纯化EGFP蛋白和PEP-1-EGFP融合蛋白,将纯化后的两种蛋白与体外培养的人结直肠癌细胞共同孵育,在荧光显微镜下直接观察PEP-1介导目的蛋白EGFP转导入SW480细胞的能力。结果:EGFP蛋白不能进入细胞内,PEP-1-EGFP融合蛋白和SW480细胞共同孵育1h后可见有明亮绿色荧光分布于胞浆和胞核。结论:PEP-1能有效携带目的蛋白进入人结直肠癌细胞。; 董晓王家宁黄永章郭凌郧孔霞; 关键词：细胞穿透肽蛋白转导绿色荧光蛋白 SW480细胞

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