郑辉
- 作品数：19 被引量：100H指数：5
- 供职机构：中国动物卫生与流行病学中心更多>>
- 发文基金：国家科技支撑计划广西壮族自治区科技攻关计划更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- CSFV陕西分离株SXCDK全基因的克隆与分析被引量：4
- 2011年
- 【目的】分离猪瘟病毒（CSFV）SXCDK株,测定其全基因组序列,研究其分子特性及与其他毒株的亲缘关系,为猪瘟病毒分子流行病学研究积累材料。【方法】从陕西省西安市采集疑似猪瘟病料进行病毒分离,获得猪瘟病毒SXCDK株。根据GenBank上发表的猪瘟病毒全基因序列及相关参考文献,合成11对引物,应用RT-PCR技术分11段扩增CSFV分离株SXCDK基因,拼接后获得其全基因组（GenBank登录号：GQ923951）。利用DNAstar、ClustalX1.83和Mega 4.1等软件,对分离株SXCDK与其他猪瘟病毒毒株的核苷酸和氨基酸序列进行比较分析。【结果】CSFV陕西分离株SXCDK基因组全长12 296 nt,由373 nt的5′非翻译区、编码3 899个氨基酸的11 697 nt开放阅读框和226 nt的3′非翻译区组成。分离株SXCDK和其他毒株的核苷酸序列同源性为83.6%~96.2%,氨基酸序列的同源性为91.3%~97.8%。从进化的角度来看,分离株SXCDK与台湾分离株96TD的亲缘关系最近,两者之间的进化距离为0.038,分离株SXCDK与2006年陕西省分离株SXYL2006进化距离较远,两者之间的进化距离为0.065。CSFV SXCDK株属于2.1a亚群毒株。【结论】分离株SXCDK是我国内地首株已确定全基因序列的猪瘟病毒2.1a亚群毒株,与同亚群的96TD亲缘关系最近。
- 李玲伟张志吴发兴程伟杨若松张燕霞刘爽郑辉李晓成陈德坤
- 关键词：猪瘟病毒全基因
- 健康屠宰猪中博卡病毒的检测及遗传演化分析被引量：4
- 2012年
- 为了解我国健康猪群中猪博卡病毒(PBoV)的感染状况,从屠宰场内采集猪淋巴结、脾脏和扁桃体等组织,分别采用套式PCR进行猪博卡病毒1型和2型的检测。结果表明,28份样品中有2份样品用猪博卡病毒2型引物可扩增出439 bp的特异性条带;结构蛋白VP1基因序列分析表明,这2份样品均为猪博卡病毒2型感染,且其VP1序列与猪博卡病毒参考株HM053694的同源性最高,分别达93.8%和93.3%,同属PBoV1/PBoV2进化分支;而与另一个猪博卡病毒V6/V7进化分支的同源性仅为35.1%～39.2%,距离较远。
- 张志王赛赛李岚刘爽李蕾郑辉吴发兴张燕霞李晓成
- 关键词：套式PCR
- 2019年我国部分省份猪群塞内卡病毒流行病学调查被引量：5
- 2021年
- 为了了解我国部分地区猪群塞内卡病毒(Senecavirus A,SVA)的流行情况,试验采用实时荧光定量RT-PCR和ELISA方法对2019年在华东、华南、华中、华北、西北、东北6个地区16个省、市、自治区屠宰场与非健康猪场采集的1310份猪组织样品和828份猪血清样品进行病原学与血清学调查,并结合2016—2018年数据,分析SVA在空间、时间和群间的分布情况。结果表明:从空间分布来看,华东、华南、华中、华北、西北、东北地区组织样品阳性率分别为4.07%、17.06%、29.27%、0、2.65%、0,场阳性率分别为26.67%、57.14%、50.00%、0、30.00%、0;华东和西北地区血清学样品阳性率分别为6.98%、15.17%,场阳性率分别为66.67%、93.33%。从时间分布来看,2019年屠宰场和非健康猪场组织样品阳性率分别为7.53%和3.24%,与2018年(11.21%和22.62%)比较明显下降;2019年下半年组织样品阳性率呈上升趋势,其中西北地区由上半年未检出增长为4.40%,华南地区由上半年的7.30%增长至28.70%。从群间分布来看,表观健康猪群(屠宰场)的组织样品阳性率(7.53%)与场阳性率(25.00%)均高于非健康猪群(3.24%和18.75%)。说明2019年SVA的流行强度有所下降,但流行范围仍较广、感染率仍较高且存在大量隐性感染,需加强猪群SVA流行状况的监测,以便及时调整防控措施。
