顾志香
- 作品数：61 被引量：275H指数：10
- 供职机构：中国人民解放军南京军区军事医学研究所更多>>
- 发文基金：江苏省自然科学基金江苏省科委自然科学基金江苏省科技攻关计划更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生生物学更多>>
- 用DIG－标记核酸探针鉴定传染性法氏囊病病毒被引量：4
- 1994年
- 用ＤＩＧ－标记ＩＢＤＶｃＤＮＡ探针进行斑点杂交试验鉴定传染性法氏囊病病毒（ＩＢＤＶ）。实验结果证明，该探针能与试验的１０株ＩＢＤＶ的ＲＮＡ发生限性杂交反应，结果清晰稳定，无非特异性反应。本试验是一种新的敏感的ＩＢＤＶ鉴定方法。
- 王永山周宗安翟春生王元伦方元顾志香
- 关键词：IBD病毒CDNA探针
- 人胰岛素原类似物(BKRA)基因的合成与表达被引量：7
- 1998年
- 为了利用基因工程生产胰岛素，按照已知的人胰岛素Ａ、Ｂ链氨基酸序列和大肠杆菌偏爱的氨基酸密码子设计并合成了人胰岛素原类似物（ＢＫＲＡ）基因，其中以赖（Ｋ）－精（Ｒ）二肽编码区取代人胰岛素原Ｃ肽编码区．为了避免其编码蛋白在大肠杆菌中表达时被降解，通过人工接头将２个ＢＫＲＡ基因串联起来，接头部分氨基酸序列为Ａｒｇ－Ａｒｇ－Ａｓｎ－Ｓｅｒ．将串联的ＢＫＲＡ基因克隆到表达载体ｐＥＴ－２８ａ（＋），实现了在大肠杆菌中的融合表达，表达产物以包含体形式存在，约占细菌总蛋白２４％．表达产物氨基末端具有六组氨酸肽段，以ＨｉＴｒａｐ凝胶进行亲和层析，一步纯化可达纯度９５％以上．放射免疫测定表明，纯化的融合蛋白具有胰岛素抗原活性．
- 房德兴王永山周宗安翟春生顾志香王元伦
- 关键词：基因合成纯化
- 猪囊虫病基因工程疫苗的体液与细胞免疫反应被引量：8
- 1999年
- 为了探讨以 Ｉ Ｓ Ｃ Ｏ Ｍ 作佐剂的猪囊虫病基因工程疫苗的免疫机理，对其诱导的体液免疫与细胞免疫反应进行了测定。用上述疫苗免疫 ９ 头试验猪，采用间接 Ｅ Ｌ Ｉ Ｓ Ａ 检测体液免疫反应及通过淋巴细胞转化试验、 Ａ Ｎ Ａ Ｅ染色试验、 Ｅ玫瑰花环形成试验等检测细胞免疫反应；用该疫苗和铝胶苗分别免疫昆明小鼠各 ２０ 只，分别检测体液免疫反应和 Ｔ 淋巴细胞抑制／杀伤亚群的动态变化。体液免疫的检测结果显示，免疫后 ７ 天即出现抗体，２１ 天后抗体全部转阳，持续的时间不少于 １９３ 天，效价明显高于铝胶苗；细胞免疫检测结果显示，免疫猪外周血 Ｔ淋巴细胞转化率、 Ａ Ｎ Ａ Ｅ＋ 细胞和粗粒型 Ａ Ｎ Ａ Ｅ＋ 细胞、 Ｅ Ｒ Ｆ Ｃ和 Ｅａ Ｒ Ｆ Ｃ细胞显著升高，免疫小鼠 Ｔ淋巴细胞抑制／杀伤亚群显著升高；与铝胶苗及对照组比较，差异极显著。以上结果表明猪囊虫病基因工程疫苗可同时激发动物的体液免疫和细胞免疫反应，增强了机体的免疫调节功能及杀伤性 Ｔ 淋巴细胞功能。
- 唐雨德刘玉顾志香郁兴明翟春生
- 关键词：囊虫病基因工程疫苗体液免疫细胞免疫
- 猪瘟ELISA抗体与免疫保护力的相关性研究被引量：10
- 1991年
- 用攻毒试验对猪瘟ELISA抗体与免疫保护力的相关性进行了研究,结果表明,80倍稀释血清ELISA OD值>0.3的疫苗注射猪,攻毒100％保护;0.30≥OD值>0.20的疫苗注射猪,攻毒75％保护;OD值≤0.20时,若为非疫苗注射猪(母源抗体),则攻毒不保护;若为疫苗注射猪,则仍有少数可以保护。从而进一步证实,应用HRP-SPA-ELISA不仅可以评价疫苗免疫效果,而且可以监测群体免疫水平,估测群体保护率。
- 周宗安刘劲松房德兴王元伦顾志香苏承忠熊仲良高瑞伦
- 关键词：猪瘟ELISA免疫保护力
- 猪囊虫病基因工程疫苗的研制被引量：9
- 1999年
- 从猪带绦虫六钩蚴ｃＤＮＡ 文库中筛选目的基因并进行克隆表达，重组抗原用血清学方法和猪体免疫试验进行鉴定。将具有免疫保护作用的重组抗原纯化，与免疫刺激复合物疫苗佐剂混合，制备成猪囊虫病基因工程疫苗，免疫仔猪并攻虫。该疫苗安全、无毒副作用，免疫猪减虫率９２．２％ ，完全保护率５５．５％ ，且免疫组发现的囊虫多数已死亡。以上结果表明用大肠杆菌表达的重组抗原制备的猪囊虫病基因工程疫苗安全、高效、成本低廉、可规模化生产，有望成为预防猪囊虫病的一种新型生物制剂。
- 唐雨德顾志香刘玉郁兴明
- 关键词：猪囊虫病基因工程疫苗免疫效果
- 用反向亲和层析法纯化猪瘟病毒抗原被引量：3
- 1992年
- 用兔抗牛睾丸细胞培养物的IgG琼脂糖4B偶联制备亲和层析柱,以反向亲和层析法纯化SFV—C抗原,即通过亲和层析免疫吸附除去PEG沉淀法部分纯化抗原中的残留牛睾丸细胞培养物成分。结果表明.通过3次反向亲和层析柱的纯化抗原.其总蛋白去除率达76.9％;应用纯化前后抗原检测猪瘟免疫血清.纯化抗原可以除去猪瘟免疫血清中的非相关抗体反应,确保猪瘟免疫抗体检测的特异性.
