韩春卉
- 作品数：66 被引量：467H指数：11
- 供职机构：国家食品安全风险评估中心更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家自然科学基金国家科技重大专项更多>>
- 相关领域：医药卫生轻工技术与工程农业科学生物学更多>>
- 破壁蛋白核小球藻对小鼠免疫调节作用被引量：3
- 2008年
- 目的探讨破壁蛋白核小球藻对健康小鼠免疫系统的影响。方法选用BalB/c正常小鼠,随机分组,经口给予小鼠不同剂量的小球藻粉水溶液0,0.15,1.50,4.50g/(kg.bw)每日1次,30 d后测量体重增长值、胸腺体重比值、脾脏体重比值、迟发型变态反应、刀豆蛋白A(ConA)诱导的小鼠淋巴细胞转化、抗体生成细胞数、半数溶血值、小鼠碳廓清能力、小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞能力、杀伤细胞(NK)活性。结果破壁蛋白核小球藻能促进小鼠体重增长,提高小鼠的脾脏体重比值,增强小鼠的迟发型变态反应能力,增强ConA诱导的小鼠淋巴细胞转化能力,增强巨噬细胞吞噬鸡红细胞的能力,增强NK细胞活性,对胸腺体重比值、抗体生成细胞数、半数溶血值、单核-巨噬细胞碳廓清能力无显著影响。结论破壁蛋白核小球藻对健康小鼠具有免疫调节作用。
- 封会茹计融李燕俊李业鹏江涛赵熙钟凯韩春卉李玉伟张靖陈庭君
- 关键词：小球藻体液免疫单核-巨噬细胞NK细胞活性
- 免疫磁珠富集联合荧光定量PCR快速检测牛肉馅中产志贺毒素大肠埃希菌O26∶H11被引量：9
- 2014年
- 目的建立肉制品中免疫磁珠富集(IMS)联合实时荧光定量PCR(qPCR)技术快速检测牛肉馅中产志贺毒素大肠埃希菌(STEC)O26∶H11的方法。方法建立针对编码O26抗原wzx基因实时荧光定量PCR方法,并验证其特异性和敏感性;人工污染不同浓度STEC O26∶H11的牛肉馅样品,在增菌不同时间后,将增菌液原液、增菌液经免疫磁珠特异性捕获分离物分别进行qPCR检测及平板分离。结果 qPCR检测O26∶H11可产生特异性荧光信号,而23株其他血清型的大肠埃希菌及7株其他种属细菌均未见荧光信号;本方法对纯培养的检测限为5×102cfu/ml。人工染菌试验中,当初始染菌浓度达到或高于3×102cfu/25 g时,增菌培养6 h后IMS捕获物可以检测到荧光信号。培养20 h后,初始染菌浓度为3"10-1cfu/25 g以上,对增菌液直接检测和IMS捕获物检测都可以检测到荧光信号。初始污染浓度较低时,增菌6 h后IMS-qPCR的检测灵敏度高于增菌液直接qPCR检测;IMS捕获物涂布显色培养基分离目标菌检测灵敏度高于增菌液直接涂布;CHROMagar STEC显色培养基分离STEC O26∶H11的检测灵敏度高于山梨醇麦康凯培养基(SMAC)。结论 IMS联合qPCR检测食品中的STEC O26∶H11具有特异性强、敏感度高、快速、易操作等特点,可以提高样品中STEC O26∶H11菌的检出率,适用于牛肉制品中STEC O26∶H11的快速检测。
- 白莉王伟胡豫杰吴青赫英英徐进韩春卉李凤琴
- 关键词：免疫磁珠分离食源性致病菌
- 蛋白核小球藻对小鼠细胞免疫系统的影响被引量：3
- 2008年
- 目的:探讨蛋白核小球藻对健康小鼠细胞免疫系统的影响。方法:选用BalB/c正常小鼠,随机分组,经口给予小鼠不同剂量的小球藻粉水溶液0,0.15,1.50,4.50 g/kg.bw,每日1次,30 d后测量小鼠迟发型变态反应,ConA诱导的小鼠淋巴细胞转化能力。结果:迟发型变态反应试验中4.50剂量组与对照组比较差异有显著性(P<0.01);ConA诱导的小鼠淋巴细胞转化能力试验中0.15剂量组与对照组比较差异有显著性(P<0.05)。结论:蛋白核小球藻能增强健康小鼠细胞免疫系统的功能。
- 封会茹李燕俊李业鹏江涛赵熙钟凯韩春卉李玉伟张靖陈庭君计融