- 高春柳董雅琴周晓翠刘爽郑辉张锋崔进张慧武瑞李晓成尼博魏荣
- 关键词：流行病学调查三间分布
- 猪精液中五种病毒的初步检测被引量：13
- 2012年
- 为探明猪精液在疫病传播中的作用,应用PCR和RT-PCR技术分别从发病猪场和未发病猪场采集种公猪精液进行猪瘟病毒(CSFV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪伪狂犬病病毒(PRV)、猪圆环病毒2型(PCV-2)和牛病毒性腹泻病毒(BVDV)的检测。结果发现,发病猪场的种公猪精液中CSFV、PRRSV、PRV、PCV-2的感染率分别为30.0%、50.0%、4.0%和30.0%,而未发病猪场的感染率分别为4.0%、20.0%、0.0%和8.0%,这表明精液是多种猪病原传播的良好媒介,提示种公猪对于疫病的发生和传播起着重要作用。
- 张志刘爽张燕霞吴发兴郑辉李晓成黄保续
- 关键词：种公猪精液
- 某猪场支气管败血波氏杆菌和化脓隐秘杆菌混合感染的病原分离鉴定及药敏试验被引量：2
- 2022年
- 支气管败血波氏杆菌是引起猪萎缩性鼻炎的病原之一,化脓隐秘杆菌是一种感染牛、羊、猪等动物的机会致病菌。国内目前没有关于二者混合感染猪的报道。本研究从陕西省某猪场发病仔猪肺脏中分离出两株病原菌,经染色镜检、生化试验和16S rDNA测序鉴定,确定病原菌为支气管败血波氏杆菌和化脓隐秘杆菌。采用K-B纸片扩散法进行药敏试验,发现两株分离菌同时对卡那霉素、庆大霉素和头孢哌酮高度敏感。本研究为猪支气管败血波氏杆菌和化脓隐秘杆菌混合感染的诊断与防治提供了参考。
- 张慧高洁刘爽郑辉董雅琴李晓成魏荣
- 关键词：支气管败血波氏杆菌化脓隐秘杆菌药敏试验
- 北美型猪蓝耳病病毒鉴别RT-PCR检测方法的建立及应用被引量：5
- 2011年
- 参考Genbank发表的美洲型猪蓝耳病病毒(porcine reproductive and respiratory syndrone virus,PRRSV)CH-1a(北美型经典PRRSV)、JXA1(北美型HP-PRRSV)等毒株的的主要结构蛋白基因序列,应用Primer5.0软件设计了一对特异性的北美型PRRSV鉴别检测引物,其对经典PRRSV的扩增片段为511bp,对HP-PRRSV的扩增目片段为421bp。进行了该方法的特异性、敏感性、重复性试验,建立了美洲型PRRSV鉴别RT-PCR检测方法。应用此法对2010年1—12月收集的126份临床样品进行了检测,总体检出率达53.17﹪。结果表明该方法具有特异、敏感、重复性好等优点,可用于北美型PRRSV的临床发病鉴别检测及流行病学监测等工作。
- 张燕霞吴发兴郑辉刘爽张志李晓成
- 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒NSP2基因RTPCR
- 甲磺酸瑞波西汀体外颉颃塞内卡病毒的研究
- 2024年
- 【目的】从含有127种化合物的FDA批准上市药物库中筛选具有颉颃A型塞内卡病毒(SenecavirusA,SV A)活性的化合物并研究其作用途径。【方法】利用荧光素酶重组塞内卡病毒(rSVA-NLuc)结合荧光素酶高通量筛选技术,建立抗SVA化合物体外筛选平台。从FDA批准上市药物库中筛选浓度为10μmol/L时具有抑制荧光素酶活性效应的化合物,并进一步利用实时荧光定量RT-PCR验证其抑制活性,通过反映乳酸脱氢酶(LDH)释放水平的细胞毒性试验进而确定其最大无毒浓度。