郝晓花
- 作品数：29 被引量：51H指数：5
- 供职机构：北京地坛医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金北京市自然科学基金“首都临床特色应用研究”专项更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学文化科学更多>>
- HIV感染合并鼻窦炎患者鼻腔黏膜病毒抗原表达的研究被引量：1
- 2015年
- 目的了解HIV感染合并鼻窦炎患者鼻黏膜病毒存储及免疫状态。方法采集9例非HIV感染合并鼻窦炎和11例HIV感染合并鼻窦炎患者外周血和鼻黏膜标本,采集患者外周血和鼻黏膜组织,外周血采用流式细胞仪进行CD4计数和单核细胞比例分析,血浆采用RT-PCR定量法进行病毒载量检测。对鼻黏膜石蜡切片采用HE染色分析病理情况和免疫组织化学染色分析gp120和p24表达水平。结果 HIV感染合并鼻窦炎患者HE染色结果表现为呼吸道黏膜呈慢性炎,间质明显水肿伴大量炎性细胞侵润,嗜酸性粒细胞多见。与非HIV感染合并鼻窦炎患者相比,免疫组织化学结果表明,HIV感染者合并鼻窦炎患者鼻黏膜gp120少量表达,p24未见明显表达,外周血具有调节功能的单核细胞亚群比例显著升高。结论 HIV感染合并鼻窦炎患者鼻黏膜局部组织可能含少量HIV病毒,外周单核细胞比例显著增高,这些HIV病毒存储细胞可能是HIV感染者鼻黏膜损伤和机会性感染的机制所在。
- 蔡超张立松韩俊燕曾辉王鹏冯鑫郝晓花张罗
- 关键词：鼻窦炎鼻黏膜GP120
- 肝细胞脂肪变对血清糖蛋白GP73水平的影响被引量：8
- 2013年
- 目的观察不同病因肝细胞脂肪变对肝病患者血清GP73水平的影响。方法以100例健康体检者为对照，观察178例肝穿刺病理学检查发现肝脂肪变性患者的血清GP73水平差异。结果与健康对照人群（35．61±12．22ng／m1）相比，不同病因导致的脂肪肝患者（70．62±60．60ng／m1）血清GP73显著升高。尽管酒精性脂肪肝（81．86±47．82ng／m1）和急性肝损伤患者合并肝细胞脂肪变（82．77±77．73ng／m1）血清GP73水平略高于慢性乙型肝炎患者（63．84±50．62ng／ml）和非酒精脂肪肝患者（65．75±62．20ng／ml），但不同病因导致的肝细胞脂肪变并未显示血清GP73水平差异有统计学意义。更为重要的是，68例，≥1．0（71．46±66．48ng／ml），75例F≥2．0（69．58±62．31neVml），以及34例F3·F4的患者（71．65±43．89ng／ml），血清GP73的水平差异无统计学意义（F=0．02，P=0．98）。相反，显著性肝纤维化S〉-2患者（91．04±82．37ng／m1）其血清GP73水平显著高于纤维化轻微S〈2（65．80±53．45ng／m1）的患者（P=0．029）。结论肝细胞脂肪变导致血清GP73水平显著升高，但肝细胞脂肪变的程度似乎与血清GP73水平无关。
- 魏红山康艳芳郝晓花刘佳李红敏刘爱霞任慧黄玉波李伯安
- 关键词：高尔基体脂肪肝肝炎生物学标记
- HCV/HIV-1合并感染者血清GP73变化特征被引量：1
- 2012年