- 关键词：小球藻细胞免疫
- SARS冠状病毒N蛋白单克隆抗体的制备及鉴定被引量：6
- 2004年
- 目的 制备SARS冠状病毒 (SARS CoV)N蛋白特异性单克隆抗体 (McAb) ,为SARS的快速诊断及致病机制的研究提供实验材料。方法 用纯化的重组SARS CoVN蛋白免疫BALB c小鼠 ,经细胞融合和亚克隆后获得分泌针对N蛋白的杂交瘤细胞株 ,用Westernblot和间接免疫荧光法检测这些细胞株分泌的单克隆抗体特异性 ,并将N蛋白分 3段表达初步定位单克隆抗体识别表位所在区域。结果 通过细胞融合和 3轮克隆化 ,筛选出分泌抗N蛋白的 6个杂交瘤细胞株。Westernblot及免疫荧光显示 ,获得的McAb可与SARS CoVN蛋白及SARS CoV发生特异性反应 ,有 4个细胞株分泌的抗体的识别位点位于N蛋白N端 ,2个位于C端。结论 获得了SARS CoV特异性单克隆抗体并进行了初步定位 。
- 王彦斌常昭瑞王健伟计融韩春卉赵丽任丽丽晁彦公屈建国曲成毅洪涛
- 关键词：N蛋白SARS-COVSARS冠状病毒杂交瘤细胞株抗N细胞融合
- 不同牛PrP合成肽段的抗原性研究被引量：5
- 2005年
- 目的研究PrP多肽的抗原性以及不同偶联方法对多肽免疫原性的影响。方法选择4段牛PrP多肽(BoP1、BoP2、BoP3、BoP4)为半抗原,KLH为载体,MBS、戊二醛两种偶联方法进行偶联,免疫BALB/c小鼠,间接ELISA方法检测小鼠血清中抗体效价,并对两种偶联方法进行比较。结果两组动物均出现死亡,戊二醛偶联多肽免疫小鼠出现不同程度的腹水,MBS偶联多肽免疫小鼠未见其它异常反应;戊二醛偶联的4种多肽产生的抗体效价无显著性差异(P>0.05),MBS偶联的KLH-BoP1、KLH-BoP2、KLH-BoP4产生抗体效价无显著性差异(P>0.05),MBS偶联的KLH-BoP3抗体效价低于其它3种多肽(P<0.05);对同一种多肽而言,不同偶联方法KLH-BoP1、KLH-BoP2、KLH-BoP4所产生抗体效价无显著性差异(P>0.05),戊二醛偶联KLH-BoP3产生的抗体效价明显高于MBS偶联KLH-BoP3产生的抗体效价(P<0.05)。结论PrP多肽可作为半抗原刺激小鼠强烈的免疫反应,不同偶联方法,不同肽段抗原性不同,为抗PrP多克隆及单克隆抗体的制备奠定了基础。
- 赵丽王健伟计融韩春卉于修平洪涛
- 关键词：朊蛋白多肽半抗原抗原性
- Epstein-Barr病毒基因工程活疫苗人体免疫的初步研究被引量：1
- 1991年
- Epstein-Barr(EB)病毒的原发感染发生在儿童时期,在我国3～5岁儿童的感染率为70％～90％。感染后终生带毒,并经唾液不断排出病毒。我国南方是鼻咽癌高发区,其发病率和死亡率均占恶性肿瘤的第一位。早期诊断方法的改进和早期治疗,使鼻咽癌治疗后的5年生存率明显增加,但不能降低发病率。EB病毒疫苗有可能成为控制该病的有效手段之一。 Epstein等人从淋巴母细胞株(B95-8细胞)细胞表面提取EB病毒膜抗原(MA),用于免疫棉顶猴能产生中和抗体。免疫动物能抵抗EB病毒攻击后所诱发的恶性淋巴瘤。该中和抗体在体外能中和EB病毒的转化活性。EB病毒的主要膜抗原(MA)
- 谷淑燕黄天民苗懿红赵玉和韩春卉肖瑶阮力朱既明H.Wolf
- 关键词：E-B病毒基因工程疫苗痘苗病毒
- 重组金黄色葡萄球菌肠毒素A的表达及鉴定被引量：2
- 2013年
- 目的通过基因重组方式获得高纯度、高含量重组金黄色葡萄球菌肠毒素A(rSEA)。方法将金黄色葡萄球菌肠毒素A(SEA)基因片段插入pET28a载体中,测序并正确鉴定后,将重组质粒转化到大肠杆菌BL21(DE3)中,经IPTG诱导,表达目的蛋白。重组蛋白用Ni-NTA His蛋白亲和柱纯化。结果 SDS-PAGE结果表明成功表达了分子量约为30 kD的重组蛋白,经Western blot和小鼠生物学鉴定,表达产物为重组金黄色葡萄球菌肠毒素A,并且具有较好的免疫原性,为制备抗金黄色葡萄球菌肠毒素A单克隆抗体及建立相应的免疫学检测方法奠定了基础。结论构建的rSEA表达载体稳定,可高效表达目的 rSEA蛋白。
