高海娜
- 作品数：10 被引量：34H指数：4
- 供职机构：中国农业科学院北京畜牧兽医研究所更多>>
- 发文基金：国家现代农业产业技术体系建设项目国家重点基础研究发展计划公益性行业(农业)科研专项更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 永生化奶牛乳腺上皮细胞系及其构建方法和应用
- 本发明公开了永生化奶牛乳腺上皮细胞系及其构建方法和应用。本发明以中国荷斯坦奶牛乳腺上皮细胞作为宿主细胞，用携带有SV‑40‑大T抗原的逆转录病毒载体感染宿主细胞，最终筛选获得一株稳定传代的永生化奶牛乳腺上皮细胞系，其微生...
- 郑楠胡菡王加启高海娜代文婷
- 文献传递
- 腺苷酸活化蛋白激酶/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白信号通路介导能量和必需氨基酸调控乳蛋白合成被引量：2
- 2015年
- 乳蛋白合成是以必需氨基酸为底物的耗能过程。腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)是AMPK信号通路的重要分子;可通过感受细胞能量状态的方式来维持能量平衡,从而为乳蛋白合成提供充足的能量。哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(m TOR)是AMPK信号通路重要的下游靶点;必需氨基酸主要以m TOR介导的信号通路调控乳蛋白合成。本文主要综述了能量和必需氨基酸通过AMPK/m TOR信号通路对乳蛋白合成调控的研究进展,旨在进一步阐明能量和必需氨基酸对乳蛋白合成调控的作用机理。
- 王珊珊王加启高海娜闫素梅郑楠
- 关键词：腺苷酸活化蛋白激酶雷帕霉素靶蛋白必需氨基酸乳蛋白
- 赖氨酸对原代奶牛乳腺上皮细胞中酪蛋白及mTOR信号通路相关基因表达的影响
- 本试验旨在探究单一添加不同浓度的赖氨酸对原代奶牛乳腺上皮细胞的增殖,以及mTOR信号通路介导的酪蛋白合成相关基因的影响。在试验期,细胞处理时用厄尔平衡溶液(EBSS)代替正常培养基,在此基础上依次添加不同浓度的赖氨酸,采...
- 高海娜郑楠胡菡李发弟王加启
- 关键词：奶牛乳腺上皮细胞酪蛋白MTOR基因表达
- 文献传递
- 亮氨酸或组氨酸通过哺乳动物雷帕霉素靶蛋白信号通路影响奶牛乳腺上皮细胞中酪蛋白的合成被引量：8
- 2015年
- 本试验以永生化奶牛乳腺上皮细胞系为模型，单一添加不同浓度的亮氨酸或组氨酸，检测酪蛋白和哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（ mTOR）信号通路相关基因的表达，旨在探讨亮氨酸和组氨酸通过mTOR信号通路影响酪蛋白合成的机制。以厄尔平衡溶液代替培养基，并设其为阴性对照，单一添加不同浓度的亮氨酸或组氨酸，分别采用噻唑蓝（ MTT）比色法检测永生化奶牛乳腺上皮细胞12和24 h的增殖；运用实时荧光定量PCR（ qRT？PCR）检测4个酪蛋白编码基因和8个mTOR信号通路相关基因mRNA表达量。结果表明：分别添加不同浓度亮氨酸或组氨酸12和24 h，细胞增殖趋势一致；与阴性对照组相比，分别添加0．15～5．40 mmol／L 亮氨酸或0．15～9．60 mmol／L组氨酸，永生化奶牛乳腺上皮细胞的数量均增加。与阴性对照组相比，当分别添加0．45～10．80 mmol／L亮氨酸6 h时，αs1－酪蛋白（ CSN1S1）、αs2－酪蛋白（ CSN1S2）和κ－酪蛋白（CSN3）基因表达均显著上调（P＜0．05）。当添加0．15～4．80 mmol／L 组氨酸6 h 时， CSN1S1、β－酪蛋白（CSN2）和CSN3基因表达均显著上调（P＜0．05）。