- 目的观察合并艾滋病的丙型肝炎患者血清GP73水平的变化特征。方法本研究主要观察了3个人群:50例健康体检者;22例AIDS患者,其中10例患者合并慢性HCV感染;28例没有合并症的单纯慢性丙型肝炎的患者。血清GP73采用标准ELISA法检测。结果与健康对照人群(36.18±12.26)ng/mL相比,慢性丙型肝炎患者血清GP73(79.73±43.91)ng/mL显著升高(P<0.0001);而AIDS患者血清GP73(122.6±65.51)ng/mL较单纯慢性丙型肝炎患者也显著升高(P=0.008)。对22例AIDS患者血清GP73分析显示,合并丙型肝炎的患者(98.32±60.14)ng/mL,低于单纯HIV-1感染的患者(142.8±65.23)ng/mL,但两组之间差异并无统计学意义(t=1.65,P=0.11)。AIDS患者的血清GP73水平与CD4+T和CD8+T细胞的绝对计数呈显著负相关(r值分别为-0.58和-0.49),而与HIV RNA拷贝数成正相关(r=0.61,P=0.0026)。结论合并HIV-1感染可以显著增加丙肝患者血清GP73水平。检测血清GP73水平的变化在一定程度上可以反映HIV-1复制情况及免疫状态的变化。
- 李鑫黄玉波张仁雯郝晓花李兴旺魏红山
- 关键词：人类免疫缺陷病毒-1高尔基体蛋白73
- 高剂量O-糖基化修饰抑制剂Benzyl-α-GalNAc诱导体外培养肝细胞脂肪变
- 2013年
- 目的初步探讨蛋白质O-糖基化抑制剂Benzyl-α-GalNAc对肝细胞的影响。方法取雌性Balb／c小鼠（8～10周）20只随机分为正常组（n=10），Benzyl—d—GalNAc药物组（n=10），给Benzyl-α-GalNAc药物（5mg／kg，1次／d）灌胃。第2周末取小鼠血清及肝脏进行血清生化指标AIJT及AlJP测定及肝组织HE染色。培养HepG2细胞．Benzyl-α-GalNAc分别以0．5、1及5mg／ml与HepG2细胞共孵育。24h后进行油红O染液染色。5mg／ml药物组完全未贴壁，去除处理因素，继续培养12h观察细胞。Benzyl-α-Gal—NAc以3mg／ml处理HepG2细胞12h及24h观察细胞贴壁情况。培养L02细胞，Benzyl-α-GalNAc分别以0．1及0．5mg／ml与L02细胞共孵育。24h后进行油红O染液染色。结果药物组与正常对照组比较，肝组织切片显示轻微脂肪变。油红O染色显示药物处理组HepG2及L02细胞内的脂滴积聚。高浓度组细胞完全没有贴壁，24h后更换无药物培养基，去除处理因素12h后，可见HepG2开始贴壁生长。结论高浓度O-糖基化抑制剂Benzyl-α-GalNAc抑制体外肝细胞的黏附，并诱导轻微肝细胞脂肪变。
- 张晓静张仁雯郝晓花任慧李红敏刘燃王智强魏红山
- 关键词：肝细胞脂肪变
- 丙型肝炎病毒非结构蛋白2反式激活蛋白的原核表达及多克隆抗体制备
- 2009年
- 目的对HCV非结构蛋白2反式激活蛋白（NS2TP）进行原核表达，制备多克隆抗体，并探讨其在不同肝组织中的表达情况。方法PCR法获得HCVNS2TP基因，将其克隆至原核表达载体pET-32a（＋）上，并转化入E．coliBL21。在大肠埃希菌中诱导表达，表达产物进行十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）分析，经免疫印迹分析验证后，大量表达并纯化该重组蛋白。将重组蛋白免疫家兔后获取多克隆抗体，应用免疫组织化学技术检测健康人及慢性HCV患者的肝组织。结果成功获得了重组目的蛋白（相对分子质量为33×10^2）及高滴度、高特异度的多克隆抗体。慢性HCV患者肝组织内NS2TP的表达高于健康肝组织，且以细胞核内分布为主。结论明确了慢性HCV患者肝组织内NS2TP表达量及细胞内定位的变化，为进一步研究NS2TP的生物学功能和HCV的致病机制奠定了基础。
