高志岩
- 作品数：15 被引量：32H指数：4
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- 相关领域：医药卫生自动化与计算机技术文化科学更多>>
- 日本血吸虫TβRII样基因胞外段的克隆、表达及初步鉴定被引量：1
- 2010年
- 目的获得日本血吸虫TGF-β受体II(TβRII)样基因的cDNA完整序列,克隆、原核表达其胞外段蛋白序列,并进行初步免疫学分析。方法应用RACE方法获得SjTβRII样基因cDNA全长序列,构建其胞外段(即N端)原核表达载体,在大肠埃希菌中IPTG诱导表达,表达产物行十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析。纯化重组蛋白并免疫大鼠制备抗血清,应用Western Blotting方法初步鉴定重组蛋白。结果获得日本血吸虫SjTβRII样基因的cDNA全长序列,为2283bp,编码760个氨基酸,其中胞外段长531bp,编码177个氨基酸。构建的重组质粒在大肠埃希菌中成功表达,经亲和层析获得了高纯度蛋白。重组蛋白可被其免疫的SD大鼠血清识别,表明其具有免疫原性和抗原性。结论首次获得日本血吸虫TβRII样基因的cDNA全长序列,其胞外段可在原核表达系统中获得具有免疫原性和抗原性的高效表达,为进一步研究该蛋白的功能奠定了基础。
- 陈姗马长玲高志岩麦璟莹赵晶晶朱郇悯李小敏李孜
- 关键词：日本血吸虫克隆基因表达
- 日本血吸虫感染小鼠肠系膜淋巴结T细胞亚群的变化被引量：8
- 2011年
- 目的:观察C57BL/6小鼠感染日本血吸虫(Schistosome japonicum,Sj)4～6周肠系膜淋巴结T细胞亚群的改变。方法:用Sj尾蚴腹贴法建立Sj感染的小鼠模型。4～6周后取肠系膜淋巴结做淋巴细胞计数,使用细胞内细胞因子染色的方法,利用流式细胞仪检测肠系膜淋巴结淋巴细胞中分泌不同细胞因子的T细胞亚群含量的变化。结果:Sj感染C57BL/6小鼠4～6周后,肠系膜淋巴结细胞数量明显增多;流式细胞仪检测发现肠系膜淋巴结中CD4+T细胞中分泌IFN-γ的Th1细胞增多1倍,分泌IL-4和IL-5的Th2细胞增多近20倍,Th1/Th2轴发生偏移;分泌IL-17的Th17细胞也增多近5倍;分泌IFN-γ的CD8+T细胞也增多1倍。结论:日本血吸虫感染C57BL/6小鼠4～6周肠系膜淋巴结细胞增多,并向Th2和Th17型细胞极化。
- 黄俊高志岩黎小妍谢红艳罗雪平
- 关键词：日本血吸虫肠系膜淋巴结THL7
- 肺炎链球菌自溶酶(LytA)蛋白T细胞表位的预测、筛选及确定被引量：2
- 2014年
- 目的确定肺炎链球菌自溶酶(LytA)蛋白CD4 T细胞及CD8 T细胞的表位。方法通过生物信息学方法预测肺炎链球菌LytA蛋白分子小鼠的MHC-Ⅰ结合肽(CD8 T细胞表位)和MHC-Ⅱ结合肽(CD4 T细胞表位)序列并人工合成相应肽段;经诱导表达、纯化、透析、去内毒素、定量等步骤得到纯化的rLytA蛋白用以免疫小鼠;分离每只免疫组小鼠和对照组小鼠的脾及淋巴结细胞并分别与每条人工合成的候选表位肽段体外共培养,取培养上清进行双夹心ELISA检测每组细胞IFN-γ的产生情况;用初步筛选到的表位多肽刺激小鼠的脾及淋巴结细胞并进行细胞内染色及细胞流式技术检测,筛选出LytA蛋白分子T细胞表位。结果利用多种方法分析了LytA蛋白分子的MHC-Ⅰ结合肽及MHC-Ⅱ结合肽,经整理得到候选MHC-Ⅰ结合肽26条,候选MHC-Ⅱ结合肽7条,并进行了人工合成。利用分子生物学技术获得了rLytA蛋白并成功免疫了小鼠;双夹心ELISA结果初步提示:肽段LⅠ4、LⅠ5、LⅠ6、LⅠ7、LⅠ11、LⅠ12、LⅠ13、LⅠ14、LⅠ25以及肽段LⅡ3、LⅡ4、LⅡ5刺激免疫小鼠细胞产生的IFN-γ量比相应的对照小鼠显著升高;细胞流式技术进一步确定:经肽段LⅠ4、LⅠ6、LⅠ7、LⅠ11、LⅠ12、LⅠ13、LⅠ14及LⅠ25刺激后,免疫小鼠细胞中IFN-γ和CD8双阳性的细胞百分比较对照小鼠细胞的百分比显著升高;经肽段LⅡ4和LⅡ5刺激后,免疫小鼠细胞中IFN-γ和CD4双阳性的细胞百分比较对照小鼠细胞的百分比显著升高。结论确定了肺炎链球菌LytA蛋白分子2个CD4 T细胞及8个CD8 T细胞的表位。
