陈泉
- 作品数:19 被引量:64H指数:4
- 供职机构:山东省科学院更多>>
- 发文基金:山东省科技发展计划项目博士科研启动基金国家科技重大专项更多>>
- 相关领域:生物学农业科学医药卫生轻工技术与工程更多>>
- 重组人促性腺激素-铜绿假单胞菌外毒素A蛋白的可溶性表达、纯化和对肿瘤细胞的抑制活性被引量:2
- 2013年
- 以人促性腺激素-铜绿假单胞菌外毒素A衍生物(GnRH-PE39KDEL)为研究对象,根据大肠杆菌密码子偏好性优化,通过基因合成的方法获得重组蛋白核酸序列,连接至pET-24b载体中,并转化入大肠杆菌BL21(DE3)及BL21(DE3)plyS中进行诱导表达。结果显示,在含有2 mg/mL葡萄糖的LB培养基中37℃培养至OD600约为0.6 h,加入0.2 mmol/L IPTG在30℃诱导2 h后,重组蛋白可以实现可溶性高表达。工程菌经超声波破碎、高速离心后,经镍柱纯化和脱盐后得到重组蛋白,蛋白纯度达到95%以上,蛋白最终得率在2.6 mg/g菌体。重组蛋白经IC50检测,可以较好地抑制肿瘤细胞株的生长。
- 郭凯赵晓燕周红姿陈凯李纪顺陈泉杨合同
- 关键词:绿脓杆菌外毒素A可溶性表达
- 重组F3肽-铜绿假单胞菌外毒素A抑制肿瘤生长
- 2014年
- 为检测重组的F3肽-铜绿假单胞菌外毒素A(F3-PE39KDEL)的抗肿瘤作用,采用MTT法检测F3-PE39KDEL对人乳腺癌细胞MCF-7、人肺癌细胞A549、人卵巢癌细胞SKOV3和人肝癌细胞HepG2的生长抑制活性。采用半数致死剂量法观察F3-PE39KDEL对小鼠的毒性反应。以接种人肺癌细胞的裸鼠为模型,观察F3-PE39KDEL的抗肿瘤作用。结果显示,培养72、120 h时,F3-PE39KDEL对于人肺癌细胞A549和人乳腺癌细胞MCF-7具有显著的抑制活性,IC50分别为0.41、0.42μg/mL,4.95、2.53μg/mL。毒性试验结果显示,静脉注射给予F3-PE39KDEL后小鼠的半数致死量为1.1782 mg/kg,动物出现自发运动减少,死亡集中在给药后1 d内,死亡动物及实验结束存活动物剖检未见异常。F3-PE39KDEL对荷瘤裸鼠具有较强的抗肿瘤活性,剂量分别为0.1、0.2、0.4 mg/kg,其抑制率分别达到37.0%、43.2%、53.1%,显示出良好的量效关系。F3-PE39KDEL在靶向治疗肿瘤方面具有较好的应用前景。
- 郭凯王贻莲周红姿陈泉陈凯李纪顺扈进冬杨合同
- 关键词:受体肿瘤
- 气相色谱-质谱法评价保水剂对盐地种植椒样薄荷精油产量及品质的影响被引量:1
- 2015年
- 利用气相色谱-质谱(GC-MS)法研究了保水剂对盐地种植椒样薄荷精油产量及品质的影响.实验结果显示:施加沃特保水剂有效缓解了200 mmol·L-1NaCl胁迫对椒样薄荷生长的抑制,同时有效提高了精油的产量和含量.这种效果表现出了浓度依赖性,保水剂含量为每株1.5 g和2.0 g的处理效果较好.GC-MS的分析结果表明,200 mmol·L-1NaCl胁迫下,每株0.5 g和1.0 g的保水剂处理不能有效的改善9种精油主要成分的含量使其达到合格范围;而每株1.5 g和2.0 g的保水剂处理能够使9种精油主要成分的含量全部达到合格范围,提升了精油的品质.
- 李哲郭凯李兆华王雯雯陈泉李纪顺杨合同
- 关键词:NA保水剂椒样薄荷精油气相色谱-质谱法
- 含天蚕素AD和BuforinⅡ的抗菌肽复合液的生产及纯化方法
- 本发明提供了一种有关抗菌肽复合液的生产及纯化方法,本方法以保藏编号为CGMCCNo.4588的工程菌为出发菌种,经过发酵生产和分离纯化得到天蚕素AD和BuforinⅡ的抗菌肽复合液。本发明的有益效果是,以乳糖代替常规的诱...
