鲁琨
- 作品数：18 被引量：36H指数：3
- 供职机构：河南农业大学牧医工程学院更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划“十一五”国家科技支撑计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
- 囊尾蚴病诊断抗原研究进展
- 囊尾蚴病是一种人畜共患寄生虫病,广泛分布于亚洲、非洲和拉丁美洲,全球囊尾蚴病患者约5000 万人,我国是囊尾蚴病高发区之一。囊尾蚴病的有效诊断是控制该病的关键,免疫学诊断方法,尤其是酶联免疫吸附试验(Enzyme-Lin...
- 石团员张龙现菅复春赵光辉鲁琨宁长申
- 关键词：囊尾蚴病诊断抗原
- 文献传递
- 猪囊尾蚴排泄分泌抗原M13h基因的真核表达质粒的构建及表达分析
- 2009年
- 根据GenBank中的参考序列设计并合成引物序列，从pMDM13h中扩增带酶切住点和His—tag的基因序列；用HindⅢ和XhoⅠ双酶切PCR扩增产物和pcDNA3．0载体，连接构建真核表达重组质粒pc3M13h，利用PCR，双酶切和测序鉴定其正确性；重组质粒pc3M13h转染COS-7细胞，瞬时表达的转染细胞（96孔板）在转染36．48h后，应用双抗体夹心酶联免疫吸附试验和免疫细胞化学，分别检测pc3M13h在COS-7细胞培养上清液和细胞内的表达．结果表明，设计合成的引物成功扩增了带有酶切位点和His—tag的基因序列；成功构建了真核表达重组质粒pc3M13，双抗体夹心酶联免疫吸附试验和免疫细胞化学检测显示，pc3M13h重组质粒不但能够在COS-7细胞中进行表达，而且能够进行微量的分泌表达．
- 赵光辉鲁琨张改平宁长申王选年张龙现菅复春宋海涛
- 关键词：猪囊尾蚴排泄分泌抗原基因表达
- 利用荧光标记的T7噬菌体研究配体/受体的相互作用被引量：1
- 2008年
- 将鸡传染性法氏囊病病毒(IBDV)衣壳蛋白VP2展示到T7噬菌体表面,以FITC标记纯化的重组噬菌体,通过荧光显微镜观察与流式细胞仪检测,研究标记噬菌体与病毒受体细胞——法氏囊B细胞的相互作用。结果展示有IBDVVP2蛋白的噬菌体经FITC标记后仍然具有与受体细胞结合的特性,荧光显微镜下可见绿色荧光,流式数据显示其平均荧光强度明显高于阴性对照,且IBDV疫苗株TAD可明显阻断其结合。由此得出结论,FITC标记与噬菌体展示技术相结合,可进行配体/受体间相互作用的研究。
- 李姣王爱萍张红张改平王选年易明林鲁琨王秋霞冯丽丽
- 关键词：噬菌体展示VP2蛋白
- 猪囊尾蚴排泄分泌抗原Ts8B1蛋白原核表达条件的优化被引量：14
- 2009年
- 研究了培养基、温度、诱导时间I、PTG和氨苄青霉素终浓度以及诱导前后温度变化等不同条件对重组菌菌体生长和融合蛋白表达量的影响,以期获得猪囊尾蚴排泄分泌抗原(ES Ag)Ts8B1蛋白基因在大肠杆菌中的最大表达量。结果显示,使用TB培养基于37℃培养3 h后,采用终浓度为0.2mmol/L的IPTG和200mmol/L的氨苄青霉素在32℃过夜诱导培养,pGEX-6p-1/Ts8B1融合蛋白表达量最大,表达的融合蛋白约占菌体总蛋白的33%。SDS-PAGE表明pGEX-6p-1/Ts8B1融合蛋白大小约为33 kDa,与预计的分子量大小一致,Western blot分析表明其能与猪囊尾蚴多克隆抗体起特异性反应,并获得最大产量的融合蛋白。为研究其在猪囊尾蚴病检测中的应用价值奠定了基础。
- 王秋霞张美英张改平王选年宁长申鲁琨张龙现菅复春
- 关键词：猪囊尾蚴排泄分泌抗原原核表达
- 抗隐孢子虫IgY抗体体外动物感染治疗试验
- 应用抗贝氏隐孢子虫(C.baileyi)特异性IgY抗体,进行实验动物人工感染隐孢子虫的治疗试验, 设定大、中、小三个抗体治疗剂量,对发病期雏鸡进行治疗,同步与阳性对照感染组、阴性IgY治疗组进行治疗效果的比较,观察治疗...
