郑长青
- 作品数：20 被引量：52H指数：4
- 供职机构：解放军第401医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 骨肉瘤患者肿瘤组织MGMT基因甲基化状态检测及临床意义
- 目的：探讨骨肉瘤患者组织MGMT基因甲基化状态及其与化疗疗效的关系。方法：51例骨肉瘤组织样本，用甲基化特异性PCR(MSP)检测MGMT基因启动子区的甲基化状态，免疫组化方法检测MGHT蛋白表达。并分析MGMT基因甲基...
- 姜维浩郑长青守平李鼎锋宫锋王颖丽章扬培
- 关键词：骨肉瘤MGMT基因甲基化状态化学治疗
- 输血前受血者9项血清学指标检测
- 目的明确血源性疾病的病因,划清疾病传播的责任,减少医疗纠纷的发生。方法对本院6000例受血者进行输血前ALT、抗-HCV、抗-HIV、乙肝五项（HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb）和TP9项血清学...
- 冯国基郑长青杨林刘鹏姜美娟王竹涛于剑
- 关键词：受血者血清学指标
- 文献传递
- 输血前受血者9项血清学指标检测
- 目的:明确血源性疾病的病因,划清疾病传播的责任,减少医疗纠纷的发生.
方法:对本院6000例受血者进行输血前ALT、抗-HCV、抗-HIV、乙肝五项(HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb)...
- 冯国基郑长青杨林刘鹏姜美娟王竹涛于剑
- 关键词：受血者血清学指标检测血源性疾病乙肝五项医院内感染
- 文献传递
- 脑胶质瘤MGMT、hMLH1和hMSH2基因启动子甲基化状态研究被引量：2
- 2009年
- 目的:探讨脑胶质瘤患者O6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶基因MGMT和错配修复基因hMLH1、hMSH2启动子CpG岛甲基化状态,及其在烷化剂化疗中的意义。方法:采用甲基化特异性PCR(MSP)方法检测39例脑胶质瘤和6例正常脑组织MGMT、hMLH1和hMSH2基因启动子区的甲基化状态,免疫组化方法测定蛋白表达。结果:脑胶质瘤患者组织MGMT、hMLH1和hMSH2基因启动子区甲基化发生率分别为46.2%、10.3%和20.5%,3种基因启动子未甲基化模式与其对应蛋白表达模式相似,并与患者性别、年龄、病理类型和病理分级无明显相关性。回顾性分析患者资料,显示39例脑胶质瘤患者中,MGMT基因甲基化的患者生存期显著高于MGMT基因未甲基化患者(P<0.05,Log-rank检验)。结论:MGMT及错配修复基因甲基化是脑胶质瘤发生过程中常见的分子事件,可能与肿瘤的发生有关;检测MGMT、hMLH1和hMSH2基因启动子甲基化状态,在判断脑胶质瘤患者预后和预测烷化剂化疗耐药性中可能具有重要意义。
- 郑长青季守平宫锋李安民邰军利常宏宇王颖丽高红伟李素波檀英霞章扬培
- 关键词：脑胶质瘤启动子CPG岛甲基化错配修复基因
- MGMT基因启动子甲基化检测在脑胶质瘤化疗中的意义被引量：13
- 2009年
- 背景与目的:如何预测和克服肿瘤细胞对化疗药物的耐药性,实施个体化治疗是肿瘤化疗急需解决的问题。与基因启动子甲基化密切相关的DNA损伤修复基因O6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶(O6-methylguanine-DNA methyltransferase,MGMT)表观沉默与肿瘤对烷化剂药物化疗敏感性密切相关。本研究探讨检测MGMT基因启动子CpG岛甲基化在判断脑胶质瘤患者预后及预测肿瘤对烷化剂药物耐药性中的意义。方法:甲基化特异性PCR(MSP)法检测脑胶质瘤组织及肿瘤细胞株MGMT基因启动子甲基化状态,蛋白印迹和免疫组化法测定蛋白表达,MTT法检测肿瘤细胞株对烷化剂药物敏感性,将患者随访资料针对MGMT甲基化状态绘制Kaplan-Meier生存曲线,并进行log-rank检验分析。结果:39例脑胶质瘤患者组织MGMT基因启动子甲基化发生率为46.2%,蛋白表达阳性率为61.5%,且肿瘤组织中MGMT基因甲基化状态与蛋白表达显著相关(P<0.05);6例正常组织均未检测出基因甲基化。MGMT基因过甲基化的脑胶质瘤SHG-44细胞株用5-Aza-CdR处理后完全脱甲基化,MGMT蛋白恢复了表达,同时细胞株对烷化剂药物敏感性也发生逆转,由敏感转变为耐受。在采用手术、放疗和烷化剂尼莫司汀化疗等综合治疗的39例脑胶质瘤患者中,MGMT基因甲基化的患者生存率显著高于MGMT基因未甲基化患者(P<0.05)。结论:MGMT基因甲基化状态与蛋白表达及肿瘤细胞对烷化剂药物敏感性密切相关,有可能替代MGMT蛋白检测成为判断脑胶质瘤患者预后和预测肿瘤对烷化剂化疗耐药性的标志分子。