- 刘劲松房德兴王元伦顾志香周宗安
- 关键词：猪瘟病毒抗原
- 应用单克隆抗体ELISA抑制法检测细胞培养中的猪瘟兔化弱毒被引量：5
- 1991年
- 应用2种针对不同抗原决定簇的抗猪瘟兔化弱毒单克隆抗体建立了检测细胞培养中猪瘟兔化弱毒的ELISA抑制试验。对20份不同批次的猪瘟兔化弱毒牛睾丸细胞培养物的测定结果表明,该法可较准确地反映病毒在细胞培养中的产量;将病毒培养物置4℃、25℃和37℃3天、超声裂解、冻融3次和6次等不同方法处理对试验结果无显著影响(P>0.05);通过与兔体接种试验比较,探讨分析了猪瘟兔化弱毒疫苗生产工艺中的问题。
- 房德兴顾志香王元伦刘劲松周宗安
- 关键词：猪瘟兔化弱毒疫苗单克隆
- 乙型肝炎病毒adr亚型X蛋白在大肠杆菌中的高效表达被引量：1
- 1998年
- 将ａｄｒ亚型ＨＢＶ的完整Ｘ基因克隆到表达质粒ｐＰｒｏＥＸＨＴｂ中，实现了Ｘ蛋白在大肠杆菌中的高效融合表达。表达产物全长１７９个氨基酸残基（其中Ｘ蛋白部分１５４个氨基酸残基），分子量约１９．７ｋＤ，约占细菌总蛋白的３４％。其氨基端融合部分含有６组氨酸肽段，经ＨｉｓＴｒａｐＴＭ亲和层析纯化，一步可达纯度９３％。Ｗｅｓｔｅｒｎ印迹分析表明，该表达产物可与ＨＢＶ感染患者体内的抗Ｘ抗体特异性结合。
- 房德兴周宗安翟春生顾志香王元伦何亮
- 关键词：乙型肝炎病毒X基因
- 86例脑囊虫病患者的免疫检测及其流行病学分析
- 1999年
- 检测了１５１ 例中枢神经系统疾病患者的囊虫病循环抗原（ ＣＡ） 和抗体（ Ａｂ） ，总阳性数为８６ 例，分布于苏南和苏北的１８ 个县、市。其中男性６４ 例，女性２２ 例；儿童２８ 例，成人５８ 例；城镇５９ 例，农村２７ 例。这一结果表明，脑囊虫病，特别是儿童脑囊虫病在江苏地区中枢神经系统疾病患者中占有较高的比例，应引起重视。对１０ 例治愈患者治疗前后ＣＡ的变化进行对比观察，发现ＣＡ检测不仅可作为囊虫病的诊断，还可作为囊虫病疗效考核的依据。
- 顾志香刘玉唐雨德郁兴明
- 关键词：脑囊虫病免疫检测流行病学
- IBDV逆转录-聚合酶链反应和核酸杂交检测方法的研究被引量：10
- 1997年
- 以建立的传染性法氏囊病病毒（ＩＢＤＶ）逆转录－聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）和核酸杂交检测方法，检测了细胞培养物、病理组织、粪便和饲料中的ＩＢＤＶ，并与ＩＢＤＶ夹心ＥＬＩＳＡ、琼脂扩散试验（ＩＤ）和病毒分离方法进行了平行比较试验。结果表明，ＲＴ－ＰＣＲ和核酸杂交检测方法具有高度的敏感性和特异性，是深入研究ＩＢＤ流行病学。
- 王永山周宗安翟春生顾志香王元伦方元
- 关键词：聚合酶链反应核酸杂交IBDV
