陈德珩
- 作品数：14 被引量：67H指数：4
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- 123 I-血管内皮生长因子结合位点在人类肿瘤细胞的表现特征
- 2014年
- 目的 探索肿瘤血管内皮生长因子（VEGF）受体（VEGFR）在人类肿瘤细胞的表现特征.方法 将123 I-VEGF165和123 I-VEGF121标记于人脐静脉内皮细胞（HUVEC）、人类肿瘤细胞株（HMC-1、A431、KU812、U937、HEP-1、HEP-G2、HEP-3B、Raji）、多种人体肿瘤及邻近的非瘤组织和外周血液细胞.统计特异性结合位点最大结合容量（Bmax）值、解离常数（Kd）以及放射性同位素的50％特异性结合所需浓度（IC50）数值.判断各种细胞与123I-VEGF165和123I-VEGF121结合亲和力、数量、特异性.结果 在HUVEC表面发现两种123I-VEGF165结合位点,而123I-VEGF121是单类结合位点.123I-VEGF121位于特定细胞株（HUVEC、HEP-1、HMC-1）和特殊的早期肿瘤（早期黑色素瘤、乳腺导管内癌、卵巢癌和脑膜瘤）中.与外周血液细胞和非瘤组织相比,肿瘤细胞的VEGFR数量明显较多.在123I-VEGF165标记的VEGFR中,早期黑色素瘤、乳腺导管内癌、肝细胞癌、乳头状甲状腺癌、卵巢癌、肾细胞癌的Bmax值分别为45±13、13±3、25 ±8、5±2、42±12、20 ±6.而在123I-VEGF121标志的VEGFR中,早期黑色素瘤、乳腺导管内癌、卵巢癌的Bmax值分别为30 ±8、8±3、20 ±6.123I-VEGF165和123I-VEGF121与诸多人体肿瘤细胞或组织具有特异性结合能力.与123I-VEGF121相比,123I-VEGF165可与更多不同种类的肿瘤细胞相结合,且容量大.结论 123I-VEGF165可能是肿瘤体内成像的一个潜在有效靶点,有望用于肿瘤的诊断与治疗.
- 陈文标李树人齐素文陈德珩戴勇
- 关键词：血管内皮生长因子类肿瘤放射性核素成像
- 人胰激肽释放酶基因的克隆及表达载体的构建被引量：1
- 2002年
- 目的 :克隆中国人胰组织激肽释放酶基因 ,构建原核、真核表达载体 ,为开发生产人源激肽释放酶基因工程产品及人源激肽释放酶基因药物奠定基础。方法 :提取人胰腺组织总RNA ,逆转录后琼脂糖电泳初步鉴定PCR产物。将激肽释放酶cDNA回收、补平后插入克隆质粒KS ,酶切鉴定后 ,对激肽释放酶基因进行序列测定分析。用双酶切法 ,插入原核表达载体PET 2 8b ,真核表达载体pBacPAK9质粒中。酶切鉴定后 ,进行序列测定分析。结果 :本实验克隆的激肽释放酶基因与GenBank报告的激肽释放酶基因相比 ,碱基序列相同。测序分析表明人胰组织激肽释放酶基因经酶切 ,正确插入到原核表达载体PET 2 8b ,真核表达载体pBacPAK9质粒中。结论 :克隆并构建成功中国人组织激肽释放酶基因的原核、真核表达载体 。
- 杜珙李体远黄瑞芳陈德珩戴勇
- 关键词：激肽释放酶基因载体胰腺真核表达载体肾小球肾炎
- 核酸杂交检测HBV前C区变异
- 2002年
- 石之嶙李体远戴勇杜珙黄瑞芳陈德珩
- 关键词：HBV前C区变异乙型肝炎病毒感染
- 抑郁模型大鼠海马内特异性microRNAs的筛选以及柴胡疏肝散的干预作用被引量：34
- 2013年
