陈艳秋
- 作品数:3 被引量:7H指数:2
- 供职机构:首都医科大学更多>>
- 发文基金:北京市教育委员会科技发展计划北京市自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 人rBPI_(23)在大肠杆菌DH5α中的表达及其多克隆抗体的制备被引量:5
- 2007年
- 目的制备人rBPI23蛋白并免疫家兔获得特异性多克隆抗体。方法将本室制备的pBV220-synBPI600表达载体转化感受态E.coliDH5α,温控诱导后,获得以包涵体形式表达的目的重组蛋白;用SDS-PAGE鉴定分子质量,West-ernblot鉴定抗原性;免疫家兔获得抗rBPI23抗血清,经饱和硫酸铵沉淀获得多克隆抗体,间接法ELISA检测抗体效价,Westernblot分析抗体的特异性。结果重组蛋白主要以包涵体形式表达,SDS-PAGE显示其分子质量约23ku,与预期结果相符;重组蛋白能与市售兔抗人BPI抗体特异性结合;免疫家兔获得高效价(1∶320000)抗血清,上述抗体能与rBPI23及人BPI标准品特异性结合。结论成功制备了人rBPI23,免疫家兔获得高效价抗人rBPI23多克隆抗体,为制备单克隆抗体及后期建立BPI免疫学检测方法奠定基础。
- 龙军李蕴陈艳秋李丽吕喆安云庆
- 关键词:原核表达多克隆抗体制备
- BPI N端优势抗原表位肽抗血清的制备及其生物学活性研究
- 杀菌/渗透增强蛋白(BPI)是存在于人和哺乳动物多形核中性粒细胞嗜天青颗粒中的一种阳离子抗菌蛋白。本实验室一直从事BPI及其功能片段的研究,并且通过原核和真核等表达系统获得了由BPI N端功能性片段BPI<,23>与Ig...
- 陈艳秋
- 关键词:抗原表位肽抗血清内毒素血症
- 文献传递
- BPIN端优势抗原表位的模拟合成及其抗血清的制备被引量:3
- 2007年
- 目的通过生物信息学模拟合成杀菌/渗透增强蛋白氨基端(BPIN端)优势抗原表位肽,免疫动物获得相应抗血清。方法利用生物信息学分析BPIN端(1-199)氨基酸序列的抗原性、亲水性、可塑性、表面可及性和二级结构等理化特性,据此设计合成TA/IK两条多肽,将其与钥孔戚血蓝素(KLH)偶联后,免疫家兔获得相应抗血清;采用间接ELISA法鉴定多肽的抗原性、测定血清抗体效价,Westernblot鉴定抗血清特异性。结果人工合成BPIN端TA/IK两个B细胞表位肽;ELISA检测证实TA/IK抗原肽能与商品化兔抗人BPI55多克隆抗体结合;所获TA/IK抗血清效价分别为1∶51200和1∶25600;Westernblot证实TA/IK抗血清能与BPI55标准品特异性结合。结论模拟合成的TA/IK抗原肽确为BPIN端优势抗原表位,相应抗血清可用于BPIN端功能性片段的检测鉴定。
- 陈艳秋彭智龙军张国民吕喆安云庆
- 关键词:生物信息学抗原表位肽抗血清