脆性 X 综合征是一最常见的 X 性连锁的遗传性智力低下病,是因 X 染色体上脆性部位的FMR—1基因内一段不稳定的 CGG 重复序列的异常扩增所致。本文建立了多聚酶链反应—变性梯度聚丙烯酰胺凝胶电泳(PCR—DGGE)方法,并成功地检测出83例正常人 X 染色体脆性位点FMR—1基因内 CGG 重复序列片段。在上述83例正常人中发现有16个不同大小的等位基因,说明该重复序列的长度在中国人中具有丰富的多态性,最常见的等位基因大小为308bP,有29个CGG 重复。文章对 PCR 方法扩增该 CGG 重复序列片段成功的关键如在反应体系中加入 dGTP 类似物7—deaza—dGTP,DMSO 以及它们在反应体系中理想的浓度等进行了详细的讨论。由于该方法能显示800bP 以内的 DNA 片段,并能准确确定 FMR—1基因内 CGG 重复序列的 CGG 重复数.在用于脆性 X 综合征的女性携带者检出时特别有意义,可根据 CGG 重复数估计其后代受累的风险率及受累程度。该方法稳定可靠,简便宜行,适合推广应用于脆性 X 综合征患者及携带者的临床诊断和遗传咨询及筛查。