- 扈进冬陈泉吴远征李纪顺杨合同
- 文献传递
- 重组大肠杆菌利用乳糖自诱导系统融合表达天蚕素AD和蛙BuforinⅡ被引量:1
- 2014年
- 以包含质粒pET-Trx-CAD-BuforinⅡ的大肠杆菌BL21(DE3)为研究对象,开发了一种利用乳糖自诱导方式表达天蚕素AD和蛙BuforinⅡ的表达系统。首先,在LB培养基中研究了乳糖浓度、诱导时机和诱导时间对目的蛋白表达的影响。然后,利用"分解代谢物阻遏"原理构建乳糖自诱导表达系统,以"葡萄糖+主碳源"两种碳源的依次代谢将蛋白表达过程分为两个阶段:第一阶段为菌体生长阶段,菌体利用葡萄糖生长,乳糖无法进入细胞诱导蛋白表达;第二阶段为蛋白表达阶段,葡萄糖耗尽,菌体开始利用主碳源生长;同时乳糖进入细胞诱导蛋白表达。最后,利用优选的"葡萄糖+木糖"组合自诱导表达天蚕素AD和BuforinⅡ的融合蛋白,得到的目的蛋白占全菌总蛋白含量的45.2%。
- 陈泉扈进冬李哲郭凯李纪顺杨合同
- 关键词:大肠杆菌乳糖
- 高产Monacolin K红曲霉菌种的筛选及液态发酵条件优化被引量:14
- 2015年
- 为了提高红曲霉(Monascus)液态发酵生产Monacolin K的能力,一种新型的常压室温等离子体(ARTP)诱变技术被应用于产Monacolin K红曲霉菌株的诱变选育工作;同时,通过构巢曲霉(Aspergillus nidulans)平板对峙培养的筛选方法,选育获得较初始红曲霉菌Monacolin K产量提高60%以上的突变菌株MP60-6。确定发酵培养基组成为甘油5%,米粉50 g/L,蛋白胨15 g/L,Na NO32 g/L,Mg SO41 g/L,Zn SO42 g/L,KH2PO41.5 g/L,并进一步确定在发酵第3、第4天添加0.1%的乙酸和0.2%的柠檬酸,发酵第8天补加10%的甘油。在上述条件下发酵17 d后Monacolin K产量可以达到1 302 mg/L,为出发菌株产量的2.66倍。
- 陈泉吴远征扈进冬王贻莲赵晓燕赵吉兴李耀李纪顺
- 关键词:红曲霉诱变液态发酵
- 哈茨木霉LTR-2对椒样薄荷耐盐生理特性的影响被引量:4
- 2014年
- 木霉菌(Trichoderma spp.)是一类能够刺激作物生长并增强其抵抗生物和非生物胁迫能力的多功能益生真菌,目前国内外对于生防木霉菌在增强植物耐盐性及其作用机理方面尚缺乏深入、系统的研究。本文研究了生防木霉菌LTR-2对椒样薄荷耐盐生理特性的影响,结果显示,在200 mmol/L NaCl胁迫下,LTR-2有效缓解了盐胁迫对椒样薄荷的生长和光合的抑制。探讨了LTR-2接种的椒样薄荷耐受NaCl胁迫的生理生化基础,结果表明,LTR-2提高了椒样薄荷的抗氧化活力,减少了活性氧积累;增强了细胞膜和液泡膜H+-ATPase以及Na+/H+逆向转运蛋白等离子转运通道的活性,从而调节盐分的吸收和分布。这些结果为椒样薄荷在盐碱地区的引种及木霉菌剂的开发应用提供了实验依据。
- 李哲郭凯吴晓青陈泉李纪顺杨合同
- 关键词:NACL胁迫椒样薄荷耐盐性
- 枯草芽孢杆菌芽孢和表面活性素同时高产的液体发酵方法
- 本发明公开了一种枯草芽孢杆菌芽孢和表面活性素同时高产的液体发酵方法。本发明利用发酵条件控制枯草芽孢杆菌在发酵前期不产生芽孢,从而大量形成表面活性素;到发酵后期通过加入MnCl<Sub>2</Sub>和冰水浴诱使芽孢短时间...
- 陈泉郭凯周红姿李纪顺杨合同
- 文献传递
- 菌株TLB15发酵培养基的优化及其发酵液的杀虫活性被引量:3
- 2014年
- 采用正交试验对菌株TLB15的摇瓶发酵培养基进行了优化,结果表明:优化后的培养基为玉米粉3%、豆粉2%、蔗糖1%、硫酸铵0.1%、磷酸氢二钾0.3%、磷酸二氢钾0.2%、七水硫酸镁0.04%。采用10L小型发酵罐发酵48h后活菌数达4.52×109 cfu·mL-1,产芽孢率为90%。室内生物测定结果表明,菌株TLB15发酵液在药后72h对小菜蛾2龄幼虫和甜菜夜蛾2龄幼虫的校正死亡率为66.93%和69.07%。
- 赵晓燕吴晓青赵忠娟陈泉李哲李纪顺杨合同
- 关键词:发酵培养基优化正交设计杀虫活性
- 木霉与土壤生态环境关系研究综述被引量:3
- 2013年
- 木霉是土壤真菌中的重要群落,在植物根际分布非常广泛,是一种很有应用价值的植物生防菌。从土壤生态环境对木霉的影响和木霉对土壤的修复作用,对木霉与土壤生态环境的关系展开论述,并对土壤木霉的应用进行了展望。
- 陈泉赵晓燕李纪顺杨合同
- 关键词:木霉土壤生态环境土壤修复