在试验组中，当亮氨酸浓度为1．35 mmol／L时，mTOR信号通路相关基因mTOR、mTOR调控蛋白（ raptor）、mTOR复合物1中的绑定蛋白（GβL）、信号下游因子真核翻译起始因子4E结合蛋白1（4EBP1）和真核细胞翻译延伸因子2（eEF2）基因表达量最高。而核糖体S6蛋白激酶（S6K1）基因的表达量随着亮氨酸浓度的增加而减少。当添加组氨酸时，下游信号因子4EBP1、eEF2、真核翻译起始因子4E （ EIF4E）和核糖体蛋白S6（ rps6）基因的表达量随着组氨酸浓度的增加而增加，mTOR基因的表达量随着组氨酸浓度的增加而减少。在试验组中，GβL 的表达量在组氨酸的浓度达到4．80 mmol／L时最高；S6K1基因表达量在组氨酸的浓度�
- 高海娜胡菡王加启郑楠
- 关键词：亮氨酸组氨酸酪蛋白
- 组氨酸对体外培养奶牛乳腺上皮细胞β-酪蛋白及酪氨酸激酶2-信号转导与转录激活子5/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白信号通路相关磷酸化蛋白表达的影响被引量：9
- 2016年
- 本试验旨在研究不同浓度的组氨酸对体外培养奶牛乳腺上皮细胞β-酪蛋白及酪氨酸激酶2（JAK2）-信号转导与转录激活子5（STAT5）/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（m TOR）信号通路相关磷酸化蛋白表达的影响。将原代奶牛乳腺上皮细胞进行体外培养,分为对照组和7个试验组,采用无必需氨基酸的培养基,对照组不添加组氨酸,试验组是在对照组基础上分别添加0.15、0.60、1.20、2.40、4.80、9.60、19.20 mmol/L的组氨酸。采用噻唑蓝比色法检测原代奶牛乳腺上皮细胞12 h增殖情况;运用蛋白质免疫印迹检测β-酪蛋白和8个信号通路相关磷酸化蛋白表达。结果表明：1）当组氨酸浓度为0.15~9.60 mmol/L时,与对照组相比,奶牛乳腺上皮细胞数量均增加。2）β-酪蛋白表达量随组氨酸浓度的增加出现先升高后降低的趋势,但试验组均极显著高于对照组（P〈0.01）。3）与对照组相比,组氨酸的添加可极显著促进各信号通路相关磷酸化蛋白的表达（P〈0.01）;试验组中,随着组氨酸浓度的升高,磷酸化哺乳动物雷帕霉素靶蛋白[P-m TOR（Ser2481）]和磷酸化真核细胞翻译延伸因子2[P-e EF2（Thr56）]蛋白的表达量下降,而磷酸化核糖体S6蛋白激酶1[P-S6K1（Thr389）]的蛋白表达增加;当组氨酸浓度为2.40 mmol/L时,磷酸化酪氨酸激酶2[P-JAK2（Tyr1007/1008）]、磷酸化真核细胞始动因子4E结合蛋白1[P-4EBP1（Thr37）]和磷酸化真核细胞起始因子2α[P-e IF2α（Ser51）]蛋白的表达量最高,磷酸化信号转导与转录激活子5[P-STAT5（Tyr694）]、磷酸化m TOR调控蛋白[P-raptor（Ser863）]和m TOR复合物1中的绑定蛋白（GβL）蛋白在组氨酸浓度为9.60 mmol/L时表达量最高。综合可知,组氨酸的添加可通过促进JAK2-STAT5信号通路中P-JAK2（Tyr1007/1008）和PSTAT5（Tyr694）蛋白的表达来进而调控β-酪蛋白表达。最适浓度（0.15～9.60 mmol/L）范围内的组氨酸还可通
- 王珊珊高海娜赵圣国郑楠张养东王加启闫素梅
- 关键词：组氨酸哺乳动物雷帕霉素靶蛋白Β-酪蛋白
- 必需氨基酸通过哺乳动物雷帕霉素靶蛋白信号通路调控乳蛋白合成的研究进展被引量：9
- 2014年
