黄帅帅
- 作品数:6 被引量:11H指数:2
- 供职机构:宁波大学医学院更多>>
- 发文基金:浙江省自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- 转录因子环磷酸腺苷反应元件结合蛋白在紫杉醇诱导HeLa细胞周期阻滞中的作用及其机制被引量:4
- 2014年
- 目的探讨转录因子环磷酸腺苷反应元件结合蛋白(CREB)在紫杉醇诱导宫颈腺癌HeLa细胞周期阻滞中的作用及其分子机制。方法 MTT法确定紫杉醇的最佳浓度和处理时间;PCR技术构建pCI neo/CREB(PN)重组质粒及pCI neo/CREB-M(PM)定点突变质粒;流式细胞术检测细胞周期,Western blotting检测磷酸化CREB(pCREB)、CREB、cyclins以及CDKs蛋白表达。结果紫杉醇抑制HeLa细胞增殖的有效条件为0.1μmol/L处理24 h。0.1μmol/L紫杉醇诱导G2/M细胞数量增加,并呈时间依赖性;cyclin A表达量下调,cyclin B1、D1和pCREB表达量上调。此外,紫杉醇的处理对cyclin E、CDK1、CDK2、CDK4和CREB表达量并无显著性改变。然而,PM联合紫杉醇处理后显著性地反转了紫杉醇单独处理引起的cyclin A下调、cyclin B1和cyclin D1的上调,并且细胞周期G2/M期阻滞显著性减少。结论转录因子CREB介导的靶向细胞周期蛋白表达在紫杉醇诱导的细胞周期阻滞过程中扮演重要角色。
- 黄帅帅王雪庄海慧王宇多周细武王萍
- 关键词:环磷酸腺苷反应元件结合蛋白细胞周期流式细胞术免疫印迹法
- 用于检测细胞骨架亚型基因的单细胞实时定量PCR检测方法及其应用
- 本发明涉及医学细胞和分子生物学领域,尤其是涉及一种用于检测细胞骨架亚型基因的单细胞实时定量PCR检测方法及其应用。一种用于检测细胞骨架亚型基因的单细胞实时定量PCR检测方法,该方法包括以下的步骤:1)重组载体pPCR-S...
- 王萍王维莉黄帅帅
- 细胞骨架和cAMP/PKA信号通路的互动效应调控细胞行为的研究进展被引量:4
- 2014年
- 细胞骨架的运动变化是一个多蛋白和多步骤参与的复杂过程。研究表明,环状腺苷酸(cyclic adenosine monophosphate,cAMP)作为第二信使,参与调控多种细胞信号转导,从而调控细胞骨架重排过程及其介导的细胞分裂、迁移、分化和黏附等。然而,另有文献报道,细胞骨架纤维排列首先通过影响信号通路中蛋白激酶的活性,进而影响细胞行为。该文结合课题组的实验结果就细胞骨架和cAMP信号通路互动效应调控细胞行为的研究进展作一综述。
- 黄帅帅王宇多王萍
- 关键词:CAMP细胞骨架细胞行为信号通路
- RhoA/ROCKI信号通路在紫杉醇诱导宫颈癌细胞周期阻滞中的作用被引量:2
- 2013年
- 目的探讨RhoA/ROCKI信号通路在紫杉醇诱导宫颈癌细胞周期阻滞中的作用及其分子机制。方法 MTT法确定能引起细胞生长显著性抑制最小浓度(1μmol/L)的紫杉醇。流式细胞仪检测细胞周期和RhoA蛋白表达,Western blotting检测ROCKI、细胞周期蛋白(cyclins)及周期依赖性激酶(CDKs)的表达。结果紫杉醇处理C33A细胞后,G2/M细胞数和RhoA/ROCKI蛋白表达显著性增加,并呈时间依赖性;而cyclin B1、A、D1和CDK1蛋白表达显著性降低。上述现象被RhoA抑制剂C3转移酶全部反转;却被ROCKI蛋白抑制剂Y-27632部分反转,但与对照相比差异仍显著。紫杉醇或RhoA/ROCKI抑制剂对CDK2的表达无显著性影响。结论紫杉醇诱导了宫颈鳞癌C33A细胞的G2/M期阻滞,其机制与RhoA活性增强后抑制特异的cyclins和CDKs有关,而下游通路中ROCKI活性仅起到部分作用。
- 王维莉王萍王峰黄帅帅任雨
- 关键词:RHOA周期蛋白周期蛋白依赖性激酶免疫印迹法
- 用于检测细胞骨架亚型基因的单细胞实时定量PCR检测方法及其应用
- 本发明涉及医学细胞和分子生物学领域,尤其是涉及一种用于检测细胞骨架亚型基因的单细胞实时定量PCR检测方法及其应用。一种用于检测细胞骨架亚型基因的单细胞实时定量PCR检测方法,该方法包括以下的步骤:1)重组载体pPCR-S...
- 王萍王维莉黄帅帅
- 文献传递
- 转录因子CREB在紫杉醇抗肿瘤活性中的作用及其分子机制研究
- 背景意义近年来大量研究表明,cAMP反应元件结合蛋白(cAMP-response elementbinding protein, CREB)作为原癌性核转录因子,参与肿瘤发生发展过程。传统观点认为,细胞接受外界刺激后活化...
- 黄帅帅
- 关键词:钙敏感受体细胞周期蛋白细胞周期蛋白依赖性激酶细胞周期细胞骨架
- 文献传递