陈甜甜
- 作品数:29 被引量:67H指数:5
- 供职机构:山东宝来利来生物工程股份有限公司更多>>
- 发文基金:国家高技术研究发展计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:农业科学生物学医药卫生更多>>
- 中草药和益生菌复方制剂对肉鸡法氏囊生长发育的影响被引量:9
- 2015年
- 旨在研究中草药和益生菌复方制剂对肉鸡体重、法氏囊指数、法氏囊组织结构及淋巴细胞增殖活性的影响。选用5日龄健康AA肉仔鸡120只,随机分3组,对照组自由饮水,试验组分别添加0.1%和0.2%的中草药(黄芪、淫羊藿、党参)和益生菌复方制剂,试验期为3周。结果显示,各处理组肉鸡的法氏囊指数均明显高于对照,14日龄,0.1%和0.2%添加组法氏囊指数分别比对照高出41.96%和34.97%,差异极显著(P<0.01);各处理组肉鸡的法氏囊皱裂较发达,淋巴小结排列紧密且规则,淋巴细胞数量较多;淋巴细胞增殖试验显示,20日龄时,各试验组肉鸡的法氏囊淋巴细胞增殖活力极显著高于对照(P<0.01)。结果表明中草药和益生菌复方制剂能够显著促进肉鸡法氏囊的发育,增强机体的免疫功能。
- 樊梅娜程福亮张建梅聂兆晶陈甜甜房栋程合刚李复辉
- 关键词:肉鸡法氏囊益生菌中草药
- 一种用于检测猪疫病病原微生物的基因芯片及其检测方法
- 本发明公开了一种用于检测猪疫病病原微生物的基因芯片,包括固定在固相载体上的与待检致病病原微生物相对应的寡核苷酸探针和阳性质控。本发明还公开了采用该基因芯片对猪传染性胸膜肺炎放线杆菌、猪瘟病毒、猪副嗜血杆菌、猪流感病毒、猪...
- 单宝龙陈雷谷巍程福亮王红聂兆晶王丽荣陈甜甜王春凤
- 文献传递
- 肠道黏膜新城疫病毒特异性sIgA抗体ELISA检测方法的建立被引量:1
- 2023年
- 为建立检测肠道黏膜新城疫病毒(NDV)特异性sIgA抗体的ELISA方法,通过原核表达并纯化的重组NDV HN蛋白作为包被抗原,构建检测肠道黏膜NDV特异性sIgA抗体的间接ELISA方法,并利用该方法检测各肠段黏膜新城疫特异性sIgA抗体含量,探讨了NDV黏膜免疫抗体水平的变化规律。结果显示,成功表达并纯化了HN蛋白,确定的最佳ELISA方案为:重组NDVHN蛋白包被质量浓度为0.5μg/mL,100μL/孔,封闭液为50 mg/mL脱脂奶粉溶液,黏膜洗脱液稀释度为1∶40,作用时间为1.5 h,二抗作用时间为1 h,稀释度为1∶100000,显色时间为10 min。ELISA重复性试验的批内变异系数在2.63%~7.68%之间,批间变异系数在1.43%~7.63%之间。本方法与包被全NDV建立的ELISA方法的符合率达到91.30%。使用本方法检测口服免疫含HN抗原重组乳杆菌(BLCC2-0394)的鸡十二指肠、空肠、回肠和盲肠黏膜中NDV特异性sIgA抗体水平,结果显示,免疫后第19天NDV特异性sIgA抗体显著高于空白对照组(P<0.01),第23天抗体水平达到最高,第26天出现下降趋势。结果表明,所建立的以重组HN蛋白为包被抗原的ELISA检测方法可用于肠道黏膜NDV特异性抗体的检测。
- 陈甜甜侯玉凤苏晓彤孙明杰张秋婷谢全喜谷巍
- 关键词:新城疫ELISASIGA黏膜免疫
- 猪瘟和猪蓝耳病病毒多重RT-PCR检测方法的建立及初步应用被引量:18
- 2013年
