陈金虎
- 作品数：8 被引量：26H指数：4
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- 吡格列酮对SD大鼠非酒精性脂肪肝病形成的预防作用及其机制被引量：4
- 2009年
- 目的:探讨吡格列酮(pioglitazone,PIO)对SD大鼠非酒精性脂肪肝病(non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD)形成的干预作用及机制.方法:♂SD大鼠72只,随机分为正常饮食组(NG)、高脂饮食组(HG)和PIO干预组(PIOG)各24只.PIOG喂饲高脂饲料,并同时予PIO药物灌胃8wk.正糖高胰岛素钳夹实验检测IR水平,放免法和全自动生化仪检测血清生化指标,RT-PCR检测过氧化物酶体增殖物激活受体(peroxisome proliferator-activated receptorγ,PPARγ)mRNA表达,Western blot检测肝组织c-Jun氨基末端激酶(c-Jun amino-terminal kinase1,JNK1)和PPARγ蛋白表达.结果:HG大鼠GIR水平降低和JNK1蛋白表达增高,均呈明显时间依赖性(均P<0.05);8wk末HG大鼠肝细胞出现明显脂肪变性,与NG相比,体质量、肝指数,TG、ALT、AST、FFAs、FINS、TNF-α水平明显增高,IR加重,JNK1蛋白表达明显升高,肝组织PPARγ表达明显降低(TG:1.23±0.08vs0.62±0.12,ALT:92.80±7.09vs51.34±8.12;AST:153.22±20.65vs119.26±13.61;FFAs:511.94±24.88vs335.31±15.71;FINS:41.23±1.84vs22.65±2.25;TNF-α:1.02±0.12vs0.34±0.07,均P<0.05);而PIOG大鼠,上述各项指标均得到明显改善,但仍不能完全达到NG大鼠水平(均P<0.05).结论:PIO对于由高脂饮食诱导的NAFLD的形成及其他IR相关疾病有预防作用.
- 张佳妮陈金虎谭莺刘慧霞
- 关键词：C-JUN氨基末端激酶非酒精性脂肪肝病胰岛素抵抗吡格列酮
- JNK信号通路在非酒精性脂肪肝病形成中的作用及其机制被引量：10
- 2009年
- 目的观察c-Jun氨基末端激酶（JNK）信号传导通路在非酒精性脂肪肝病（NAFLD）大鼠中的表达，探讨其在NAFLD发病中的作用。方法雄性SD大鼠64只，随机分为8周对照组、12周对照组、8周高脂组及12周高脂组各16只，对照组喂饲普通饲料，高脂组喂饲高脂饲料。正糖高胰岛素钳夹实验技术检测葡萄糖输注率（GIR），生物化学法检测空腹血糖（FBS）、ALT、AST、甘油三酯（TG）、总胆固醇（TC）；放射免疫法检测空腹胰岛素（Fins）、肿瘤坏死因子α（TNFα）；分光光度计测定超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）、游离脂肪酸（FFAs）；Western blot检测肝组织JNK1、胰岛素受体底物1（IRS-1）、胰岛素受体底物1丝氨酸307磷酸化（pIRS-1^Ser307）、蛋白激酶B（PKB）、蛋白激酶B丝氨酸473磷酸化（P—PKB^Ser473）。正态分布数据采用t检验，偏态分布数据采用秩和检验。结果8周高脂组与8周对照组、12周高脂组与12周对照组比较：体质量、肝指数、血清ALT、AST、TG、TC、Fins、FFAs、TNFα、及肝匀浆TG、TC，FFAs、MDA，高脂组（8、12周）均明显高于对照组（8、12周），t值分别为5．90和7．92、9．91和7．42、5．49、4．99和5．31、7．37、2．30和5．86、2．64和3．85、3．86和6．61、10．53、7．07和8．45、T=89．5和T=100、5．20和6．18、11．90和17．83，P值均〈0．05或〈0．01。肝匀浆每毫克蛋白SOD：8周对照组、12周和8周高脂组、12周分别为（21．6±4．0）U、（22．0±3．6）U、（13．0±3．0）U、（10．1±2．2）U，高脂组明显降低，t值分别为4．88、7．92，P值均〈0．01；GIR：8周对照组、12周和8周高脂组、12周分别为（10．8±1．3）mg·kg^-1·min^-1、（10．7±1．2）mg·kg^-1·min^-1、（8．1±1．1）mg·kg^-1·min^-1、（6．3±1．5）mg·kg^-1·min^-1，高脂组明显降低，t值分别为4．52、6．41，P值均〈0．01；高脂组与同期