- 洪源兰孟东王琦张黎颖刘秀财李晓光郝晓花成军
- 关键词：反式激活因子类免疫组织化学肝炎病毒
- 自身免疫性肝病患者血清GP73变化特征被引量：6
- 2014年
- 目的 明确自身免疫性肝病患者血清GP73的水平特征及可能的临床意义.方法 本研究共观察了健康体检、慢性乙型肝炎患者,以及自身免疫性肝病患者各80例的血清GP73水平.结果 与健康对照人群的血清GP73水平（35.84±11.8） ng/ml相比,自身免疫性肝病患者（112.3±72.55） ng/ml显著升高,也显著高于慢性乙型肝炎患者（86.44±60.69） ng/ml.但自身免疫性肝炎（107.4±90.6）ng/ml,原发性胆汁淤积性肝硬化（89.0±45.38） ng/ml,以及原发性硬化性胆管炎（113.3±50.87） ng/ml患者之间并无显著性差异,但均低于重叠综合症的患者（153.3±86.89ng/ml）.以健康体检人群为参照人群,以61.35 ng/ml为cut-off值,GP73诊断自身免疫性肝病的特异性和敏感性分别为75.0％和97.53％.ROC分析曲线下面积为为0.93（95％ CI：0.89-0.97）.结论 自身免疫性肝病患者血清GP73显著高于健康对照人群,尤其是那些重叠综合征的患者.对于GP73升高的患者,除考虑病毒性肝炎,肝癌外,也应该考虑自身性免疫性肝病的可能.
- 翟庆玲刘燃王智强黄玉波郝晓花冯鑫魏红山
- 关键词：肝炎高尔基体
- 血清GP73对HBV相关失代偿性肝硬化的诊断价值被引量：9
- 2014年
- 目的观察血清GP73水平对HBV相关肝硬化的诊断价值。方法本研究共观察了接受乙肝穿刺的慢性乙肝患者200例；失代偿乙肝肝硬化患者200例；以及HBV相关肝癌（HCC）患者200例。所有患者均为连续入组的患者，所有患者血清HBsAg阳性持续均在6个月以上，符合慢性HBV感染的诊断。结果与慢性肝炎患者（67．38±57．45ng／ml）相比，肝硬化患者（221．9±108．5ng／ml）和HCC患者（152．44±102．7ng／ml）的血清GP73显著升高。以慢乙肝患者为对照人群，GP73诊断肝硬化的ROC分析曲线下面积为0．91（95％CI：0．88-0．94）（P〈0．0001）。以150ng／ml为诊断cut—off值，GP73诊断肝硬化的特异性和敏感性分别为72．5％和93．5％。结论HBV慢性感染患者，血清GP73显著升高，除考虑肝癌诊断外，还应该考虑肝功能失代偿的可能。
- 翟庆玲黄玉波郝晓花李红敏任慧魏红山
- 关键词：高尔基体肝炎乙型肝炎病毒乙型肝硬化
- 免疫调控相关基因C12orf28在免疫组织中的分布特征
- 2013年
- 目的制备抗人C12orf28多克隆抗体,明确C12orf28编码蛋白在免疫组织中的分布特征。方法选取免疫原性高、特异性强的羧基端257个氨基酸作为目的片段,以人外周血单个核细胞(PBMC)cDNA为模板,采用PCR获得目的基因C12orf28C257;构建其原核表达载体pET32a(+)-C12orf28C257,转化入大肠埃希菌BL21(DE3),异丙基β-D-硫代吡喃半乳糖苷(IPTG)诱导表达重组蛋白;将重组蛋白免疫大耳白大白兔制备兔源性多克隆抗体,采用ELISA和Western blot分析检测多克隆抗体效价和特异性,采用Western blot明确C12orf28的组织分布特征。结果 PCR扩增得到C12orf28C257目的基因片段,诱导表达重组蛋白并制备了其多克隆抗体。ELISA分析结果显示,多克隆抗体效价>1︰1.28×106,Western blot分析鉴定得出多克隆抗体具有较高的特异性。结论未知功能基因C12orf28在胎儿肠、淋巴、胸腺和心肌等组织中均有不同程度的表达。
