魏永伟 作品数:10 被引量:26 H指数:3 供职机构: 宁波大学 更多>> 发文基金: 浙江省自然科学基金 国家自然科学基金 宁波市自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 农业科学 更多>>
一株大口黑鲈(Micropterus salmoides)虹彩病毒(Iridoviridae)的分离及鉴定 被引量:10 2020年 2018年7月,浙江省某大口黑鲈(Micropterus salmoides)养殖场暴发疑似病毒引起的疾病。现场采样发现,病鱼体长约15-20cm,鱼体于水面下暗游,反应迟钝,体表有出血点或溃疡症状。本研究通过采用鲤鱼上皮瘤细胞(epithelioma papulosum cyprinid,EPC)培养、超薄切片透射电镜观察、病毒主要衣壳蛋白(major capsid protein,MCP)克隆与测序分析等方法,从患病大口黑鲈中分离得到一株病毒,鉴定其属于虹彩病毒科蛙病毒属,命名为大口黑鲈虹彩病毒宁波分离株(LMBIV-NB001)。EPC经患病鱼组织匀浆液接种后出现细胞圆缩、死亡、脱落等典型的细胞病变症状。将感染后的EPC细胞制作超薄切片,通过电镜观察发现,EPC细胞质中存在大量直径约120nm具囊膜的正六边形成熟病毒粒子,形态与虹彩病毒相似。根据虹彩病毒MCP基因保守区域序列设计特异性引物对病鱼组织样本进行PCR扩增,获得了1029bp的目的基因片段。将该扩增片段连入pMD19-T simple质粒后测序,经BLAST比对分析显示,其与GenBank中已报道的鳜鱼蛙病毒NH-1609、大口黑鲈溃疡综合征病毒BG/TH/CU3、EPC060608-08的MCP基因同源性最高,相似度均达到99.13%。构建系统进化树分析表明,本研究分离的LMBIV-NB001株与NC_038508、GU256635、MG941005等虹彩病毒科蛙病毒属毒株聚成一簇。本论文研究结果为不同地区蛙病毒属成员的起源和分化等相关研究等提供了基础材料。 许峰 鲁建飞 魏永伟 苗亮 陈炯关键词:大口黑鲈 一种聚丙烯酰胺凝胶的制作装置 本实用新型公开了一种聚丙烯酰胺凝胶的制作装置,包括透明的前板、后板和梳状插块,前板和后板之间设置有两块竖直设置的间隔板,还设置有防漏槽,前板和后板并排插入防漏槽内,前板、后板、防漏槽和两块间隔板共同构成了可容纳聚丙烯酰胺... 许峰 陈炯 魏永伟文献传递 偏肺病毒对副粘病毒细胞融合的新注释 被引量:5 2014年 对于副粘病毒科中的大多数病毒而言,细胞融合过程需要病毒的融合蛋白和吸附蛋白共同参与,其中吸附蛋白负责与受体结合,吸附蛋白与融合蛋白的相互作用激活融合蛋白进而激活细胞融合。而偏肺病毒介导的细胞融合则与上述副粘病毒的融合显著不同,所有已报道偏肺病毒介导的细胞融合不需要吸附蛋白的参与,其融合蛋白可单独完成与受体结合和融合。并且近年研究发现有些人偏肺病毒毒株介导的融合需要低pH条件,禽偏肺病毒A型具备极强的融合能力,而禽偏肺病毒B型则较弱。原有的副粘病毒细胞融合理论模型均不能解释上述现象,偏肺病毒介导的这种融合机制目前还不清楚,其研究在近几年日趋成为细胞融合机制研究的热点。近年发现的偏肺病毒介导的融合现象打破了人们对副粘病毒融合的固有理解,拓展了人们对副粘病毒介导的细胞融合的认识。本文旨在对偏肺病毒介导的细胞融合的最新成果和进展加以综述和讨论。 刘晓瑜 章晓栋 魏永伟关键词:偏肺病毒 细胞融合 融合蛋白 人呼吸道合胞病毒小疏水蛋白研究进展 2017年 人呼吸道合胞病毒是人呼吸道感染病原中的重要病原。SH蛋白是人呼吸道合胞病毒粒子表面的一种小分子糖蛋白,可形成五聚体的离子通道结构。SH蛋白是人呼吸道合胞病毒复制的非必需蛋白,但可以影响病毒融合蛋白介导的细胞融合,近年研究发现SH蛋白胞外区与血蓝蛋白形成的复合物可作为人呼吸道合胞病毒疫苗的抗原,产生的抗体在体内能清除病毒感染的细胞。本综述旨在对人呼吸道合胞病毒SH蛋白最新研究成果进行总结和讨论,并对未来针对SH蛋白的研究方向加以展望。 