- 郑长青季守平宫锋李安民邰军利章扬培
- 关键词：脑胶质瘤启动子CPG岛甲基化DNA修复MGMT分子标志物
- 脑胶质瘤SHG-44细胞MGMT基因甲基化状态及其与细胞对烷化剂药物耐药性关系的研究被引量：1
- 2009年
- 目的探讨人脑胶质瘤SHG-44细胞O(6)-甲基鸟嘌呤DNA甲基转移酶(MGMT)基因启动子甲基化状态与其蛋白表达以及细胞对烷化剂药物耐药性的相关性。方法取处于对数生长期的人脑胶质瘤SHG-44和U251细胞,分别加入5-氮-2’脱氧胞苷(5-Aza-CdR)培养6d后收集细胞,同时以未加5-Aza-CdR的正常培养细胞作为对照。提取细胞基因组DNA,采用甲基化特异性PCR(MSP)检测MGMT基因的甲基化状态,并利用蛋白质印迹方法检测MGMT蛋白的表达。将收集的细胞分为3组,分别加入浓度为125、100、75、50、25、15、10μg/ml的尼莫司汀(ACNU)和50、25、15、10、5、2.5、1μg/ml的替莫唑胺(TMZ)以及等量的完全培养液(阴性对照),采用噻唑蓝(MTT)法分别检测细胞对烷化剂药物的敏感性,以细胞存活50%时所对应的药物浓度(IC50值)作为衡量细胞对药物敏感性的指标,实验重复3次。结果正常培养的SHG-44细胞MGMT基因启动子呈甲基化状态,MGMT蛋白表达缺失,对ACNU和TMZ的IC50值分别为30、11μg/ml,表现为对烷化剂药物敏感;用5-Aza-CdR处理后,SHG-44细胞MGMT基因启动子成功脱甲基化,MGMT蛋白恢复表达,其对ACNU和TMZ的IC50值分别升高了2.5和3.1倍(均P<0.05),对烷化剂药物的敏感性发生逆转。而正常培养和5-Aza-CdR处理的U251细胞MGMT基因启动子均呈未甲基化状态,都能表达MGMT蛋白,并且均表现为对ACNU和TMZ烷化剂药物耐药。结论MGMT基因甲基化状态能稳定地反映细胞诱导MGMT蛋白表达的能力,并有可能成为预测肿瘤组织对烷化剂化疗药物敏感性的分子标记。
- 郑长青季守平宫锋常宏宇王颖丽高红伟李素波檀英霞章扬培
- 关键词：甲基化
- 检测MGMT启动子甲基化在肿瘤烷化剂个体化治疗中的意义研究
- 研究背景和目的:如何预测和克服肿瘤细胞对化疗药物的耐药性,实施个体化治疗是肿瘤化疗急需解决的问题。大量研究已经证实DNA损伤修复蛋白O<sup>-</sup>甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶（O<sup>6</sup>-me...
- 郑长青
- 关键词：过甲基化烷化剂药物耐受
- 文献传递
- 骨肉瘤患者肿瘤组织MGMT基因甲基化状态检测及临床意义
- 骨肉瘤肿瘤细胞耐药是部分患者化疗疗效差原因之一。化疗效果存在明显的个体差异。如何预测和克服肿瘤细胞对药物耐受是肿瘤治疗急需解决的问题。大量研究资料已经证实06-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶(06-methylguanan...
- 姜维浩郑长青季守平李鼎锋宫锋王颖丽章扬培
- 关键词：骨肉瘤MGMT基因甲基化状态化疗疗效
- MGMT基因启动子甲基化状态对脑胶质瘤预后的影响
- 郑长青李安民季守平
- 猪α1,3-半乳糖转移酶基因定向缺失质粒的构建被引量：1
- 2007年
- 目的:构建猪α1,3-半乳糖转移酶(α1,3-galactosyltranferase,GGTA1/α1,3-GT)基因的定向缺失质粒,用于GGTA1基因敲除。方法:以原代猪胚胎成纤维细胞(porcine fetal fibroblast,PFFb)基因组DNA为模板,采用长程PCR方法扩增出GGTA1基因同源长、短臂,将长臂段在NotⅠ位点插入PBSLoxPNEOLoxP质粒中PGK-NEO-PolyA序列的5′端,将短臂段在SalⅠ和XhoⅠ位点插入该质粒PGK-NEO-PolyA序列的3′端。结果和结论:成功构建了猪GGTA1基因的定向缺失质粒NEOSL/GT,为下一步获得GGTA1基因敲除猪打下了基础。
- 常宏宇宫锋季守平王颖丽郑长青田曙光章扬培
- 关键词：基因打靶聚合酶链反应