针对病毒感染周期的吸附、入胞、复制和组装释放等4个主要过程,采用不同的细胞处理方法和实时荧光定量RT-PCR、间接免疫荧光(indirect immunofluorescence assay,IFA)、蛋白免疫印迹(Western blotting)和病毒滴度测定(TCID_(50))等技术进行化合物分子额顽机制研究。【结果】从包含127种分子的FDA获批上市药物库中筛选出8种候选抗SVA活性分子,通过实时荧光定量RT-PCR及细胞毒性检测,鉴定出1种安全、有效的化合物——甲磺酸瑞波西汀。在病毒感染细胞36h内甲磺酸瑞波西汀可使SVA VP3蛋白表达量和病毒滴度均极显著下降(P<0.01)。甲磺酸瑞波西汀处理金黄仓鼠肾细胞(BSR-T7/5)可减少SVA的吸附和入胞;实时荧光定量RT-PCR也显示甲磺酸瑞波西汀能抑制SVA的组装阶段,但它对SVA的复制和释放阶段没有影响。【结论】本试验从FDA批准上市药物库中筛选出了1种细胞毒性较低且颉SVA效果优异的化合物一—甲磺酸瑞波西汀,该化合物通过抑制SVA的吸附、入胞和组装阶段来对抗SVA感染。本研究为抗SVA药物的进一步研发提供重要参考。
- 巩有权周晓翠郑辉陈峰曹振山沙洲张慧张慧武瑞尼博
- 关键词：高通量筛选
- 猪全血中多种病原流行病学监测的初步研究被引量：4
- 2012年
- 本文利用PCR或RT-PCR技术连续两年对规模猪场采集的猪全血分别进行猪瘟病毒(CSFV)、猪繁殖障碍综合征病毒(PRRSV)、猪伪狂犬病病毒(PRV)、猪圆环病毒2型(PCV2)、牛病毒性腹泻病毒(BVDV)和日本乙型脑炎病毒(JEV)的检测,结果发现2008年猪全血中CSFV、PRRSV、PRV、PCV2的感染率为30.0%、50.0%、4.0%和30.0%,2009年猪全血中CSFV、PRRSV、PRV、PCV2、BVDV和JEV的感染率分别为19.8%、13.7%、1.1%、31.9%、0.7%和2.7%,这表明用猪的全血可进行猪瘟等6种疫病的监测和流行,为更深入研究疫病的流行病学奠定了基础。
- 张志王赛赛李岚李蕾刘爽张艳霞郑辉吴发兴李晓成黄保续
- 关键词：全血
- 非洲猪瘟基因Ⅰ型/Ⅱ型重组病毒研究现状及思考
- 2024年
- 基因重组在非洲猪瘟病毒(ASFV)基因组间广泛存在,它是造成ASFV遗传多样性的原因之一。ASFV基因Ⅱ型毒株2018年传入我国,2021年国内又报道发现基因Ⅰ型毒株和基因Ⅰ型/Ⅱ型重组病毒。我国分离的ASFV基因Ⅰ型/Ⅱ型重组毒嵌合了两个基因型序列并部分整合了二者的生物学特性,毒力与基因Ⅱ型强毒株相当,某些致病指标甚至更高;基因Ⅱ型减毒活疫苗株不能对该重组毒株产生有效保护。该重组毒株在国内的流行演变可能会显著影响ASFV的进化方向,并对ASFV疫苗研究带来新的挑战。本文通过对国内ASFV基因Ⅰ型/Ⅱ型重组病毒进行综述,就相关研究进展进行总结归纳,以期为我国ASF防控提供参考。
- 戈胜强沙洲郑辉郑辉刘春菊左媛媛王晓华王晓华刘爽魏荣
- 关键词：非洲猪瘟重组病毒疫苗研发
- 猪流行性腹泻新毒株的分离鉴定和致病性研究被引量：25
- 2012年
- 为探明2011年我国猪群仔猪腹泻的病因,采用巢式RT-PCR方法对河南和辽宁省2个规模猪场采集43份出现腹泻的粪便进行猪流行性腹泻病毒(PEDV)、猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)和轮状病毒(PRoV)的检测,结果表明:43份腹泻样品均为PEDV,没有检测出TGEV和PRoV。对扩增的PEDV进行测序和分析显示,这些PEDV流行毒株均属于基因G2.3亚型,彼此之间的同源性高达99.2%～100%,与2011年韩国和2008年泰国流行的PEDV毒株同属于一个进化分支。将其中3份病料在Vero细胞传代后接种2日龄仔猪,结果发现接种后13～57h内仔猪全部死亡,接种仔猪呈现典型的腹泻症状和病理变化特征,提示了这些PEDV流行毒株具有较强的致病性。
- 张志李岚王赛赛刘爽吴发兴郑辉李蕾张燕霞李晓成
- 关键词：猪流行性腹泻RT-PCR