- 邵兆霞张龙现宁长申菅复春鲁琨马超峰朱慧丽卢庆斌
- 关键词：隐孢子虫病卵黄抗体
- 文献传递
- 猪囊尾蚴排泄分泌抗原Ts8B2基因的克隆、表达及纯化被引量：2
- 2008年
- 利用RT-PCR技术克隆了猪囊尾蚴排泄分泌抗原Ts8B2蛋白基因,测序结果表明:序列长度为270bp,包含258bp的编码区,编码85个氨基酸,与GenBank中西班牙分离株的核苷酸和氨基酸序列的同源性均为99%;将该基因成熟肽部分亚克隆至原核表达载体pGEX-6p-1,转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导后,进行SDS-PAGE初步分析,在34ku位置有1条蛋白条带,与预期结果一致。通过GST亲和纯化获得了较高纯度的重组融合蛋白,Western blot结果表明,纯化后的重组融合蛋白可与兔抗全囊囊尾蚴血清发生特异性反应。排泄分泌抗原Ts8B2的成功表达、纯化为进一步研究该蛋白在抗体检测中的应用奠定了基础。
- 王秋霞张改平乔松林鲁琨王选年王丽宁长申张龙现菅复春张丽萍
- 关键词：猪囊尾蚴克隆纯化
- 猪囊尾蚴10kD基因的克隆、表达及重组蛋白ELISA方法的建立
- 猪囊尾蚴病是一种重要的人畜共患寄生虫病,不但引起猪肉品质下降,而且给人类健康造成重大危害。目前,猪囊尾蚴病的免疫诊断和免疫预防是国内外学者的关注的热点。本研究通过基因工程方法克隆猪囊尾蚴囊液10kD基因,构建重组表达载体...
- 鲁琨
- 关键词：猪囊尾蚴病蛋白纯化间接ELISA
- 隐孢子虫细胞免疫作用研究进展被引量：2
- 2008年
- 隐孢子虫病药物防治效果均不理想。因而,许多学者在隐孢子虫免疫方面进行了大量研究。本文综述了免疫细胞、细胞因子等介导的细胞免疫保护作用,以期为该病的细胞免疫和免疫防治提供参考。
- 王秋霞庞玉芳鲁琨宁长申张丽萍李娇刘运超
- 关键词：隐孢子虫病细胞免疫免疫细胞细胞因子
- 隐孢子虫细胞免疫作用研究进展
- 隐孢子虫是一种具有重要公共卫生意义的寄生性原虫,所致隐孢子虫病是一种全球性人畜共患病。多年来药物治疗的效果均不很理想。近年来许多学者在免疫学方面做了大量的研究,本文就免疫细胞、细胞因子等介导的细胞免疫作用进行了综述,以期...
- 王秋霞鲁琨宁长申李娇刘运超
- 关键词：隐孢子虫病细胞免疫免疫细胞细胞因子
- 文献传递
- 猪囊尾蚴排泄分泌抗原M13h蛋白原核表达条件的优化
- 2008年
- 为了提高猪囊尾蚴排泄分泌抗原(ES Ag)M13h蛋白基因在大肠杆菌中的表达量,试验研究了培养基、温度、转速、诱导时间以及诱导剂IPTG浓度等不同条件对pET32a-M13h融合蛋白表达量的影响。结果:使用TB培养基于37℃培养3 h后,采用终浓度为0.4 mmol/L的IPTG在37℃、100 r/min诱导培养4小时时,pET32a-M13h融合蛋白表达量最大;SDS-PAGE检测结果表明pET32a-M13h融合蛋白的分子质量与预计大小一致,约为30 ku;Western-blot检测结果表明pET32a-M13h融合蛋白能与猪囊尾蚴多克隆抗体发生特异性反应。
- 王秋霞鲁琨张改平宁长申赵光辉张丽萍冯丽丽
- 关键词：排泄分泌抗原原核表达