- 目的:筛选慢性应激抑郁模型大鼠海马内特异性表达的microRNAs,同时观察中药柴胡疏肝散对海马内microRNAs表达的影响。方法:将SD大鼠随机分为正常对照组、模型对照组、柴胡疏肝散组。采用慢性轻度不可预见性应激配合孤养复制抑郁模型,运用敞箱试验和蔗糖水消耗实验观察大鼠行为改变;采用microRNA芯片检测海马内microRNAs的表达。结果:与对照组比较,在模型组海马内差异达2倍以上的特异性miRNA共计有13个,其中下调的miRNA包括miR-298,miR-130b,miR-135a,miR-323,miR-503,miR-15b,miR-532,miR-125a,上调的miRNA包括miR-7a,miR-212,miR-124,miR-139,miR-182;在这13个特异性miRNA中有2个(即miR-125a和miR-182)在柴胡疏肝散组中予柴胡疏肝散干预后又恢复正常。结论:该研究初步发现与抑郁症发病相关的海马内13个特异性microRNAs,其中miR-125a和miR-182在中药柴胡疏肝散干预后恢复正常,这2个microRNAs可能是中药柴胡疏肝散抗抑郁的作用靶点,应进一步分析其靶基因以及作用机制。
- 曹美群陈德珩张春虎吴正治
- 关键词：MICRORNAS抑郁模型海马柴胡疏肝散
- sHLA-G对复发性流产患者滋养细胞侵袭功能的影响被引量：4
- 2012年
- 【目的】探讨外源性可溶性人类白细胞相关抗原G(sHLA-G)对不明原因复发性流产(RSA)患者滋养细胞侵袭功能的影响,为探索RSA的有效治疗措施提供依据.【方法】正常组30例,为正常早孕人流患者,无自然流产史,孕周8-10周;RSA组20例,相应孕周RSA患者,绒毛组织20例。滋养细胞原代培养,分离绒毛外滋养细胞,正常组患者每例滋养细胞接种1瓶、RSA患者每例3瓶备实验用。正常组及RSA对照组、研究1组、研究2组分别以生理盐水、生理盐水、5×10-4/L%终浓度sHLA-G、0.1%终浓度sHLA-G干预培养16 h,取悬浮细胞获得绒毛外滋养层细胞(EVCT)团,加入CD146单克隆抗体,采用流式细胞仪检测各组滋养细胞CD146阳性率。【结果】①正常组EVCT CD146阳性率为(63.29±6.76)%,明显高于RSA对照组(10.61±3.34)%,P<0.01。②研究1组EVCT的CD146的阳性率为(30.61±7.52)%,较RSA对照组显著升高,P<0.01;研究2组EVCT的CD146的阳性率为(64.15±9.54)%,显著高于研究1组及RSA对照组,P均<0.01,与正常组比较差异无统计学意义,P>0.05。【结论】外源性sHLA-G干预可显著提高RSA患者EVCT侵袭功能,可望成为RSA的有效治疗措施之一。
- 王英兰苏放明陈德珩周雅莹
- 关键词：复发性流产滋养细胞
- 具有靶向作用的人类胰岛素原表达载体的构建与鉴定
- 2010年
- 目的构建能够靶向作用于大鼠胰岛细胞的绿色荧光蛋白及人类胰岛素原表达载体,为糖尿病的特异性基因治疗奠定基础。方法采用PCR法从SD大鼠全血基因组中扩增大鼠胰岛素I启动子(RIP)片段,将其克隆至pIRES2-EGFP质粒载体的启动子位点,用重叠延伸PCR法从人类全血基因组DNA扩增获得人类胰岛素原基因片段,插入pIRES2-EGFP质粒载体的多克隆位点,构建大鼠胰岛素I启动子驱动的人类胰岛素原及绿色荧光蛋白表达载体。结果构建的RIP-人类胰岛素原及绿色荧光蛋白表达载体经酶切及测序结果均正确。结论构建了受大鼠胰岛素I启动子驱动的人类胰岛素原及EGFP表达载体,为开展糖尿病的特异性基因治疗奠定了基础。