- 目的建立猪瘟病毒(Classical swine fever virus,CSFV)和猪蓝耳病病毒(Porcine respiratory and reproductivesyndrome virus,PRRSV)多重RT-PCR检测方法,并进行验证及初步应用。方法根据GenBank中登录的CSFV和PRRSV疫苗株基因组序列,分别设计针对CSFV和PRRSV的两对引物,建立多重RT-PCR检测方法,并进行敏感性及特异性验证。用建立的多重RT-PCR法检测20份疑似猪瘟、猪蓝耳病或混合感染病料,并与市售RT-PCR试剂盒的检测结果进行比较;检测病料的部分PCR产物测序后,与9株具有代表性的CSFV毒株和10株具有代表性的PRRSV毒株进行核苷酸序列同源性比对。结果以CSFV和PRRSV混合引物扩增,分别可扩增出286和664 bp的特异性条带。建立的多重RT-PCR检测方法可检出100倍稀释的病毒RNA;该方法可检出CSFV、PRRSV及CSFV与PRRSV混合病毒,而猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)、猪传染性胃肠炎病毒(Trans-missible gastro-enteritis virus,TGEV)、猪圆环病毒(Porcine circovirus,PCV)、猪细小病毒(Porcine parvovirus,PPV)和猪伪狂犬病病毒(Porcine pseudorabies virus,PRV)的检测结果均为阴性;该方法检测20份疑似猪瘟、猪蓝耳病或混合感染病料的结果与市售RT-PCR试剂盒比较,灵敏度达100%;选取的两份CSFV扩增片段与9株具有代表性的CSFV毒株的核苷酸序列同源性在92.3%~98.2%之间,扩增的PRRSV与10株具有代表性的PRRSV毒株的核苷酸序列同源性在94.1%~97.9%之间。结论成功建立了CSFV和PRRSV多重RT-PCR检测方法,为猪瘟和猪蓝耳病的早期诊断及流行病学调查奠定了基础。
- 陈甜甜程福亮梁瑾宿志瑞范群平
- 关键词:猪瘟病毒猪蓝耳病病毒多重逆转录聚合酶链反应
- 1株动物双歧杆菌的分离鉴定及其对小鼠溃疡性结肠炎的调理作用被引量:3
- 2022年
- 为了探讨双歧杆菌对小鼠溃疡性结肠炎的作用,本试验从新鲜的婴儿粪便中分离筛选出具有典型双歧杆菌形态的菌株,用16S RNA通用引物和细菌生化试验进行菌种鉴定,并对该菌株进行了生产性能测定。通过建立硫酸葡聚糖钠盐(dextransulfatesodium,DSS)诱导的小鼠溃疡性结肠炎模型,评估该菌株对小鼠溃疡性结肠炎的作用。结果显示,新鲜婴儿粪便中分离的菌株经16S RNA保守序列和细菌生化试验鉴定为动物双歧杆菌(被命名为NFTY9),该菌株能够显著降低由DSS引起的小鼠腹泻和便血现象,改善肠道肠黏膜损伤,降低肠道炎性因子TNF-α和IL-6含量。结果表明,动物双歧杆菌NFTY9具有显著改善小鼠溃疡性结肠炎的作用,为进一步开发应用提供了理论依据。
- 陈甜甜谢全喜张海霞孙尹双白冬红
- 关键词:小鼠溃疡性结肠炎结肠炎模型
- 重组鸡α-干扰素的表达及其生物活性的初步研究被引量:5
- 2014年
- 为获得重组鸡α-干扰素并对其进行生物活性研究,本试验对重组大肠杆菌进行诱导表达,收集重组鸡α-干扰素包涵体后进行复性纯化及免疫印迹试验,并通过测定病毒EID50,在接种H9亚型禽流感病毒、新城疫病毒和传染性支气管炎病毒的鸡胚中进行干扰素抗病毒活性试验,运用微变量细胞病变抑制法进行重组鸡α-干扰素抗病毒效价的测定。结果显示复性后重组鸡α-干扰素的免疫印迹试验成功获得了预期条带,在鸡胚中重组鸡α-干扰素具有显著的抗H9亚型禽流感病毒、新城疫病毒和传染性支气管炎病毒等活性作用。在CEF/VSV细胞系上测定重组鸡α-干扰素的抗病毒效价为1.5×210 U/mg左右,高浓度重组鸡α-干扰素具有一定的细胞毒性。结果表明重组鸡α-干扰素蛋白具有免疫原性和抗原性,在鸡胚内具有较好的抑制或杀灭H9亚型禽流感病毒、新城疫病毒和传染性支气管炎病毒的效果,呈广谱性,抗病毒效价较高,为下一步抗病毒制品的创制奠定基础。
