郑宗梅
- 作品数：7 被引量：16H指数：3
- 供职机构：北京大学第三医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 干细胞研究进展及其医学应用
- 2002年
- 阐述了干细胞的概念分类。当前的研究进展及人类胚胎干细胞在体外培养成功的技术突破,分析介绍了干细胞在修补细胞、器官移植、治疗疾病等方面的应用前景和良好的社会效益与经济效益,也提出了有待研究解决的若干问题。
- 郑宗梅鲍力李凌松
- 关键词：干细胞研究治疗性克隆体外培养
- 端粒酶永生化Nestin<'+>/Ngn3<'+>人胰腺干细胞系的研究
- 该文以人胚胎胰腺组织为材料,对端粒酶永生化Nestin<'+>/Ngn3<'+>人胚胰腺干细胞系进行了初步研究,确定Nestin和Ngn3阳性细胞在胚胎胰腺组织中的表达、分布及相关性;体外培养Nestin<'+>/Ngn...
- 郑宗梅
- 关键词：HTERTNESTIN胰腺干细胞干细胞系糖尿病
- 体外培养及其诱导分化人胚胰腺巢蛋白和神经元素3阳性细胞的实验被引量：1
- 2005年
- 目的:观察从人胚胎胰腺体外分离培养的巢蛋白和神经元素3阳性细胞,分析其基因表达及诱导分化能力,探讨为胰腺组织工程移植提供种子细胞的可能性。方法:实验于2002-01/2004-05在北京大学干细胞中心完成。实验采用标本为北京市海淀妇产医院产科药物引产的人胚胎,引产药物为米索。使用的胚胎经孕妇同意,并签署同意书。选取18例胎龄为12～24周的人胚胰腺,用Ⅴ型胶原酶消化获得贴壁生长的人胚胰腺细胞,观察其原代培养、传代培养、增殖能力及体外诱导分化能力;胰腺干细胞标志巢蛋白和神经元素3阳性细胞及胰岛素表达应用免疫荧光染色及反转录聚合酶链反应检测;细胞总蛋白中胰岛素含量应用化学发光法检测。结果:18例胎龄为12～24周的人胚胰腺全部纳入实验。①人胚胎胰腺组织体外培养和诱导分化:人胚胎胰腺组织消化后可获得胰岛样结构,能贴壁生长,传代20代以上,然后进入凋亡期。汇合的细胞加入诱导分化培养基,24h后即可见大部分细胞聚集成团;周围散在贴壁细胞突起细长,立体感增强。随着诱导时间的延长,细胞增殖缓慢,个别细胞脱落、死亡。细胞团易于脱落漂浮,继而死亡。但仍有部分细胞及细胞团贴壁生长。②巢蛋白、胰岛素、胰高血糖素、广谱角蛋白及角蛋白19含量测定:无论是第2代还是第10代细胞中均无胰岛素、胰高血糖素CK-Pan和CK-19染色阳性的细胞。第2代细胞中,巢蛋白阳性细胞约占总细胞数的20%,个别细胞核神经元素3阳性,多数细胞为两者均阴性。第10代细胞中95%以上为巢蛋白强阳性细胞,约90%细胞神经元素3阳性且阳性部位同时存在于细胞核和细胞质中,并与巢蛋白共表达。但第18代细胞,荧光染色神经元素3染色转阴性(反转录聚合酶链反应可检测到少量mRNA的表达),而巢蛋白阳性无明显变化。③诱导前后巢蛋白和神经元素3阳�
- 郑宗梅陈东明李凌松李健宁
- 关键词：诱导分化体外培养
- 巢蛋白和神经元素3在人胚胎胰腺中的表达和分布被引量：8
- 2005年
- 目的探讨胰腺干细胞标志巢蛋白(nestin)和神经元素3(Ngn3)在人胚胎胰腺组织中的表达及其与内分泌细胞、导管细胞和外分泌细胞标志的共表达情况.方法以因病理因素行药物引产的12周～14周前人胚胎胰腺14例为材料,应用免疫荧光染色和逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测nestin和Ngn3的表达情况,免疫荧光染色检测胰腺内分泌标志胰岛素、胰高血糖素和外分泌标志CK-PAN和CK-19.结果 nestin和Ngn3在12～14周人胚胎胰腺组织均广泛表达.nestin和Ngn3阳性细胞中均无胰岛素及胰高血糖素表达;在胰岛中未见到nestin与Ngn3共表达,但在导管中可见共表达.RT-PCR 结果显示12～14周人胚胎胰腺中均有nestin和Ngn3的表达.结论Ngn3和nestin在人胚胎胰腺未分化细胞中表达,而具有分泌功能的内分泌细胞无表达.
- 郑宗梅陈东明李凌松李健宁沈丽陆爱丽王淑玲鲍卫汉
- 关键词：胰腺胰岛干细胞巢蛋白
- 从人胚胎胰腺中分离获得巢蛋白表达阳性的细胞被引量：6
- 2003年
- 目的 探讨从人胚胎胰腺组织分离巢蛋白 (Nestin)阳性细胞并进行体外传代培养的方法。 方法 取引产的16、18、2 0周人胚胎胰腺组织 ,分离胰岛样细胞簇 (Islet-likecellclusters,ICCs) ,进行体外培养。用免疫组织化学和逆转录 -聚合酶链反应 (RT -PCR)方法检测巢蛋白、胰十二指肠同源盒基因 - 1(Pancreaticandduodenalhomeoboxgene - 1,PDX - 1/IPF - 1)以及胰岛内分泌激素胰岛素和胰升糖素 (Glucagon)的表达。 结果 ICCs经体外培养可获得巢蛋白表达阳性细胞 ,这种细胞可进一步形成球状细胞簇 ,除有巢蛋白阳性细胞外 ,还有PDX - 1、胰岛素和胰升糖素表达阳性的细胞 ,并且细胞可连续传代。结论 从人胚胎胰腺组织中可分离获得巢蛋白表达阳性细胞 ,这种细胞可在体外增殖并有向胰岛内分泌细胞分化的能力。
- 夏修金鲍卫汉陈东明洪天配郑宗梅张玲陆爱丽王淑玲
- 关键词：胰腺干细胞
- 巢蛋白在人胚胎胰腺中的表达被引量：5
- 2003年
- 目的 探讨人胚胎胰腺中干细胞特异性标志巢蛋白 (Nestin)的表达及阳性细胞的分布。 方法 用连续切片免疫组织化学染色方法检测 16周胎龄人胚胎胰腺中巢蛋白、胰岛素、胰升糖素和导管上皮标志细胞角蛋白 19(CK19)的表达及分布。 结果 16周人胚胎胰腺中可检测到巢蛋白阳性细胞 ,分布于胰岛以及胰导管和腺泡结构中 ,并且以腺泡结构和小导管中的数目为多。部分胰岛素和CK19染色强阳性的细胞中巢蛋白染色为弱阳性 ,胰升糖素强阳性的部位则未见巢蛋白染色阳性的细胞。 结论 人胚胎胰腺中存在巢蛋白表达的细胞 ;巢蛋白阳性细胞可能是胰腺组织中一个特殊的细胞亚群 ,代表了一群未成熟细胞。
- 夏修金鲍卫汉陈东明洪天配张玲郑宗梅郭文媛
- 关键词：巢蛋白胚胎胰腺基因表达免疫组织化学
- 端粒酶永生化Nestin+/Ngn3+人胰腺干细胞的研究
- 郑宗梅
- 关键词：端粒酶胰腺干细胞
