邵攀峰
- 作品数：17 被引量：31H指数：4
- 供职机构：河南农业大学牧医工程学院更多>>
- 发文基金：国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 一起皮肤型鸡痘的诊断与防治被引量：4
- 2009年
- 2008年10月,河南省郑州市郊区某鸡场发生一起疑似鸡痘。将病鸡痘痂部位的皮肤和结节做成1∶10的悬液接种易感鸡,第6天后试验鸡表现精神萎靡,食欲减退,体重减轻,出现典型的皮肤痘疹;取病料接种鸡胚在鸡胚绒毛尿囊膜上出现豆粒大小的痘斑。结合发病情况、临床症状、剖检变化和实验室诊断,初步诊断为鸡痘。
- 邵攀峰陈红英崔保安
- 关键词：皮肤型鸡痘
- 一起鸡传染性支气管炎的RT-PCR诊断被引量：5
- 2009年
- 2008年11月,河南焦作某鸡场发生一起疑似鸡传染性支气管炎的疫情。根据鸡传染性支气管炎S1基因序列设计、合成1对引物,应用RT-PCR技术对病死鸡的气管和肾脏等组织进行RT-PCR扩增,扩增出预期目的基因。结合临床症状和病理剖检变化初步诊断为鸡传染性支气管炎。
- 王振亚王睿王彦斌陈红英魏战勇邵攀峰李厚伟崔保安
- 关键词：传染性支气管炎RT-PCR
- 猪IL-18在杆状病毒/昆虫细胞中的表达被引量：1
- 2011年
- IL-18作为一种多效性细胞因子,在机体免疫应答及各种生理功能中发挥着重要的调节作用,根据猪IL-18基因序列设计1对引物,将编码猪IL-18的成熟蛋白基因亚克隆到杆状病毒转移载体pFastBacDual中,并在C端融合6个组氨酸标签以利于纯化,然后转化到含穿梭载体Bacmid的感受态细胞DH10Bac中,发生转座作用。将重组质粒转染昆虫细胞,SDS-PAGE可检测到分子量为18 kDa左右的重组蛋白,Western blotting证实该重组蛋白可与兔抗猪IL-18抗体发生特异性反应。纯化后蛋白能明显促进猪T淋巴细胞转化,表明所表达的IL-18具有较高的生物活性。此研究为进一步开发研制新型免疫佐剂奠定了基础。
- 王振亚王彦彬陈红英邵攀峰宁晓东潘娜韩利静崔保安
- 关键词：昆虫细胞
- 一起育肥猪脑炎型链球菌病的诊断与防制被引量：2
- 2009年
- 2008年2月,河南省荥阳市某猪场育肥猪发生一起疑似猪脑炎型链球菌病感染的病例。无菌采集病猪肝脏、脾脏、肾脏和脑组织,分离到链球菌,并进行了生化鉴定。实验室检查结果结合流行病学调查、临床症状和剖检变化,初步诊断为链球菌病,经药敏试验筛选药物治疗结合综合防制,迅速控制了病情。
- 陈红英李新生邵攀峰刘金朋
- 关键词：脑炎型链球菌病防制
- 鸡IL-18真核表达载体的构建及其与ILTV弱毒疫苗联合免疫试验
- 为了探索鸡IL-18在传染性喉气管炎病毒(ILTV)弱毒疫苗中的免疫佐剂作用,将鸡IL-18克隆至真核表达载体pcDNA3.1中,构建真核重组表达质粒pcDNA3.1/ChIL-18。用pcDNA3.1/ChIL-18、...
