陈玉珍
- 作品数：1 被引量：3H指数：1
- 供职机构：中日友好临床医学研究所更多>>
- 发文基金：国家教育部博士点基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- 小鼠噬菌体抗体库的构建和N-肽结合单链抗体的筛选被引量：3
- 2000年
- 成功构建一库容量为 1.7× 10 8的小鼠噬菌体抗体库 ,并从中淘选出对N 肽有结合活性的单链抗体。首先从未免疫小鼠的脾脏中提取总RNA ,分离出mRNA ,经逆转录合成其总cDNA。随后通过PCR分别扩增出抗体重链和轻链可变区VH、VL 的基因片断 ,再经重组PCR将两片断由一编码 (Gly4 Ser) 3十五肽的接头连在一起 ,并克隆到噬菌质粒 pCANTAB 5E中 ,电击转化大肠杆菌TG1。经辅助噬菌体M 13KO7超感染回收全部重组噬菌体 ,此即噬菌体抗体库。N 肽是一种新发现的神经肽 ,其N端与阿片肽高度同源 ,可与阿片肽受体相互作用。对其研究可能有助于了解成瘾机制和有临床应用价值。将生物素化的N 肽与抗体库相互作用 ,用偶联有链霉亲和素的磁珠富集与N 肽结合的重组噬菌体 ,经四轮淘选 ,得到亲和力较高的单链抗体。
- 高新胜黄仪秀郭振泉朱圣庚陈玉珍
- 关键词：噬菌体展示技术抗体库神经肽小鼠