- 麦璟莹梁雪清高志岩马长玲袁竹青梁广明梁雪清
- 关键词：肺炎链球菌T细胞表位
- 肠镜黏膜下注射纳米碳定位在早期大肠癌腹腔镜手术中的临床价值被引量：8
- 2019年
- 目的探讨术前肠镜黏膜下注射纳米碳定位在早期大肠癌腹腔镜手术中的临床价值。方法回顾性分析2014年1月至2017年6月广州市第一人民医院收治的46例早期大肠癌患者的临床资料,其中,采用术前肠镜黏膜下注射纳米碳定位22例(术前纳米碳定位组);实施腹腔镜手术联合术中肠镜定位24例(术中肠镜定位组)。对比分析两组腹腔镜手术的手术时间、术中出血量、术后排气时间、住院时间。结果两组患者均成功准确找到病变部位,并顺利完成腹腔镜手术。术前纳米碳定位组的手术时间显著短于术中肠镜定位组(P <0. 05)。两组术中出血量、术后排气时间、住院时间比较,差异均无统计学意义(P> 0. 05)。结论术前肠镜黏膜下注射纳米碳可节约早期大肠癌腹腔镜手术的手术时间,病变定位方便、准确、有效,同时可节省大量人力物力。
- 英嵩崧陈墅圳高志岩
- 关键词：纳米碳大肠癌腹腔镜
- 急性马兜铃酸肾病动物模型建立
- 2015年
- 目的 建立马兜铃酸Ⅰ引起的小鼠急性肾病模型.方法 将小鼠分为实验组与对照组,实验组分别一次性注射马兜铃酸Ⅰ 20、50、100 mg/kg小鼠体重,引起小鼠急性肾功能损伤.并于实验第3、7天取血、肾组织标本,检测相关肾功能指标以及组织形态学检查.结果 注射马兜铃酸Ⅰ后,小鼠肌酐、血尿素氮含量升高,肾脏切片染色显示注射马兜铃酸Ⅰ后肾脏组织形态学变化与注射剂量及时间相关.结论 应用大剂量马兜铃酸Ⅰ成功建立急性肾病小鼠模型.
- 高志岩黎银燕许贺标严穗凯张惠球麦璟莹
- 关键词：马兜铃酸肾脏病理学变化肌酐
- 日本血吸虫感染小鼠肠系膜淋巴结Th17细胞的免疫应答被引量：10
- 2012年
- 目的观察C57BL／6小鼠感染日本血吸虫后肠系膜淋巴结Th17细胞的免疫应答。方法20只C57BU6小鼠随机分为感染组和对照组．每组10只，感染组小鼠经腹部皮肤感染日本血吸虫尾蚴，每鼠（40＋5）条。感染后5-6周分离小鼠肠系膜淋巴结的淋巴细胞，分别用抗小鼠CD3单克隆抗体（anti-CD3，1μg／m1）和抗小鼠CD28单克隆抗体（anti-CD28，1μg/ml）刺激，培养4h后收集细胞，RT-PCR检测小鼠肠系膜淋巴结淋巴细胞中自细胞介素17（IL-17）和维甲酸相关孤独受体（ROR-γt）mRNA的转录水平；培养72h后，ELISA检测细胞培养上清液IL-17和1干扰素（IFN-1）的含量。同时用佛波酯（PMA，10ng／m1）和离子霉素（1μg／ml）刺激淋巴细胞5h后，胞内细胞因子染色，流式细胞术检测Th17细胞的含量和其他细胞因子的产生。结果ELISA检测结果显示，感染小鼠肠系膜淋巴结培养物上清液中IFN-γ[（214．3±62．6）pg／ml]和IL-17[（176．8±62．1）pg／ml]的含量明显高于健康小鼠[（46．7±13．9）和0pg／ml]（P〈0．05）。RT-PCR检测结果显示，IL-17和ROR-γt mRNA转录水平也明显高于健康小鼠。感染小鼠肠系膜淋巴细胞CD4＋T细胞中，Th17细胞的比例为（0．55±0．03）％，明显高于健康小鼠[（0．16±0．01）％]（只以05）。在CD4＋T细胞中，IL-17＋ IL4＋细胞占0．06％，IL-17＋IFNγt和IL-17＋IL5＋细胞各占0．02％，IL-17＋ IL-9＋细胞占0.01％，未检测到Tl-17＋IL-10＋和IL-17＋Foxp3＋细胞。结论日本血吸虫感染C57BIJ6小鼠的肠系膜淋巴结能诱导Th17细胞产生。Th17细胞能分泌IL-4，及少量的IFN-γ、IL5和IL-9，不分泌IL-10，也不表达Foxp3。