- 邵攀峰陈红英崔保安王振亚宋亚鹏管倩刘金鹏
- 关键词：鸡IL-18真核表达载体鸡传染性喉气管炎病毒疫苗
- 文献传递
- EDSV HN03株纤维蛋白基因的克隆与序列分析
- 2008年
- 【目的】研究减蛋综合征病毒(EDSV)河南HN03株纤维蛋白基因全序列,为进一步分析EDSV纤维蛋白基因的结构、功能以及EDSV基因工程疫苗的研究奠定基础。【方法】根据GenBank中收录的EDSV纤维蛋白基因序列(Z86065),设计并合成了1对引物,PCR扩增EDSV河南HN03株纤维蛋白基因。将扩增产物克隆入pTG19-T载体并测序。【结果】测序结果表明,HN03株纤维蛋白基因为1935 bp,包含一个完整的开放阅读框,编码644个氨基酸,推导的氨基酸序列有5个潜在的N-糖基化位点,有5个与二硫键形成有关的半胱氨酸。序列分析表明,EDSV HN03株与EDSV国际标准株AV-127纤维蛋白基因核苷酸同源性为99.3%,氨基酸同源性为99.2%;与鹌鹑腺病毒QU株纤维蛋白基因核苷酸同源性为98.9%,氨基酸同源性为98.4%。【结论】腺病毒纤维蛋白基因相当保守。
- 陈红英李新生崔保安夏平安张红英廖仲磊邵攀峰
- 关键词：减蛋综合征病毒基因克隆
- ILTV Glycoprotein B(gB)与鸡Interleukin-18(IL-18)真核双表达载体的构建及表达
- 2011年
- 将ILTVgB基因和鸡IL-18基因插入到真核双表达载体pIRES中,构建共表达gB和IL-18基因的重组质粒pIRES-gB/IL18和表达gB基因的pIRES-gB质粒。通过脂质体将其转染鸡胚成纤维细胞,利用RT-PCR及间接免疫荧光检测重组质粒在体外的表达。将重组质粒通过腿部肌肉多点注射免疫21日龄雏鸡,应用ELISA和流式细胞仪分别检测免疫鸡的体液免疫及细胞免疫水平。结果显示,pIRES-gB/IL18和pIRES-gB转染细胞中分别含gB/IL-18基因的mRNA和gB基因的mRNA。间接免疫荧光检测表明,pIRES-gB/IL18和pIRES-gB在CEF细胞中有效地转录并表达gB蛋白。pIRES-gB/IL18和pIRES-gB免疫雏鸡后均能促进外周血T淋巴细胞亚群数量和血清中特异性抗体水平的增加,但前者的免疫效果明显优于后者,表明gB基因和鸡IL-18基因均获得了表达,且鸡IL-18能明显增强ILTV DNA疫苗诱发的免疫应答。
- 王淑娟商艳红陈红英邵攀峰刘金朋朱前磊王子馨崔保安
- 关键词：GLYCOPROTEIN
- 鸡传染性喉气管炎病毒的HN1株gB基因和鸡IL-18基因联合核酸疫苗及其制备方法
- 本发明公开了一种鸡传染性喉气管炎病毒的HN1株gB基因和鸡IL-18基因联合核酸疫苗，该疫苗由HN1株gB基因核酸疫苗与鸡IL-18基因核酸疫苗按1∶1配比混合组成。鸡传染性喉气管炎病毒的HN1株gB基因和鸡IL-18基...
- 陈红英魏战勇杨明凡崔保安邵攀峰刘金朋
- 文献传递
- 一种鸡传染性喉气管炎双价核酸疫苗及其制备方法
- 本发明公开了一种鸡传染性喉气管炎双价核酸疫苗，在真核表达载体pIRES的2个多克隆位点中分别插入了ILTV HN1株gB和ChIL-18完整基因，所述双价核酸疫苗共表达鸡传染性喉气管炎病毒gB基因和鸡IL-18基因。本发...
- 陈红英崔保安魏战勇邵攀峰刘金朋王淑娟朱前磊王子馨钞安军
- 文献传递
- 鸡白细胞介素18基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达
- 2009年
- 通过RT-PCR技术直接从罗曼鸡脾脏提取的总RNA中扩增鸡白细胞介素18(ChIL-18)全基因,并克隆和测序得到序列基因全长为597 bp的ChIL-18。将ChIL-18成熟蛋白编码区(510 bp)定向插入到原核表达载体pGEX-4T-1中谷胱甘肽转移酶(GST)基因的下游,构建重组表达质粒pGEX-ChIL-18,转化大肠杆菌BL21(DE3),在IPTG诱导下可高效表达融合蛋白(GST-ChIL-18)。SDS-PAGE可检测到分子质量约为46 kDa的GST-ChIL-18。Western blot证实GST-ChIL-18能与鸡IL-18单克隆抗体发生特异性反应。融合蛋白GST-ChIL-18经谷胱苷肽Seph-arose-4B亲和柱层析纯化后明显促进鸡T淋巴细胞转化,表明所表达的ChIL-18具有一定的生物活性。
- 李新生尹红征陈红英邵攀峰王振亚宋亚鹏
- 关键词：鸡白细胞介素18成熟蛋白克隆原核表达