- 谭莺张佳妮陈金虎王利娟刘慧霞
- 关键词：脂肪肝胰岛素抗药性信号传导C-JUN氨基末端激酶
- c-jun氨基末端激酶在非酒精性脂肪肝病胰岛素抵抗大鼠中的表达及意义被引量：2
- 2009年
- 目的观察c-jun氨基末端激酶(JNK)在非酒精性脂肪肝病(NAFLD)大鼠中的表达及在胰岛素抵抗(IR)发生中的意义。方法雄性SD大鼠32只,随机分为8周对照组、12周对照组、8周模型组和12周模型组各8只,分别给予正常饮食或高脂饮食喂养8周和12周。于第8周和第12周用生化法检测大鼠血清甘油三酯(TG)、空腹血糖(BS)含量;正糖高胰岛素钳夹实验检测IR水平;免疫组织化学和Western blot技术检测肝组织中JNK表达变化。结果大鼠NAFLDIR模型组TG、BS含量较对照组增高,随着喂养时间的延长,大鼠肝细胞脂肪变性及IR水平逐渐加重,JNK阳性细胞和JNK蛋白表达强度逐渐增加,JNK的表达强度与IR呈正相关。差异均有显著性(P<0.05)。结论高脂饮食喂养8周能够成功构建NAFLDIR大鼠模型,肝细胞JNK可能参与了NAFLDIR的发生和发展。
- 陈金虎刘慧霞张佳妮全养雅郭敏谭莺
- 关键词：C-JUN氨基末端激酶非酒精性脂肪肝病胰岛素抵抗
- IL-18对大鼠非酒精性脂肪肝病形成的作用被引量：6
- 2009年
- 目的:分析在高脂饮食诱发大鼠非酒精性脂肪肝病(NAFLD)形成过程中胰岛素抵抗(IR)与IL-18之间的相关性,并探讨IL-18对大鼠NAFLD形成的作用.方法:将48只♂SD大鼠随机分为正常饮食组(NG)及高脂饮食组(FG),各24只,喂养至第2、4、6、8周末时,2组各随机抽取6只,抽取门静脉血测空腹血糖(FBS)、空腹胰岛素(FINS),计算空腹胰岛素抵抗指数(FIRI);检测血清及肝组织匀浆IL-18浓度;光镜检查肝组织切片以评价肝脏脂肪变性程度.结果:FG第4周末开始出现IR,血清及肝组织匀浆IL-18均随喂养时间的延长逐渐升高,各期均高于NG,肝组织匀浆IL-18在第2、4、6、8周末均与同期NG比较均有统计学差异均P<0.05),而血清IL-18是第4、6、8周末与同期NG比较均有统计学差异(均P<0.05).FINS、FIRI、血清及肝组织匀浆IL-18均与肝脂肪变性呈正相关(r=0.951,0.971,0.950,0.937,均P<0.05).血清IL-18与FINS、FIRI及肝组织匀浆IL-18与FINS、FIRI均成正相关(r=0.951,0.933,0.929,0.913,均P<0.05).结论:IR在高脂饮食诱发的NAFLD的发生发展中有重要作用,IL-18与IR形成有关,并与NAFLD的形成相关联.
- 李岚刘慧霞贺丹陈金虎张佳妮全养雅
- 关键词：非酒精性脂肪肝病胰岛素抵抗白介素-18
- 高脂饮食构建胰岛素抵抗脂肪肝大鼠模型被引量：2
- 2009年
- 目的通过高脂饮食构建非酒精性脂肪肝病（NAFLD）大鼠模型；分析胰岛素抵抗（IR）在NAFLD形成过程中的作用。方法将48只雄性SD大鼠随机分为正常饮食组（NG）及高脂饮食组（FG）各24只。第2、4、6、8周末时，2组各随机抽取6只，称体重，测空腹血糖、空腹胰岛素、甘油三酯、总胆固醇、丙氨酸氨基转移酶和天门冬氨酸氨基转移酶，并计算空腹胰岛素抵抗指数；然后计算肝指数（肝湿重（g）／体重（g）×100％）；制备肝组织匀浆测丙二醛、超氧化物歧化酶以及光镜检查肝组织切片以评价肝脏脂肪变性程度。结果FG组大鼠的体重增长比NG组快；肝指数在第2、4、6、8周末均大于NG；第2周末时已出现肝细胞脂肪变，其程度随喂养时间的延长逐渐加重，第4周末开始出现IR、高TG、TC血症、肝脏转氨酶异常及肝脏脂质过氧化损害，第6周末时形成轻度脂肪肝，第8周末时发展为中度脂肪肝。结论SD大鼠用改良型高脂饲料持续喂养6周可形成伴有IR的NAFLD，IR在NAFLD的发生发展中有重要作用。
- 李岚刘慧霞贺丹陈金虎张佳妮全养雅
- 关键词：膳食脂肪类脂肪肝胰岛素抗药性
