钟连声
- 作品数：13 被引量：31H指数：3
- 供职机构：中国医科大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金辽宁省自然科学基金辽宁省教育厅高等学校科学研究项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学文化科学更多>>
- 应用细胞芯片捕获人正常胃细胞系、胃癌细胞系细胞并检测其细胞表面CD表型的差异被引量：2
- 2010年
- 目的构建一种细胞芯片,根据芯片表面固定的CD抗体与细胞膜表面CD抗原免疫结合原理捕获细胞,检测人正常胃黏膜细胞系GES-1、胃腺癌细胞系7901细胞表面CD抗原表达的差异。方法将64种CD抗体蛋白固定在化学修饰醛基玻片上制成抗体阵列,将GES-1、7901细胞用胶原酶消化制成单个细胞悬液,用吖啶橙荧光标记后与芯片进行孵育,洗去芯片上游离的细胞,激光扫描仪检测芯片上CD抗体各点捕获到细胞的荧光信号,以此判定GES-1、7901细胞膜表面CD表型情况。结果发现CD9、CD13、CD29、CD44、CD49e、CD55、CD71、CD95抗体点均捕获到GES-1、7901细胞;CD15、CD24抗体点仅捕获到GES-1细胞;CD77、CD133、CD103、CD64抗体点仅捕获到7901细胞。结论 CD15和CD24可能是人正常胃黏膜细胞系GES-1细胞的表面标志物,CD77、CD133、CD103、CD64可能是人胃癌细胞系7901细胞的标志物。
- 马静红何群徐晓雪王天骄潘忠诚钟连声张玉魁赵雨杰
- 关键词：细胞芯片GES-1细胞
- 利用OWLS研究二级结构对固液界面DNA杂交动力学的影响
- 目的：
基因芯片技术自上世纪末诞生以来，取得迅速发展，并已广泛应用到了基因表达谱分析、新基因发现、基因突变及多态性分析、基因组文库作图、疾病诊断和预测、遗传病相关基因分析、药物筛选、基因测序、基因调控网络分析等多个...
- 钟连声
- 关键词：基因芯片碱基错配荧光标记法
- 文献传递
- 生物芯片在微生物学研究中的应用被引量：4
- 2016年
- 生物芯片是用于检测生物样品中生物分子及生化指标的微小装置,根据其检测靶标不同分为基因芯片、蛋白芯片、细胞芯片、组织芯片及生化芯片;根据其结构和工作原理不同分为阵列型芯片、液体芯片和微流体芯片。由于具有微量化、并行性、快速、高通量和自动化检测的特点,生物芯片被广泛地应用于生物学研究领域。本文重点论述生物芯片在微生物学研究中的应用。
- 赵雨杰钟连声何群梁彬王绍成潘忠诚王天骄
- 关键词：生物芯片微生物学基因检测蛋白检测
- 转录因子HSF4的生物信息学分析被引量：2
- 2016年
- 热休克转录因子4（heat shock transcription factor 4,HSF4）是热休克转录因子HSF家族成员,近年发现HSF4除发挥调控热休克蛋白（heat shock protein,HSP）表达的功能外,亦直接或间接调节许多非热休克基因的表达,参与细胞生长发育及多种生理病理过程。现对9个物种的HSF4蛋白序列进行了多序列对比、进化痕迹分析和蛋白质特定功能区域分析,发现两个保守区域：一个是75-119保守区域,其部分位于文献报道的HSF家族的DNA结合区域,该区域呈现锤子状颈环结构,中部富含亲水氨基酸,提示该颈环结构有嵌入DNA结构内部解开其双链结构起转录调控的作用;另一保守区域在176-230,呈现卷曲螺旋（coil）结构,可能跟HSF4与DNA识别、结合、固定功能相关。对HSF4的生物信息学分析可以为其功能研究奠定理论基础。