- 王佳慧李楠沈青韩春卉张靖江涛李凤琴
- 关键词：葡萄球菌肠毒素原核表达
- 抗伏马菌素B_1单克隆抗体的制备和特性被引量：3
- 2004年
- 目的 :建立敏感、特异和快速的针对伏马菌素B1(fumonisinB1,FB1)的酶联免疫吸附试验 (enzyme linkedimmunosorbentassay ,ELISA)检测方法 ,形成具有我国自主知识产权的快速检测试剂盒。方法 :利用B细胞杂交瘤技术 ,建立能分泌抗伏马菌素B1单克隆抗体的杂交瘤细胞株。结果 :用伏马菌素B1 牛血清白蛋白 (FB1 BSA)偶联物免疫 8～ 10周龄雌性BALB/c小鼠后 ,取脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞系Sp2 / 0融合 ,经过 3～ 4次亚克隆建立了 1个稳定分泌抗伏马菌素B1毒素抗体的杂交瘤细胞株 ,命名为 5A9。将杂交瘤细胞打入BALB/c小鼠腹腔 ,获得含抗伏马菌素B1毒素单克隆抗体的腹水 ,并将腹水用饱和硫酸铵法进行纯化 ,得到单克隆抗体。该单克隆抗体的Ig亚类为IgG1,腹水中抗体的滴度分别为 2 .5 6× 10 6,参考工作浓度为 3.2× 10 5。纯化后抗体的IgG含量为 10 .4g/L ,亲和常数为 8.3× 10 -8mol/L。该抗体与其他结构类似物无交叉反应 ,具有较高的特异性。结论 :制备了具有高特异性和亲和力的抗伏马菌素B1单克隆抗体 ,初步形成了针对伏马菌素B1的ELISA检测试剂盒。
- 江涛王玉平韩春卉宫慧之计融
- 关键词：伏马菌素B1杂交瘤ELISA试剂盒
- 肉制品中马源性成分实时荧光PCR检测方法的建立被引量：4
- 2013年
- 目的建立肉制品中马源性成分的实时荧光PCR检测方法。方法参考欧盟实验室推荐的方法设计引物和探针,建立实时荧光PCR检测方法并验证方法的特异性、灵敏度,在北京部分超市、农贸市场、餐馆随机采集国产和进口牛、羊肉制品进行马源性成分检测。结果实时荧光PCR方法对马源性成分具有较高的特异性,与羊、猪、鸡、鸭、兔DNA均无交叉反应,与牛DNA在Ct 33.81出现交叉反应;所建方法对牛、羊肉中人工掺入马肉成分的检测灵敏度是0.1%。对北京市场上随机采集的122份牛、羊肉制品的检测结果显示,所有样品均未检出马肉成分。结论所建肉制品中马源性成分的检测方法简单、特异,检测灵敏度完全达到欧盟对肉类食品中掺入马源性成分比例的要求。
- 李楠王佳慧沈青韩春卉张靖李凤琴徐进江涛
- 关键词：实时荧光PCR牛肉制品羊肉制品
- stx-PCR方法、Vero细胞毒性试验和酶联免疫试剂盒3种方法检测产志贺毒素大肠埃希菌的评估被引量：4
- 2014年
- 目的评价stx-PCR方法、Vero细胞毒性试验和酶联免疫试剂盒3种方法在检测产志贺毒素大肠埃希菌的特异性和敏感性的差异。方法运用stx-PCR方法、Vero细胞毒性试验和酶联免疫试剂盒分别对29株大肠埃希菌参考菌株和45株食品分离大肠埃希菌株进行检测。结果 stx-PCR方法可以判定50株菌携带stx基因,同时Vero细胞毒性试验可以判定这些菌株具有细胞毒性,两者的一致性为100%;酶联免疫试剂盒能判定其中38株菌具有志贺毒素。结论 3种方法都具有很好的特异性。stx-PCR方法和Vero细胞毒性试验较酶联免疫试剂盒具有更高的敏感性,试剂盒适用于食源性疾病暴发事件中产志贺毒素大肠埃希菌的快速筛选,stxPCR方法推荐作为实验室常规快速检测方法,Vero细胞毒性试验是检测产志贺毒素大肠埃希菌是否具有志贺毒素生物学活性的金标准方法。
- 白莉胡豫杰王佳慧吴青赫英英王伟甘辛韩春卉李凤琴徐进
- 关键词：产志贺毒素大肠埃希菌志贺毒素