- 表达人JNK基因重组腺病毒的构建和鉴定被引量：1
- 2008年
- 目的制备表达人c-jun氨基末端激酶（JNK）复制缺陷型重组腺病毒。方法将重组穿梭载体pAdTrack-CMV-WT-JNK线性化后，与pAdEasy-1共转化大肠杆菌BJ5138，进行同源重组得到重组腺病毒载体。将重组腺病毒载体转染入包装细胞HEK293内制备复制缺陷型重组腺病毒，并经PCR及DNA测序鉴定。结果JNK重组腺病毒载体能有效转染HEK293细胞并在细胞内成功包装，5d后可以观察到绿色荧光蛋白（GFP）明显表达，搜集的病毒经过PCR扩增得到特定JNK基因片段并测序鉴定，动物实验证实构建的Ad-WT-JNK能有效在肝组织表达。结论该研究成功构建了JNK重组腺病毒载体及相应重组腺病毒颗粒，为进一步研究JNK的作用及应用JNK进行相关疾病的基因治疗奠定了基础。
- 陈金虎刘慧霞张佳妮郭敏全养雅谭莺
- 关键词：基因JUN蛋白激酶类腺病毒科遗传学
- DN—JNK基因重组腺病毒的构建和鉴定
- 2009年
- 目的制备表达人c-jun氨基末端激酶（JNK）复制缺陷型重组腺病毒（Ad—DN—JNK），并通过动物实验进行功能鉴定。方法将重组穿梭载体pAdTrack—CMV—DN—JNK线性化后，与pAdEasy—1共转化大肠杆菌BJ5138，进行同源重组得到重组腺病毒载体。将重组腺病毒载体转染入包装细胞HEK293内制备复制缺陷型重组腺病毒，并经PCR及DNA测序鉴定。Western blot检测Ad—DN-JNK在SD大鼠肝组织中JNK1蛋白表达情况，及胰岛素受体底物1丝氨酸307（IRS-1^Ser307）磷酸化水平。结果JNK重组腺病毒载体能有效转染HEK293细胞并在细胞内成功包装，5d后观察到绿色荧光蛋白（GFP）明显表达，搜集的病毒经过PCR扩增得到了特定JNK基因片段并测序鉴定。所制备的Ad—DN—JNK滴度为2．5×10^10pfu／ml，动物实验证实构建的Ad—DN-JNK能有效在肝组织表达。结论该研究成功构建了DN—JNK重组腺病毒载体及相应重组腺病毒颗粒，动物实验证明Ad—DN—JNK能有效介导DN—JNK基因蛋白表达并下调IRS-1^Ser307磷酸化水平。为进一步研究JNK的作用及应用DN—JNK进行相关疾病的基因治疗奠定基础。
- 张佳妮刘慧霞陈金虎郭敏全养雅谭莺
- 关键词：重组蛋白质类腺病毒科
- 饮食调整对非酒精性脂肪肝病的治疗作用及机制被引量：4
- 2009年
- 目的:观察饮食调整对SD大鼠非酒精性脂肪肝病(NAFLD)的治疗作用,并探讨其作用机制.方法:SD大鼠,♂,80只,随机分为8wk对照组(NG8wk组)、12wk对照组(NG12wk组)、8wk高脂组(HG8wk组)、12wk高脂组(HG12wk组)及饮食调整组(DG组)各16只.NG组喂饲普通饲料,HG组喂饲高脂饲料,DG组喂饲高脂饲料,8wk后改普通饲料继续喂饲4wk.正糖高胰岛素钳夹实验检测葡萄糖输注率(GIR),放射免疫法和生化法检测血清及肝匀浆生化指标;Westernblot检测肝组织c-jun氨基末端激酶(JNK)1、胰岛素受体底物-1(IRS-1)、胰岛素受体底物-1丝氨酸307磷酸化(phospho-IRS-1Ser307,p-IRS-1Ser307)的表达.结果:HG组与同期NG组大鼠比较,体质量、肝指数、血清ALT、AST、TG、TC、FFAs、FIns、TNF-α及肝匀浆TG、TC、FFAs、MDA均明显升高(P<0.05或0.01),肝匀浆SOD降低(t=4.88,7.92);GIR降低(均P<0.05);肝组织JNK1蛋白表达、p-IRS1Ser307水平增高(t=4.39,5.81;4.60,6.48),JNK1蛋白表达强度与胰岛素抵抗呈正相关;HG12wk组和HG8wk组大鼠上述各项指标比较,差异均具有统计学意义(P<0.05或0.01);随着喂养时间的延长,HG组大鼠肝细胞脂肪变性明显加重;而DG组大鼠的上述各项指标均得到明显改善,但仍未达到同期NG组大鼠水平(均P<0.05).结论:高脂饮食喂养8wk及12wk分别能够构建SD大鼠NAFLD及NASH模型,仅恢复正常饮食对于高脂饮食诱导的NAFLD有一定的治疗作用.
- 谭莺陈金虎张佳妮王利娟刘慧霞
- 关键词：C-JUN氨基末端激酶非酒精性脂肪肝病胰岛素抵抗高脂饮食饮食调整