- 马汝海钟连声王天骄潘忠诚赵雨杰王绍成何群
- 关键词：生物信息学分析转录调控
- CEACAM1异常表达对白血病BALL-1细胞增殖的影响
- 2014年
- 通过si RNA技术抑制癌胚抗原相关粘附分子CEACAM1在人急性B淋巴细胞白血病细胞系BALL-1中的表达,体外实验研究异常表达于白血病B细胞的CEACAM1对细胞增殖的影响。应用CCK-8法测定细胞增殖发现CEACAM1表达下调后BALL-1细胞的增殖能力明显下降。细胞周期分析结果显示CEACAM1被抑制后细胞增殖状态表现为S期细胞百分比降低,G0/G1期细胞比例升高,提示CEACAM1表达下调是通过引起细胞周期停滞在G0/G1期来降低细胞增殖的,表明CEACAM1本身对白血病B细胞具有促进增殖的作用。
- 赵文瑾刘丹丹钟连声何群赵雨杰
- 关键词：CEACAM1增殖
- 乙型肝炎病毒基因生物信息学分析及特异片段的制备被引量：3
- 2008年
- 目的制备HBV基因分型芯片模板。方法通过不同基因型HBV全基因组的序列比对,选取6个碱基位点作为分型位点,应用重叠区扩增基因拼接法(SOEing法)对C型HBV片段进行点突变。结果在所选位点上成功引入点突变。结论SOEing法是一种简便引入点突变的方法,可以应用此法制备HBV基因分型检测基因所需的模板DNA。
- 徐晓雪房凯钟连声潘忠诚李超胥威赵雨杰
- 关键词：重叠区扩增基因拼接法乙型肝炎病毒基因分型
- 利用光波导模式光谱生物传感器研究二级结构对固-液界面DNA杂交动力学的影响
- 2011年
- 目的探讨探针和靶分子二级结构对基因芯片杂交过程的影响,并完善基因芯片设计方法,提高基因芯片的重复性和特异性。方法应用二级结构分析软件Mfold设计3对25-mer完全互补的具有不同二级结构的探针和靶分子(P0T0、P3T3、P4T4)及1对尾端有2个碱基错配的探针和靶分子(P4T3)。制备醛基化传感器芯片,将终浓度为1、2、5、10、20μmol/L的探针分别固定在芯片上,与浓度为5μmol/L的N,N′-对羧苄基吲哚三菁(Cy5)标记靶分子杂交,荧光图像扫描仪检测确定最佳杂交探针浓度;以最佳探针浓度构建芯片,分别与终浓度为0.1、0.2、0.5、1.0、2.0、5.0μmol/L的Cy5标记靶分子杂交,荧光图像扫描仪检测确定最佳杂交靶分子浓度;同时用光波导模式光谱生物传感器(OWLS)实时监测其杂交过程。以0.4%SDS和0.1%NaOH分别处理杂交后芯片10、20、30、60min,荧光图像扫描仪检测芯片再生稳定性。控制靶分子进样速度和杂交时间分别为15μl/h、7h和180μl/h、0.5h,OWLS测定杂交复合物质量、杂交效率和反应速率。结果荧光图像扫描结果显示,最佳杂交探针和靶分子浓度分别为10、1μmol/L,传感器芯片构建成功且具有再生稳定性。15μl/h、7h和180μl/h、0.5h条件下,P0T0、P3T3、P4T4、P4T3杂交复合物的质量(ng/cm2)分别为45和30、43和20、40和13、42和18;杂交效率(%)分别为40.9和27.3、39.1和18.2、36.4和11.8、38.2和16.4;杂交7h时的反应速率常数[K,105L/(mol·s)]值分别为0.465、0.247、0.081、0.247。结论在一定时间内,探针和靶分子二级结构增多可导致杂交时间延长,杂交速率和效率降低。应用OWLS成功建立了一种研究固-液界面DNA杂交过程的新平台,为研究基因芯片的杂交过程提供了一个新方法。
