郭焕珍
- 作品数：6 被引量：8H指数：2
- 供职机构：第三军医大学西南医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生化学工程更多>>
- 基因治疗新药核酶的研究进展被引量：1
- 2000年
- 对基因治疗新药核酶的结构、作用机制。
- 郭焕珍李奇芬于乐成毛青顾长海
- 关键词：核酶基因治疗药物治疗
- HepG2.9706细胞内HDV核酶对HCV RNA抑制活性的初步研究被引量：2
- 2004年
- 目的 探讨HDV核酶在细胞内抑制HCVRNA的可能性。方法 将重组载体转染至转基因细胞HepG2 .970 6中 ,通过荧光定量PCR检测细胞和培养上清中的HCVRNA ,初步探讨HDV核酶对HCVRNA的抑制活性。结果 ①RzC1,RzC2 ,RzC3 3组HDV核酶定向插入到真核表达载体。②在转基因细胞HepG2 .970 6中 ,pC1 RzC1、pC1 RzC2、pC1 RzC3对HCV 5′NCR CRNA抑制活性分别为 69.2 %,3 8.7%、4.2 %。结论 ①成功构建了 3个HDV核酶重组表达载体。②pC1 RzC1、pC1 RzC2在转基因细胞HepG2 .970 6具有抑制HCV 5′NCR
- 郭焕珍毛青李奇芬王宇明顾长海于乐成
- 关键词：核酶HDV核酶丙型肝炎荧光定量PCR
- 丁型肝炎病毒核酶对丙型肝炎病毒RNA的抑制活性被引量：1
- 2003年
- 郭焕珍毛青李奇芬王宇明顾长海于乐成蒋业贵
- 关键词：丙型肝炎病毒RNA抑制活性
- 丙型肝炎病毒1b型NS5A区基因复杂性与干扰素α疗效的关系被引量：3
- 2002年
- 目的 探讨丙型肝炎病毒 1b型 (HCV 1b)NS5A区基因的复杂性与干扰素α(IFN α)治疗效果之间的关系。方法 以 13例接受IFN α治疗的HCV 1b感染患者为研究对象 ,治疗前血清提取的RNA采用逆转录套式PCR (RT nested PCR)扩增HCVNS5A区基因 ,PCR产物纯化后与T载体连接并克隆入大肠杆菌 ,随机挑选 30个阳性克隆菌落 ,每一克隆菌落再进行PCR扩增 ,30个克隆的PCR产物在同一聚丙烯酰胺凝胶上采用单链构象多态性分析 (SSCP)分析和异源性双体分析 (HD)筛选HCVNS5A区克隆型 ,克隆型的多少反映HCVNS5A区基因的复杂程度。结果 完全应答组平均 6 .3种克隆型 ;部分应答组平均 8.6种克隆型 ;无应答组平均 15 .8种克隆型。结论 HCVNS5A区基因的复杂程度与IFN α的治疗效果呈负相关。
- 刘斌王宇明陈嵩郭焕珍黄燕萍顾长海
- 关键词：C型肝炎样病毒属基因干扰素Α疗效NS5A区
- 丁型肝炎病毒核酶在细胞内抑制丙型肝炎病毒RNA活性的研究
- 2003年
- 目的 探讨丁型肝炎病毒(HDV)核酶在细胞内抑制丙型肝炎病毒(HCV)RNA的可能性。方法 针对HCV-5′NCR-C RNA的不同靶位构建了pC1-RzC1(107～113nt)、pC1-RzC2(268～274nt)、pC1-RzC3(345～351nt)3个HDV核酶重组真核表达载体,采用脂质体介导将它们转染至HCV阳性胎肝细胞中,通过荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测细胞和培养上清液中的HCV RNA,初步探讨HDV核酶对HCV RNA的抑制活性。结果 (1)重组表达载体通过PCR、酶切和碱基序列测定证实了3组HDV核酶定向插入到真核表达载体。(2)免疫组织化学观察到HCV阳性胎肝细胞中HCV NS3、NS5抗原及逆转录-PCR法检测胎肝细胞及上清液中的HCV RNA正、负链,同时利用Light Cycler荧光PCR定量检测HCV RNA的含量,证明HCV感染胎肝细胞成功。(3)HCV阳性胎肝细胞中HDV核酶对全长HCV RNA的抑制活性,当剂量为0.5μmol/L时,pC1-RzC1、pC1-RzC2、pC1-RzC3抑制活性分别为53.2%、50.5%、10.6%(t=5.25,P<0.01)。pC1-RzC1连续1周作用于HCV阳性的胎肝细胞,结果显示第2～7天的抑制活性分别是60.7%、64.2%、68.4%、71.9%、78.8%、83.1%(t=15.34,P<0.01)。结论 pC1-RzC1、pC1-RzC2在HCV阳性胎肝细胞中对HCV RNA的抑制活性明显高于pC1-RzC3。
- 郭焕珍毛青李奇芬王宇明顾长海于乐成蒋业贵
- 关键词：HDV丙型肝炎病毒HCV聚合酶链反应
- 剪切HCV RNA的HDV核酶的设计及活性测定被引量：1
- 2001年
- 目的 探讨丁型肝炎病毒 (HepatitisDvirus ,HDV)核酶用于抗丙型肝炎病毒 (HepatitisCvirus ,HCV)基因治疗的可能性。方法 以HDV基因组核酶的假结样结构为基础 ,优化其茎Ⅳ区 ,改建其底物结合区 ,获得 3种针对HCVRNA的HDV核酶RzC1、RzC2 和RzC3 。体外转录获取含HCVRNA 5’ 非编码区 ( 5’ noncodingregion ,5’ NCR)及部分C区在内的底物RNA(HCVRNA 5’ NCR C) ,并进行 5’端放射性标记。在pH 7.5、37℃、Mg2 + 2 0mmol/L和去离子甲酰胺 2 .5mol/L等条件下 ,将核酶和底物按摩尔比 1 0 0∶1混合 ,在不同的时间点观察剪切百分率。结果 RzC1、RzC2 对底物的剪切百分率随时间延长而递增 ,90min时分别达 2 4.9%、2 0 .3% ;未观察到RzC3 有剪切活性。
- 于乐成顾长海毛青李奇芬王宇明郭焕珍
- 关键词：丁型肝炎病毒丙型肝炎病毒基因治疗HCV-RNA
