阮承迈 作品数:26 被引量:65 H指数:5 供职机构: 军事医学科学院微生物流行病研究所 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 北京市自然科学基金 吉林省自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 农业科学 更多>>
鸡马立克氏病肿瘤组织细胞端粒长度的测定 2000年 用马立克氏病病毒 ( MDV)京 -1株血毒对 SPF鸡攻毒 ,7周后扑杀 ,采取各内脏组织 ,一部分组织做病理切片 ,发现有肿瘤细胞浸润者即判定为阳性 ;另一部分组织用于端粒长度测定。以 DIG标记的探针( TTAGGG) 4,通过 Southern Blot方法测定细胞端粒长度 ,结果表明 ,阳性肾脏、肝脏、脾脏、神经。 陈守义 阮承迈 张玉静 马永红 马鹤雯 吴东林 谌旭红 吴明福关键词:鸡马立克氏病 肿瘤细胞 端粒长度 端粒酶活性 体外培养小鼠生殖细胞的碱性磷酸酶活性研究 被引量:11 2003年 研究小鼠生殖细胞体外培养时碱性磷酸酶 (AP)活性表达 ,为鉴别精原细胞提供依据。分别培养 2日龄 ,6日龄 ,12日龄仔鼠及成年鼠生精上皮细胞 2 4~ 4 8h,进行 Gomori- Takamat-su组化染色 ,观察各类细胞形态及染色特性。结果表明 ,体外培养 2 4~ 4 8h,管周细胞为铺展面积较大的不规则形状 ,细胞表达 AP活性。支持细胞 (Sertoli cell)为不规则形状 ,不表达 AP活性。生殖细胞均为圆球形。性原细胞和精原细胞均表达 AP活性 ,部分精母细胞也表达 AP活性。 李莲军 何志云 龚伟 苗永旺 秦先玉 黄淑芬 阮承迈关键词:体外培养 小鼠 生殖细胞 碱性磷酸酶 酶活性 基于IRES序列的抗体定点整合载体构建和表达 2004年 目的 :比较不同全功能抗体基因之间的表达量。方法 :构建了基于FLP IN/FRT pcDNA5和ECMV IRES的抗体双表达载体 ,把抗HBsAg抗体轻链、重链基因克隆到该表达载体上进行表达。结果与结论 :在CHO细胞中瞬时表达时没有检测到抗体表达 ,但在用抗性筛选到的克隆中有稳定的表达 ,各克隆之间表达量差异小于 4 0 % ,为各种不同基因工程抗体表达量的筛选和优化提供了方法。 阮承迈 赵金红 安小平 李建民 郝晓萌 童贻刚 陈薇 王海涛关键词:CHO细胞 乳腺癌的hTERT基因表达和端粒酶活性关系分析 被引量:2 2001年 目的 为了分析端粒酶催化亚基在乳腺癌组织中的表达情况。方法 对52例各型乳腺癌病理样本进行了端粒酶活性(TRAP-ELISA方法)和端粒酶催化亚基(hTERT)mRNA表达检测(RT-PCR)。同时还比较了同一样本的癌组织和癌组织端粒酶活性和hTERT的表达情况。结果 表明乳腺癌组织样本中94%呈端粒酶阳性,癌旁组织中有部分样本(2/35)呈弱阳性;hTERT(P<0.01)。结论 认为端粒酶活性可能成为乳腺癌恶性程度或肿瘤易发指标,并且有可能采用更为廉价的RT-PCR进行辅助诊断。 赵金红 刘卫林 范业萍 阮承迈 陈守义 吴东林 张玉静 杨光荣 孙桂娟 蔡勇关键词:乳腺癌 HTERT基因 端粒酶 基因表达 活性 一步法快速检测高致病性禽流感(H5N1)的方法建立 2004年 禽流感目前是世界范围内流行最广的人兽共患病之一,给世界经济发展和人类健康带来巨大的危害.如何快速诊断是目前亟待解决的问题之一.目前我国普遍采用的禽流感检测方法是世界动物卫生组织推荐使用的鸡胚病毒分离法.这种方法虽然精确,但缺点也很明显--耗时过长,从提取样品到最终出具结果,最少需要21天时间.