- 任慧李红敏乔雍刘燃郝晓花魏红山
- 关键词：基因表达重组蛋白多克隆抗体
- Colgalt2基因敲除小鼠Kupffer细胞形态及亚型差异被引量：3
- 2016年
- 目的从Colgalt2基因敲除小鼠肝脏内分离Kupffer细胞,并比较其与正常小鼠Kupffer细胞形态分化和亚型分化的差异。方法采用胶原酶灌注法、percoll密度梯度离心法和免疫磁珠分选法分离纯化Kupffer细胞,并将分离的Kupffer细胞进行培养,显微镜下观察其形态的变化和差异。用脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)分别刺激Kupffer细胞6小时、12小时和24小时,检测细胞亚型。结果分离获得Kupffer细胞数目为(4.42±0.63)×10~6/鼠肝,流式细胞仪检测细胞纯度为97.9%。培养后的细胞逐渐延伸为不规则形态,早期Colgalt2基因敲除小鼠Kupffer细胞形态分化相比正常小鼠有延迟,后期两者无显著差异。在未刺激状态下,Colgalt2^(-/-)小鼠M1型Kupffer细胞的比例小于Colgalt2^(+/+)小鼠,Colgalt2^(-/-)小鼠M2a型Kupffer细胞所占比例较高;LPS刺激6小时后,Colgalt2^(-/-)小鼠M2a型所占比例高于Colgalt2^(+/+)小鼠;LPS刺激12小时后,Colgalt2^(+/+)小鼠M2a型和M2c型Kupffer细胞所占比例小于Colgalt2^(-/-)小鼠;LPS刺激24小时后,Colgalt2^(-/-)小鼠M2c型细胞所占比例高于Colgalt2^(+/+)小鼠。结论应用胶原酶灌注法、percoll密度梯度离心法、免疫磁珠分选法可以获得纯度较高的小鼠肝脏Kupffer细胞,为后期的细胞实验奠定基础。Colgalt2基因的敲除会影响小鼠Kupffer细胞的形态分化和亚型分化。
- 王建文张一帆李玉凤杨琪郝晓花黄玉波魏红山
- 关键词：基因敲除KUPFFER细胞细胞形态
- Notch修饰相关糖基因EOGT1敲除大鼠模型的制备与基因型鉴定被引量：1
- 2016年
- 目的建立介导Notch分子O-GlcNAc糖基化修饰的糖基转移酶EOGT1基因敲除大鼠模型,为研究EOGT1功能及其在肝功能损伤中的作用奠定基础。方法通过TALEN基因敲除技术敲除EOGT1基因,获得EOGT1^(+/-)大鼠,将EOGT1^(+/-)大鼠杂交后获得EOGT1^(-/-)大鼠。通过PCR凝胶电泳技术及DNA测序技术对大鼠的基因型进行鉴定。结果成功建立3种基因型(EOGT1^(+/+)、EOGT1^(+/-)、EOGT1^(-/-))大鼠的鉴定方法,通过观察发现3种基因型大鼠的外观和行为表现上无显著差异。统计大鼠出生后20天的体重发现,EOGT1^(+/+)大鼠和EOGT1^(-/-)大鼠的体重有显著差异(t=2.257,P=0.0343),同时还发现EOGT1^(-/-)大鼠的生育繁殖能力降低。结论成功构建了EOGT1基因敲除大鼠模型,EOGT1基因敲除大鼠与野生型大鼠相比,体重偏低,生育繁殖能力降低。该模型的构建为研究Notch分子O-GlcNAc糖基化修饰在肝功能损伤中的作用奠定了基础。
- 郝晓花王建文张一帆叶小慧魏红山
- 关键词：基因敲除糖基转移酶NOTCH