- 朱莹文锦丽文锦丽林秀华陈德珩
- 关键词：糖尿病胰岛素基因治疗
- 胃癌患者长链非编码RNA的差异表达
- 2015年
- 目的研究胃癌患者癌组织长链非编码RNA(lncRNA)的差异表达。方法提取8例胃癌患者癌组织与癌旁对照样本中的总RNA,应用lncRNA表达谱芯片检测技术对两者之间差异表达的lncRNA进行分析。在差异表达倍数≥10的lncRNA中选择4个lncRNA(uc010lhn、uc.341、AK096257及BC048127),利用荧光定量RT-PCR技术在细胞水平对微阵列检测结果进行验证。结果胃癌患者癌组织与癌旁对照样本间差异表达的lncRNA共2 621个,其中1 215个表达上调,1 406个表达下调,差异表达倍数≥10的lncRNA 22个。荧光定量RTPCR验证结果显示,与正常胃上皮细胞系GES-1相比,4种lncRNA(uc010lhn、uc.341、AK096257及BC048127)在胃癌细胞系中的表达具有显著差异,与芯片检测结果一致。结论多种lncRNA在胃癌患者肿瘤组织中呈异常表达,其中uc010lhn及uc.341等在胃癌发生、发展过程中可能起一定的作用。
- 朱莹林小聪林烈文陈德珩陈文标黄建溶戴勇潘凯涂植光
- 关键词：胃癌长链非编码RNA基因表达
- 中国人胰腺组织激肽释放酶的基因克隆、制备及功能研究
- 李体远戴勇杜珙黄瑞芳石之磷陈德珩朱莹彭武建
- 利用基因工程技术，提取正常人胰腺组织mRNA， 采用oligo（dT）引物进行RT-PCR，扩增中国人胰组织激肽释放酶基因，完成系列原核、真核载体的构建，选择最佳的实验条件进行中国人胰激肽释放酶的表达。应用改良电位滴定法...
- 关键词：
- 关键词：高血压生物医药
- 人组织激肽释放酶成熟蛋白在大肠杆菌中的高效表达被引量：8
- 2003年
- 将编码人组织激肽释放酶成熟蛋白的基因片段扩增并分别克隆到原核表达载体pET2 8(b)及分泌型表达载体pET2 0 (b)中 ,使其C端融合 6×HisTag序列 .转化不同受体菌 ,IPTG诱导表达后利用SDS PAGE、免疫印记等方法对重组蛋白进行分析 .在 6株基因工程菌株中 ,均表达出分子量约30kD的激肽释放酶融合蛋白 ,其中激肽释放酶在pET2 8载体中的表达水平高于pET2 0载体 .pET2 8和pET2 0载体表达的重组激肽释放酶蛋白分别占菌体总蛋白约 2 6 %和 10 % .Western印迹分析表明 ,目的蛋白可与抗人血清KK单克隆抗体发生特异性反应 .未经纯化的激肽释放酶融合蛋白具有一定的水解苯甲酰精胺酸乙酯 (BAEE)的能力 .在大肠杆菌中获得了人组织激肽释放酶的高效表达 ,表达产物具有免疫原性和生物活力 。
- 李体远杜珙蔡筱彦石之磷黄瑞芳陈德珩戴勇肖德明
- 关键词：人组织激肽释放酶大肠杆菌基因克隆
- 导入人组织激肽释放酶基因治疗肾性高血压的实验研究
- 戴勇李体远彭武建杜珙朱莹黄瑞芳石之磷陈德珩
- 该项目利用基因工程技术，提取正常人胰腺组织RNA，采用oligo（dT）引物进行RT-PCR。回收PCR产物，插入质粒KS。利用高保真pfu Taq酶扩增激肽释放酶基因片段，产物酶切处理后，和不同载体片段用T4连接酶连接...
- 关键词：
- 关键词：组织激肽释放酶基因治疗肾性高血压
