苑汐子
- 作品数：3 被引量：7H指数：1
- 供职机构：广西医科大学第一附属医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广西省自然科学基金广西医疗卫生重点科研课题更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- E2F-1基因反转录病毒载体的构建及其对人胃癌细胞MGC-803增殖的影响被引量：1
- 2010年
- 目的:通过构建人同源基因E2F-1反转录病毒表达载体,观察E2F-1过表达对胃癌细胞MGC-803增殖的影响。方法:应用基因重组技术将E2F-1基因克隆到反转录病毒载体pLXSN中,并将经酶切和RT-PCR检测正确的重组载体转染PA317包装细胞,收集病毒上清液感染胃癌细胞MGC-803。应用RT-PCR和Western印迹法检测MGC-803/pLXSN-E2F-1细胞中E2F-1 mRNA和蛋白的表达情况。应用克隆形成实验和MTT法检测细胞的增殖情况。结果:经酶切和RT-PCR检测结果显示,成功构建E2F-1反转录病毒表达载体。与MGC-803和MGC-803/pLXSN组相比,MGC-803/pLXSN-E2F-1组E2F-1mRNA和蛋白的表达明显上调(P<0.05)。MGC-803/pLXSN-E2F-1组的克隆形成率为48%,明显低于MGC-803组的81%和MGC-803/pLXSN组的77%,差异有统计学意义(P<0.01)。MGC-803/pLXSN-E2F-1组的细胞增殖率明显慢于MGC-803组和MGC-803/pLXSN组(P<0.01)。结论:成功构建了E2F-1基因过表达的反转录病毒表达载体,并将其成功感染MGC-803细胞,E2F-1过表达可抑制MGC-803细胞的增殖。
- 钱倩李雷王晓通苑汐子谢玉波肖强
- 关键词：胃肿瘤反转录病毒科
- siRNA沉默E2F-1基因对胃癌细胞MGC803 Rb蛋白表达的影响
- 目的应用RNA干扰技术/(RNAi/)研究针对E2F-1基因的siRNA,抑制胃癌MGC803细胞E2F-1基因的表达,研究对细胞中Rb蛋白的影响。
方法将本实验室保存的重组质粒E2F-l-siRNA扩增并做...
- 苑汐子
- 关键词：胃癌E2F-1RB蛋白
- 文献传递
- RNA干扰E2F-1表达对胃癌MGC803细胞生物学行为的影响及其机制被引量：6
- 2009年
- 目的利用基因表达谱芯片技术探讨E2F-1小分子干扰RNA（E2F-1-siRNA）影响胃癌细胞MGC803生物学行为的分子机制。方法分别抽取E2F-1-siRNA转染组和对照组（negative control—siRNA）的细胞总RNA，分离纯化mRNA并逆转录合成荧光分子（Cy3／Cy5）标记cDNA探针，与含有21522条人类22k基因表达谱芯片进行杂交。采用LuxScan 10K／A双通道激光扫描仪扫描芯片上两种信号，应用LuxScan3．0图像分析软件对芯片图像进行处理和分析。结果在21522条基因中，两组胃癌细胞间差异性表达基因为18条，其中上调基因8条，下调基因10条，下调的基因中有1条功能信息不明。结论体外干扰E2F-1基因表达后，胃癌MGC803细胞生物学行为的变化是多基因相互作用、多种信号通路相互调节的结果，其中的关键基因和信号传导通路值得进一步研究。
- 苑汐子尹永硕李雷谢玉波王晓通肖强
- 关键词：胃癌RNA干扰基因芯片基因表达