- 钟连声齐华文潘忠诚马汝海何群姜雪赵雨杰
- 关键词：寡核苷酸序列分析核酸杂交
- SARS-CoV S蛋白表位的表达及鉴定被引量：2
- 2007年
- 目的:制备SARS冠状病毒S蛋白串联表位重组蛋白,为SARS的防治提供新型抗原蛋白。方法:应用抗原表位分析软件分析S蛋白的表位。选取其中16个表位,设计并合成表位串联重组蛋白编码基因Z,构建其原核细胞表达重组体,在大肠杆菌BL21(DE3)表达该重组表位蛋白Z,应用Ni离子亲合层析法纯化重组蛋白Z做抗原,采用皮下注射法免疫新西兰白兔。斑点杂交法测定抗Z-血清中S蛋白的抗体,ELISA法检测Z蛋白的抗原性。结果:构建了S蛋白重组表位蛋白Z的原核表达体,在BL21菌中表达了Z蛋白,Z蛋白免疫新西兰白兔后获得了抗Z血清。斑点杂交分析显示,抗Z血清识别哺乳动物细胞中表达的S蛋白。ELISA检测结果显示,抗Z血清识别SARS冠状病毒抗原。结论:建立了制备SARS冠状病毒S蛋白重组表位蛋白的方法,为防治SARS提供了新型抗原蛋白Z。
- 房凯钟连声马汝海王绍成潘忠诚张玉魁何群赵雨杰
- 关键词：SARS冠状病毒S蛋白表位抗原
- 一、中性鞘磷脂酶2在小鼠肝肿瘤发生中作用的研究论文 二、SPNS2促进Aβ引起小胶质细胞炎性活化的机制研究
- 目的:鞘脂是一类包含鞘氨醇骨架的脂类。其代谢产物,如神经酰胺(Ceramide)、鞘磷脂(Sphingomyelin)和磷酸鞘氨醇(S1P)参与到机体的凋亡、增殖、应激反应、坏死、炎症、自噬、衰老、和分化等一系列生理、病...
- 钟连声
- 关键词：神经酰胺阿尔兹海默病小胶质细胞神经炎症
- 文献传递
- TNF-α对人肝癌细胞系CD15和CD15s含量及细胞侵袭性的影响被引量：6
- 2012年
- 目的检测TNF-α对人肝癌细胞系中CD15、CD15s和ST3GaL糖基转移酶含量及细胞侵袭能力的影响。方法应用Western blot方法检测TNF-α作用前后人原发性肝癌细胞系HepG-2和人高转移肝癌细胞系SMMC-7721中CD15,CD15s和ST3GaL糖基转移酶含量的变化,Transwell检测TNF-α作用前后HepG-2、SMMC-7721细胞侵袭力的变化情况。结果 TNF-α作用后,HepG-2细胞系CD15含量较对照组下降(P<0.05),CD15s含量较对照组明显上调(P<0.05),ST3GaL糖基转移酶家族蛋白(6种)中ST3GaL-Ⅱ和ST3GaL-Ⅳ表达较对照组明显上调(P<0.05),其他4种ST3Gal-Ⅰ、ST3Gal-Ⅲ、ST3Gal-Ⅴ和ST3Gal-Ⅵ的表达无明显变化(P>0.05),细胞侵袭力提高(P<0.05)。SMMC-7721细胞系CD15、CD15s含量较对照组无明显改变(P>0.05),细胞侵袭力无显著变化(P>0.05)。结论在人原发性肝癌细胞系HepG-2中,TNF-α可能通过影响CD15、CD15s、糖基转移酶ST3GaL-Ⅱ、ST3GaL-Ⅳ的含量促进细胞侵袭能力。
- 陈传萍何群王邵成潘忠诚王天骄张玉魁钟连声赵雨杰
- 关键词：肝癌CD15CD15STNF-Α