- 最近的研究表明,必需氨基酸不仅可以作为合成乳蛋白的底物,还可以作为信号分子调控乳蛋白的合成。不同的必需氨基酸通过哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路调控乳蛋白合成的作用也不相同,既包括正调控作用,也包括负调控作用。研究不同必需氨基酸调控乳蛋白合成的分子机制将为提高乳蛋白合成率提供理论基础。本文综述了mTOR信号通路及必需氨基酸通过mTOR信号通路调控乳蛋白的合成的研究进展,为揭示必需氨基酸作为蛋白质合成底物及细胞信号分子在乳蛋白合成过程中的作用机制提供研究方向。
- 高海娜郑楠胡菡王加启
- 关键词：必需氨基酸MTOR乳蛋白
- 赖氨酸对原代奶牛乳腺上皮细胞中酪蛋白及mTOR信号通路相关基因表达的影响被引量：5
- 2015年
- 为了在探究单一添加不同浓度的赖氨酸对原代奶牛乳腺上皮细胞的增殖,以及mTOR信号通路介导的酪蛋白合成相关基因的影响.试验用厄尔平衡溶液（EBSS）代替正常培养基来处理原代奶牛乳腺上皮细胞,在此基础上依次添加不同浓度的赖氨酸,采用MTT法检测细胞12h和24h的增殖和利用qRT-PCR技术检测4个编码酪蛋白基因和8个mTOR信号通路中与乳蛋白合成翻译相关基因的相对表达量.结果表明：添加赖氨酸12h,浓度为0.5～24mmol/L时,原代奶牛乳腺上皮细胞增殖数量增加（P=0.05）;添加赖氨酸24h,浓度为0.5～8mmol/L时,细胞增殖数量增加（P〈0.01）.当赖氨酸的添加浓度为0.5～16 mmol/L时,CSN1S1、CSN1S2、CSN2和CSN3基因表达均显著上调（P〈0.01）.当赖氨酸添加量为0.5～16mmol/L时,mTOR和raptor基因的表达量显著上调（P〈0.05）.在添加不同浓度的赖氨酸时,下游通路信号因子S6K1、4EBP1和eEF2基因表达均显著上调（P〈0.01）;rps6基因表达上调,eIF4E基因表达下调,但差异均不显著.以上结果表明,补充赖氨酸能显著促进乳腺上皮细胞中酪蛋白的合成,这一过程与mTOR信号通路介导蛋白质合成相关.
- 高海娜韩荣伟郑楠胡菡李发弟王加启
- 关键词：赖氨酸酪蛋白MTOR基因表达
- 必需氨基酸通过mTOR信号通路调控乳蛋白合成研究进展
- 近些年的研究表明,必需氨基酸不仅是合成乳蛋白的底物,而且还是调控乳蛋白合成的信号分子。不同的必需氨基酸通过mTOR信号通路调控乳蛋白合成的作用也不相同,既包括正调控作用,也包括负调控作用。研究不同必需氨基酸调控乳蛋白合成...
- 高海娜郑楠胡菡王加启
- 关键词：必需氨基酸MTOR乳蛋白
- 文献传递
- 永生化奶牛乳腺上皮细胞系及其构建方法和应用
- 本发明公开了永生化奶牛乳腺上皮细胞系及其构建方法和应用。本发明以中国荷斯坦奶牛乳腺上皮细胞作为宿主细胞，用携带有SV-40-大T抗原的逆转录病毒载体感染宿主细胞，最终筛选获得一株稳定传代的永生化奶牛乳腺上皮细胞系，其微生...
- 郑楠胡菡王加启高海娜代文婷
- 文献传递
- 乳腺内氨基酸调控乳蛋白合成的分子作用机制被引量：4
- 2016年
- 作为维持哺乳动物生命活动重要的"生物工厂",乳腺利用从流经血液中摄取的氨基酸等营养物质为底物合成乳蛋白。研究证实,氨基酸还可作为一种信号因子,通过乳腺内多种信号级联传导通路,调控乳蛋白基因的转录及翻译过程,从而影响乳腺中乳蛋白的合成。酪氨酸蛋白激酶-信号转导子和转录激活子(JAK-STAT)信号通路和哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(m TOR)信号通路是乳蛋白基因转录和翻译过程中的主要调控路径。本文综述了乳腺JAKSTAT和m TOR信号通路的分子机制及氨基酸通过这些通路调控乳蛋白合成的研究进展,旨在进一步阐明氨基酸调控乳蛋白合成的作用机理。
- 张牧臣高海娜赵圣国王珊珊郑楠王加启
- 关键词：氨基酸乳蛋白JAK-STATMTOR