- 程福亮聂兆晶陈甜甜刘洋庆房栋崔兆连谷巍王春凤
- 关键词:生物活性
- 新城疫病毒一步法RT-PCR检测方法的建立及初步应用被引量:4
- 2013年
- 目的建立新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)一步法RT-PCR检测方法,并进行验证及初步应用。方法根据NDV F基因序列,设计合成了1对特异性引物,建立一步法RT-PCR检测方法,并验证其特异性及敏感性;应用建立的方法对23份疑似新城疫(Newcastle disease,ND)病料进行检测,并与血凝及血凝抑制试验检测结果进行比对。结果建立的一步法RT-PCR同时检测NDV、传染性法氏囊病病毒(Infectious bursal disease virus,IBDV)和禽流感病毒(Avian influenza virus,AIV)H9亚型,仅NDV为阳性,IBDV和AIV H9均为阴性;该方法最低可检出约4 pg的NDV RNA;23份疑似ND病料,一步法RT-PCR检出11份阳性,血凝及血凝抑制试验检出13份阳性,两种方法的阳性符合率为85%。结论建立了NDV一步法RT-PCR检测方法,该方法特异性良好,敏感度较高,用时较短,可从分子水平上对NDV进行早期快速诊断和流行病学调查。
- 梁瑾程福亮陈甜甜宿志瑞范群平
- 关键词:新城疫病毒逆转录聚合酶链反应
- 一株具有抑制产气荚膜梭菌作用的枯草芽孢杆菌及其应用
- 本发明公开了一株具有抑制产气荚膜梭菌作用的枯草芽孢杆菌,该菌株命名为枯草芽孢杆菌(Bacillus?subtilis)BLCC1-0155。本发明的枯草芽孢杆菌BLCC1-0155对产气荚膜梭菌具有较强的抑制作用,同时对...
- 单宝龙陈雷谷巍程福亮徐海燕王红陈甜甜樊梅娜辛国芹聂兆晶房栋赵影王春凤
- 文献传递
- 鸡α干扰素基因的人工合成、表达及抗病毒活性研究
- 2013年
- 为了获得具有抗禽源病毒活性的鸡α干扰素,对Genebank中发表的鸡源α干扰素基因进行密码子优化后,人工合成α干扰素基因片段489 bp,构建了表达载体PET-28a-IFN-α,连接转化到大肠杆菌菌株中,经PCR、酶切和测序鉴定后,诱导产生干扰素包涵体蛋白,破碎、纯化、透析复性、冻干浓缩后测定蛋白浓度,按禽流感H9EID50的浓度分别与不同剂量干扰素等量混合,接种鸡胚0.2μL,收集病毒,测定血凝价。结果显示:成功构建了原核表达载体pET-IFN-α,复性后蛋白浓度为472μg/mL,试验组(47.2μg和23.6μg)的血凝价与生理盐水对照组比较,差异极显著(P<0.01)。表明重组干扰素蛋白在鸡胚内具有较好的抑制或杀灭H9禽流感病毒的效果,为下一步抗病毒制品的研发奠定了基础。
- 程福亮夏晓飞聂兆晶陈甜甜石振飞刘洋庆王丽荣谷巍
- 关键词:抗病毒活性
- 减抗养殖条件下益生菌在畜禽养殖业中的应用被引量:5
- 2021年
- 益生菌普遍存在于动物肠道中,是一类通过改善宿主肠道微生物群落的平衡而发挥作用的活性微生物。当给予足够量的益生菌时,会给宿主健康带来益处。随着生物技术的发展,越来越多的研究表明益生菌在调节肠道菌群平衡、提高机体免疫力以及治疗人畜疾病中发挥重要作用。本文就益生菌的作用机理、益生菌在畜禽养殖业中的应用展开论述以期为益生菌的推广应用提供参考资料。
- 侯玉凤宁扬陈晓雯韩泽朝蔡巧利陈甜甜谢全喜徐海燕
- 关键词:益生菌抗病毒畜禽养殖