- 罗雪平陈殿慧谢红艳高志岩方会龙黄俊
- 关键词：日本血吸虫C57BL/6小鼠肠系膜淋巴结TH17
- 一种具有温控功能的蜡块切片装置
- 本实用新型公开了一种具有温控功能的蜡块切片装置，涉及蜡块切片领域，针对高质量石蜡切片的制作过程，受周围环境的温度影响较大；石蜡切片技术，从不同熔点石蜡的选择，到切片时环境温度，都有可能影响切片的效果，同时现有的石蜡切片机...
- 王曌华高志岩聂健婕吴静宜杨丽慧
- 白细胞介素-1β在获得性耐肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体的肺癌H460迁移中的作用
- 2016年
- 目的:探讨高水平IL-1β和获得性耐肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)的肺癌H460细胞迁移的相互作用。方法:通过RT-PCR,Western Blot和酶联免疫吸附试验检测H460-TR和野生型H4608(H460-WT)中IL-1β的水平;通过细胞迁移实验检测细胞迁移能力;通过对H460细胞施加或不施加IL-1或者IL-1R的拮抗剂检测人重组磷脂酰肌醇-3-激酶/丝苏氨酸蛋白激酶(PI3K/Akt)的迁徙范围和活性。结果:在条件培养基中的H460-TR细胞的迁徙能力和其IL-1β水平高于H460-WT细胞。肺癌H460细胞的迁徙徙能力和Akt活性和IL-1β水平一致。结论:癌症细胞中IL-1β的显著升高与H460-TR的高迁徙能力以及Akt活性是相互关联的。Akt信号是IL-1β的下游通路,IL-1β可能可以作为转移性肺癌的药物作用靶点。
- 朱郇悯汤娟娟季小芳温镇成高志岩李孜
- 关键词：IL-1Β肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体AKT
- 一种牙磨片切片工具
- 本实用新型公开了一种牙磨片切片工具，包括连接杆与设置在连接杆一侧的两组切割片，还包括连接组件，所述连接组件用来将连接杆与切割片连接，所述连接组件包括固定端，所述固定端设置在连接杆的一侧，所述固定端上设置有连接螺孔，所述固...
- 张惠球高志岩黄榕权
- C57BL/6小鼠不同组织器官中NKT细胞的比较被引量：5
- 2012年
- 目的比较C57BL/6小鼠肝脏、肺脏、脾脏和肠系膜淋巴结中NKT细胞的含量、亚型和功能的特点。方法分离正常C57BL/6小鼠肝脏、肺脏、脾脏和肠系膜淋巴结的淋巴细胞,利用细胞表面分子染色的方法,观察不同组织器官中CD3+NK1.1+NKT细胞及其亚型的含量;淋巴细胞经过PMA和离子霉素刺激后,应用细胞内细胞因子染色的方法,通过流式细胞仪观察NKT细胞IFN-γ、IL-4、IL-9和IL-17的产生情况。结果肝脏中NKT细胞的含量为(25.2±12)%,显著高于肺脏、脾脏和肠系膜淋巴结。肝脏、脾脏和肠系膜淋巴结中NKT细胞以CD4+细胞亚群为主,而肺脏中NKT细胞以CD4-CD8-亚群为主,同时肠系膜淋巴结的NKT细胞中存在CD4+CD8+亚群。不同组织器官中NKT细胞IFN-γ、IL-4、IL-9和IL-17产生的能力有差别。结论 C57BL/6小鼠肝脏、肺脏、脾脏和肠系膜淋巴结的NKT细胞在含量、表型和功能方面可能存在明显的差异。
- 高志岩谢红艳罗雪平陈殿慧黄俊
- 关键词：NKT细胞细胞因子