刘晓瑜 魏永伟对虾传染性皮下及造血组织坏死病毒编码蛋白的相互作用研究 2016年 采用Matchmaker酵母双杂交系统,将对虾传染性皮下及造血组织坏死病毒(Infection hypodermal and hematopoietic necrosis virus,IHHNV)编码蛋白NS1、NS2和CP序列分别构建到酵母猎物载体p GADT7和诱饵载体p GBKT7上,分别转化至酵母AH109以检测重组猎物载体和诱饵载体的自激活作用及对宿主的毒性作用,发现无自激活作用和毒性作用,随后将重组猎物载体和诱饵载体两两共转至酵母AH109中,涂布于SD/-Leu/-Trp固体培养基上,再点种至SD/-Ade/-His/-Leu/-Trp/X-α-gal固体培养基以鉴定编码蛋白间的相互作用。表型鉴定结果显示,只有共转化有p GADT7-CP/p GBKT7-CP的酵母重组子能够在SD/-Ade/-His/-Leu/-Trp/X-α-gal上生长并显蓝,而其它重组子均不能在其上生长,表明病毒的CP能够自身互作,而其他编码蛋白间无相互作用。为了进一步研究病毒CP自身互作的作用位点,分别从CP的N端和C端截短若干个氨基酸序列,结果发现CP的自身互作是高度敏感的,任何较少氨基酸序列的缺失都将导致其自身互作的丧失。本研究为深入探讨病毒的组装机制和致病机理奠定了理论基础。 陈沈雪 魏永伟 苗亮 陈炯关键词:编码蛋白 相互作用 酵母双杂交 呼吸道合胞病毒膜融合机制的研究进展 被引量:3 2015年 呼吸道合胞病毒(Respiratory syncytial virus,RSV)是一种在世界范围内引起儿童急性下呼吸道感染的最为常见的重要病原。RSV介导的膜融合不需要吸附蛋白的参与,融合蛋白可单独完成膜融合过程,这与其它副粘病毒显著不同,其它主要副粘病毒介导的膜融合需要融合蛋白和吸附蛋白的共同参与。本综述就RSV膜融合相关研究的最新高水平论文加以综述,对目前流行的几种RSV膜融合理论解释模型加以比较分析,同时根据自己的研究心得对当前相关膜融合研究的热点和争议加以讨论,以期对我国在这方面的研究有所借鉴和参考。 刘晓瑜 魏永伟关键词:副粘病毒 RSV 膜融合 偏肺病毒G蛋白:一个多变蛋白的多重角色 2018年 偏肺病毒包括人偏肺病毒和禽偏肺病毒,是感染人和禽的一种重要病原。G蛋白是偏肺病毒粒子表面的一种糖蛋白,属II型跨膜蛋白。不同种偏肺病毒G蛋白的大小和同源性差异巨大,发挥的生物学功能也显著不同,如在病毒的吸附过程、病毒介导的细胞融合、对病毒在体内外的复制能力影响以及免疫保护作用都有很大不同。同时,偏肺病毒G蛋白在免疫抑制和免疫逃避中也起着重要作用。目前国内开展的相关研究较少,本文对偏肺病毒G蛋白的最新研究成果和进展进行了综述和讨论,并对未来的相关研究进行了展望。 刘晓瑜 魏永伟关键词:偏肺病毒 G蛋白 蛋白结构 病毒复制 免疫 罗氏沼虾(Macrobrachium rosenbergii)传染性皮下和造血器官坏死病毒(IHHNV)的流行病学调查 被引量:10 2015年 传染性皮下和造血器官坏死病毒(infectious hypodermal and hematopoietic necrosis virus,IHHNV)是对虾养殖的重要病原之一,可感染多种虾种。罗氏沼虾(Macrobrachium rosenbergii)是中国养殖的重要沼虾品种之一。根据国际兽疫局(Office International des Epizooties,OIE)推荐的IHHNV检测方法,在中国大陆地区首次开展IHHNV在罗氏沼虾中的感染和流行情况调查。结果显示,在研究区的罗氏沼虾养殖区,IHHNV广泛流行,阳性率高达90%;但所有成年罗氏沼虾均未表现出明显的病症,仅表现为病毒的携带。通过基因序列分析显示,检测到的华南地区毒株属于Ⅰ型感染株,与菲律宾株进化关系较为接近;华东地区毒株属于Ⅱ型感染株,与东南亚株进化关系较近。本研究为IHHNV在罗氏沼虾内的感染、流行和防控提供了详细参考。 范东东 魏永伟 苗亮 陈炯关键词:罗氏沼虾 一种生化实验室用移液器 本实用新型公开了一种生化实验室用移液器,包括移液主体和吸头,所述的吸头和移液主体之间设置有扩展装置,所述的扩展装置的上部连接移液主体,扩展装置的下部设置有多个朝向四周的扩展孔,每个扩展孔与移液主体连通,每个扩展孔上设置有... 许峰 陈炯 魏永伟文献传递 一种植物组织培养实验用的剪刀 本实用新型公开了一种植物组织培养实验用的剪刀,包括剪柄和剪切部件,剪切部件包括两个向上弯曲的主剪切单体,所述的每个主剪切单体上设置有向上延伸的第一夹合部件,其优点是剪刀在倾斜伸入培养瓶中时,弯曲的剪切部件抵消了瓶中的剪刀... 许峰 陈炯 魏永伟文献传递