这种方法已不能适应我国口岸快速通关放行的需要,给出口企业带来种种不便,也不能满足我国加入世贸组织后国内消费者对禽肉安全性的需求.北京检验检疫局与深圳匹基公司合作,利用分子生物学手段,检测高致病性禽流感病毒核酸,无须做鸡胚病毒分离培养,可将检测时间从原来的21天缩短为4个小时.…… 陈守义 阮承迈 王海端粒酶活性在哺乳动物细胞中的表达 被引量:2 2003年 为研究端粒酶活性在哺乳动物细胞中的激活 ,构建了端粒酶催化亚基 (human telomerase reverse transcriptase,h TERT)和端粒酶 RNA组分 (h TR)基因的真核表达载体 ,分别在无端粒酶活性的 DK细胞株和人肝癌细胞中进行表达 ,以 TRAP-银染和 TRAP- EL ISA定量方法测定转染细胞。结果显示 ,在人肝癌细胞株中仅 h TERT表达即可使端粒酶活性显著增加 ,而 DK细胞中 h TERT必须和 h TR同时转染才有端粒酶活性表达。这一结果表明 ,端粒酶活性表达主要和 h TERT/ h TR有关 ,采用人的端粒酶 h TERT/ h TR在其他哺乳动物细胞中表达端粒酶活性是可行的。 阮承迈 陈守义 吴东林 李鹏 马鹤雯 马永红 张玉静关键词:端粒酶活性 哺乳动物细胞 人肝癌细胞 端粒(酶)同癌症与衰老关系的研究进展 被引量:5 2000年 端粒是真核生物染色体的天然末端,具有稳定染色体结构,避免遗传信息在复制过程中丢失的作用。端粒酶是端粒复制所必须的一种特殊的DNA聚合酶,在大多数的正常人体细胞中没有活性。在近年来的研究中,人们发现“衰老者的端粒缩短”,而且在约85%的肿瘤细胞中检测到了端粒酶活性。这些事实提示人们:端粒、端粒酶同癌症与衰老之间存在相关性。 马鹤雯 张玉静 阮承迈 陈守义 张立树关键词:端粒 端粒酶 衰老 癌症 抗HBsAg抗体在CHO细胞中表达量提高研究——抗体基因自身因素对表达量影响探索 基因工程抗体由于其特异性强、副作用低等特点在临床上将发挥越来越重要的作用,如应用于抗癌、免疫相关疾病等治疗。据统计在2010年前将有超过100种抗体应用于临床。抗体工程研究中有两个难点:一是抗体的人源化,以解决影响抗体的... 阮承迈关键词:真核表达 CHO 抗体基因 文献传递 恶性疟原虫海南株(FCC1)翻译控制肿瘤蛋白(TCTP)基因的克隆及序列测定 被引量:4 2002年 为了获得翻译控制肿瘤蛋白 (TCTP)基因 ,提取恶性疟原虫海南株 (FCC1)总RNA ,直接用总RNA反转录成单链DNA ,再用长距PCR方法扩增出双链cDNA .根据小鼠约氏疟原虫TCTP基因序列设计引物 ,以cDNA为模板合成了恶性疟原虫海南株TCTP基因 .以pMD18 T为载体 ,用大肠杆菌XL1 blue对基因克隆 .测序结果表明 ,此基因序列与小鼠约氏疟原虫TCTP基因序列有 85 %同源性 .由此基因序列推导出的TCTP氨基酸序列 ,与小鼠约氏疟原虫TCTP氨基酸序列有 88%同源性 .进入GenBank国际基因库 (美国 )检索 ,所克隆的基因与基因库中恶性疟原虫基因同源性为 97% ;由所克隆的基因序列推导的TCTP氨基酸序列 ,与国际基因库恶性疟原虫TCTP基因推导的TCTP氨基酸序列仅有 1个氨基酸差异 . 傅作申 程远国 张玉静 阮承迈 单成启 侯禹男 陈知航 陈泽建 李英关键词:恶性疟原虫海南株 克隆 哺乳动物细胞产生抗体的产量影响因素及对策 2004年 单克隆抗体作为临床制剂在未来的10年内将有很好发展前景,经过近30年的研究,抗体的特异性已经有了较 好的解决方案,而目前限制其应用的瓶颈为抗体产量,如何提高单克隆抗体的产量仍然是我国抗体研究的一项重要工作。本 文就抗体产量的各种影响因素和现有解决方法进行了综述。 阮承迈 王海涛关键词:基因序列 影响因素